Solubilidad y Desnaturalizacion de Las Proteinas

SOLUBILIDAD YDESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLAREAL Facultad de Ingeniería Geografía, Ambiental y Ecoturismo Bioquímica Integrantes:  Calagua Valerio, Jorge  Casimiro Vidal, Williams  Castro Espichán, Carlos  Chavez Castillo, Gisela  Del Villar Cueto, Betsy  Montero Garcia, Dalia  Quispe Pulido, Andrea  Rojas Alcedo, Kenyon Página 1 . . 9 V. 2 Objetivos…………………………………………………………………..15 Página 2 ....………………………………………………………. Pág. Conclusiones…….. Pág.…………………….ÍNDICE I. Pág.. Introducción………………………………………………. Procedimiento Teórico…. 15 IX. Pág. 11 VII.. Pág..……………………………………………….……………………… Pág.. 14 VIII. Pág. ……………………….……………………………. Materiales. Bibliografía…………………………………………………………….... Pág. Procedimiento Práctico…………... Reactivos e Insumos………………………………………. 3 IV.... 10 VI. Recomendaciones…….. 2 III..……………………………………. Pág.. II......…...... Resumen Teórico….. algunas participan en la contracción muscular y sirven para dar soporte estructural. Página 3 .INTRODUCCIÓN En este presente informe de laboratorio veremos el tema de las proteínas que son un grupo de biopolímeros constituidos de aminoácidos que exhiben una amplia gama de estructuras y funciones. OBJETIVOS Experimentar la solubilidad y desnaturalización de las proteínas con varios agentes físicos y químicos. Las proteínas como un grupo de biomoléculas. En la experiencia práctica se determinara la solubilidad y desnaturalización de las proteínas. desempeñan una gran variedad de funciones. otras trasportan y almacenan moléculas pequeñas. sólo por aminoácidos o bien por aminoácidos más otras moléculas o elementos adicionales no aminoaciditos. respectivamente. Dado que las proteínas cumplen funciones esenciales en el organismo y que ciertos componentes proteicos imprescindibles solamente pueden ser aportados a través de los alimentos. Son compuestos muy complejos formados por cadenas de cientos y miles de aminoácidos unidos entre sí por enlaces peptídicos. Página 4 . por lo tanto. La mayoría también contienen azufre y fósforo. No existe proceso biológico que no dependa de alguna manera de su presencia. en Holo proteínas y Heteroproteínas según estén formadas. calidad. su cantidad. Nos indica qué aminoácidos componen la cadena poli peptídica y el orden en que dichos aminoácidos se encuentran. su papel es fundamental. desde el punto de vista funcional. hidrógeno. las posibilidades de combinarlos son infinitas.RESUMEN TEÓRICO PROTEÍNAS Los nutrientes de gran importancia biológica que son las proteínas. de forma general. 1 Estructura primaria Es la secuencia de aminoácidos de la proteína. son macromoléculas que constituyen el principal nutriente para la formación de los músculos del cuerpo. Ocupan un lugar cuantitativo y cualitativamente importante entre las moléculas constituyentes de los seres vivos. La organización de una proteína viene definida por cuatro niveles estructurales denominados: estructura primaria. así como sus fuentes son de suma importancia. Las propiedades de cada una de las proteínas al igual que su funcionalidad dependen de la secuencia de aminoácidos que la formen. Si bien sólo los aminoácidos son 20. Cada una de estas estructuras informa de la disposición de la anterior en el espacio. estructura secundaria. La función de una proteína depende de su secuencia y de la forma que ésta adopte. Están constituidas por carbono. oxígeno y nitrógeno. estructura terciaria y estructura cuaternaria. ESTRUCTURA DE LAS PROTEÍNAS Se clasifican. 2 Estructura secundaria La estructura secundaria es la disposición de la secuencia de aminoácidos en el espacio. adquieren una disposición espacial estable. Se debe a la formación de enlaces de hidrógeno entre el -C=O de un aminoácido y el -NH. Presentan esta estructura secundaria la queratina de la seda o fibroína. es la estructura primaria la que determina cuál será la secundaria y por tanto la terciaria. la estructura secundaria. En definitiva. denominada disposición en lámina plegada. Página 5 .del cuarto aminoácido que le sigue. Los aminoácidos. 3 Estructura terciaria La estructura terciaria informa sobre la disposición de la estructura secundaria de un poli péptido al plegarse sobre sí misma originando una conformación globular.  La conformación beta En esta disposición los aminoácidos no forman una hélice sino una cadena en forma de zigzag. a medida que van siendo enlazados durante la síntesis de proteínas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces. Existen dos tipos de estructura secundaria:  La a(alfa)-hélice Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente sobre sí misma la estructura primaria. Aparecen varios tipos de enlaces: 1. como en la hemoglobina. como la cápsida del virus de la poliomielitis. hormonales. mediante enlaces débiles (no covalentes) de varias cadenas polipeptídicas con estructura terciaria.. que consta de sesenta unidades proteicas.el puente desulfuro entre los radicales de aminoácidos que tienen azufre.. 3.los puentes eléctricos. El número de protómero varía desde dos. Cada una de estas cadenas polipeptídicas recibe el nombre de protómero. etc.. 2.las interacciones hidrófobas. 4. cuatro. como en lahexoquinasa. o muchos. para formar un complejo proteico.los puentes de hidrógeno. 4 Estructura cuaternaria Esta estructura informa de la unión.. Página 6 . enzimáticas.Esta conformación globular facilita la solubilidad en agua y así realizar funciones de transporte. Esta conformación globular se mantiene estable gracias a la existencia de enlaces entre los radicales R de los aminoácidos. Además. por lo que un cambio en la estructura de la proteína puede significar una pérdida de la función. si las condiciones se restablecen. PRINCIPALES FUNCIONES DE LAS PROTEÍNAS Las funciones de las proteínas son las siguientes: Página 7 . muy abierta y con una interacción máxima con el disolvente. En algunos casos. proceso que se denomina re naturalización. La desnaturalización se puede producir por cambios de temperatura.DE  PROPIEDADES PROTEÍNAS LAS ESPECIFICIDAD La especificidad se refiere a su función. Todas las proteínas desnaturalizadas tienen la misma conformación. por lo que sirve para la construcción de filogenéticos"  DESNATURALIZACIÓN Consiste en la pérdida de la estructura terciaria. (huevo cocido o frito ). por romperse los puentes que forman dicha estructura. variaciones del pH. una proteína desnaturalizada puede volver a su anterior plegamiento o conformación. no todas los individuos poseen proteínas específicas suyas que se ponen de manifiesto en los procesos de rechazo de órganos grado de parentesco entre individuos. cada una lleva a cabo una determinada función y lo realiza porque posee una determinada estructura primaria y una conformación espacial propia. por lo que una proteína soluble en agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita.   La función de resistencia o función estructural de las proteínas también es de gran importancia ya que las proteínas forman tejidos de sostén y relleno que confieren elasticidad y resistencia a órganos y tejidos como el colágeno del tejido conjuntivo fibroso. las proteínas cumplen también una función energética para el organismo pudiendo aportar hasta 4 kcal. como venenos de serpientes o la del botulismo son proteínas generadas con funciones defensivas. Las inmunoglobulinas actúan como anticuerpos ante posibles antígenos. Las proteínas tienen una función defensiva. La contracción de los músculos través de la miosina y actina es una función de las proteínas contráctiles que facilitan el movimiento de las células constituyendo las miofibrillas que son responsables de la contracción de los músculos. Las proteínas funcionan como amortiguadores. Las mucinas protegen las mucosas y tienen efecto germicida. Toxinas bacterianas. reticulina y elastina elastina del tejido conjuntivo elástico. hormonas. El fibrinógeno y la trombina contribuyen a la formación coágulos de sangre para evitar las hemorragias. de energía por gramo. Algunas proteínas como la ciclina sirven para regular la división celular y otras regulan la expresión de ciertos genes. manteniendo en diversos medios tanto el pH interno como el equilibrio osmótico. Es la conocida como función homeostática de las proteínas. Ejemplos de la función de reserva de las proteínas son la lacto albúmina de la leche o a ovoalbúmina de la clara de huevo. enzimas y vitaminas que son causantes de las reacciones químicas que suceden en el organismo. proteínas plasmáticas. En la función contráctil de las proteínas también está implicada la dineina que está relacionada con el movimiento de cilios y flagelos. Página 8 .  Las proteínas cuya función es enzimática son las más especializadas y numerosas. jugos digestivos. Algunas proteínas forman estructuras celulares como las histonas.  Las proteínas tienen funciones reguladoras puesto que de ellas están formados los siguientes compuestos: Hemoglobina. la hordeina de la cebada y la gliadina del grano de trigo constituyendo estos últimos la reserva de aminoácidos para el desarrollo del embrión.  Si fuera necesario. que forman parte de los cromosomas que regulan la expresión genética. Actúan como biocatalizadores acelerando las reacciones químicas del metabolismo. ya que crean los anticuerpos y regulan factores contra agentes extraños o infecciones. Con este tipo de proteínas se forma la estructura del organismo. Algunas glicoproteínas actúan como receptores formando parte de las membranas celulares o facilitan el transporte de sustancias. 4% de proteínas)  Chorizo. jamón cocido (22% de proteínas tienen estos alimentos)  Sardinas en conserva (Las sardinas en conserva tienen un 22% de proteínas)  Carne de cerdo no grasa (La carne de cerdo no grasa tiene 21.7% de proteínas)  Pollo a la parrilla (20. Otros ejemplos de proteínas cuya función es el transporte son citocromos que transportan electrones e lipoproteínas que transportan lípidos por la sangre.2% de proteínas)  Carne de buey no grasa (21% de proteínas se puede encontrar en este alimento)  Bonito (Alimento que contiene un 21% de proteínas)  Queso de Cabrales (Un 21% de proteínas se puede encontrar en el queso de Cabrales)  Filete de ternera (Proporciona un aporte de proteínas 20. Ejemplos de ello son la hemoglobina y la mioglobina.6% de proteínas contiene el pollo a la parrilla)  Hígado (Este alimento tiene un porcentaje de 20. Las proteínas realizan funciones de transporte.5% de proteínas) Página 9 .7%)  Carne magra de vacuno (Alimento con un 20. la función de proteínas como la hemoglobina que transporta el oxígeno la realizas la hemocianina.8% de proteínas se puede encontrar en la pechuga de pollo)  Fiambre de pavo (El fiambre de pavo es un alimento que contiene un 22. ALIMENTOS CON ALTO NIVEL PROTEICO  Lentejas (Las lentejas tienen un 23. proteínas transportadoras del oxígeno en la sangre en los organismos vertebrados y en los músculos respectivamente. En los invertebrados.5% de proteínas)  Atún (23% de proteínas por cada 100 gramos de atún)  Guisantes (El 23% de cada 100 gramos de guisantes son proteínas)  Queso Roquefort (El queso roquefort es un alimento con un 23% de proteínas)  Pechuga pollo (Un 22. 5% de proteínas)  Cabrito (19% de proteínas se pueden encontrar en la carne de este animal)  Garbanzos. Cigalas. (20.1% de proteínas)  Garbanzos (Estas legumbres tienen un 20% de proteínas)  Almendras (Las almendras tienen un 20% de proteínas)  Carne magra de cerdo (Un 20% de la carne magra de cerdo son proteínas)  Morcilla (Alimento que contiene un 19. judías blancas (Estas legumbres contienen alrededor de un 19% de proteínas)  Rape.. gambas.. langostinos. REACTIVOS E INSUMOS Página 10 . salmón (El rape y el salmón son pescados que tienen un 19% de proteínas)  Cordero (La carne de cordero tiene un 18% de proteínas) MATERIALES. PROCEDIMIENTO TEÓRICO  Desnaturalización de la albumina con ácidos y bases fuertes Página 11 . Tomar 3 tubos de ensayo y colocar en cada uno 1ml de albumina Agregar 3 ml de ácido sulfúrico. ácido nítrico. hidróxido de sodio en cada tubo respectivamente y agitar Dejar en reposo en la gradilla y observar si se presenta solubilidad  Desnaturalización de la albumina con metales pesados Colocar un tubo de ensayo de 1 ml de cloruro de mercurio con 2 ml de albumina agitar y observar la solubilidad En un tubo de ensayo agregar nitrato de plata agregar 2 ml de albumina agitar y observar la solubilidad. Observar cada tubo  Adición de limón y ácido clorhídrico Colocar en el matraz 20 ml de leche y adicionar 10 gotas de limón mezclar y observar Colocar en el Becker 20 ml de leche adicionar 10 gotas de ácido clorhídrico mezclar y observar PROCEDIMIENTO PRÁCTICO Página 12 .  Desnaturalización de albumina con ácido pícrico y tricloroacetico En el tubo de ensayo 1 agregar 1 ml de ácido pícrico con 2 ml de albumina En el tubo de ensayo 2 agregar ácido tricloroacetico A ambos tubos calentarlos a baño maría por 5 minutos y dejarlos enfriar.  Adición del limón y ácido clorhídrico  Adición de limón IMAGEN 1 Observamos la obtención de las gotas de limón para luego combinarlas con la leche IMAGEN 2 Mezclamos el limón con la leche y lo dejamos reposar IMAGEN 3 Se observa que se ha dividido en dos sustancias: Caseína y materia grasa del suero  Adición del ácido clorhídrico IMAGEN 4 Adherimos el ácido clorhídrico a la leche y lo dejamos reposar Página 13 . IMAGEN 5 Observamos que la solubilidad ha cambiado considerablemente Desnaturalización de la albúmina con ácidos y  bases fuertes IMAGEN 6 Separamos en 3 tubos de ensayo 1 ml de clara de huevo IMAGEN 7 Agregamos hidróxido de sodio a la primera muestra IMAGEN 8 Agregamos ácido sulfúrico a la segunda muestra IMAGEN 9 Agregamos ácido nítrico a la muestra numero 3 IMAGEN 10 Página 14 . al medio el ácido sulfúrico y a la derecha el ácido nítrico  Desnaturalización de la albumina con metales pesados IMAGEN 11 Colocamos 1 ml de clara de huevo en el tubo de ensayo IMAGEN 12 Agregamos cloruro de mercurio a la muestra  Desnaturalización de la albumina con ácido pícrico y tricloroacetico IMAGEN 13 Colocamos 1 ml de ácido pícrico dentro de la muestra Página 15 .A la izquierda se observa el hidróxido de sodio.  Observar cuidadosamente cada cambio físico y visual que experimenta nuestras muestras al ser expuestas al reactante y no perder ningún acontecimiento previo a esto.  Se recomienda no haber ingerido ningún tipo de alimento antes de la obtención de la muestra ya que puede generar alteración en los resultados.  Usa guantes y mascarilla para evitar contaminar la muestra.IMAGEN 14 Observamos la muestra después del proceso RECOMENDACIONES  Usar mandil para evitar ensuciarse y contaminar las muestras.  Limpiar bien nuestros recipientes donde pondremos nuestras muestras para evitar algún error en nuestras medidas. Página 16 . es/funcion.com/pdfs/Proteinas.Rosenberg. O sea se separará la caseína y la materia grasa. Michael Sienko. el limón hace que la leche se corte.     http://proteinas.org. Cuando tomas leche los ácidos de tu estomago cortaran la leche.es/proteinuria-proteinas-orina http://proteinas.cl/Ciencias/ProteinasEstruct. Mexico D. quedando aparte el suero.CONCLUSIONES        La leche se podría decir que es una base. 1970. Las proteínas pueden verse como un precipitado al desnaturalizarse. Raymond Chang. McGraw – Hill.  Química general. Todas las sustancias presentaron espuma en la parte superior. novena edición.pdf http://www.pdf Página 17 . Pero al ser agitados se forma una mezcla homogénea de color amarillo claro.clinicaindautxu.V.  Química. Cuando uno le pone a la leche limón y lo dejas reposar.A de C. La clara se vuelve opaca porque las proteínas se descomponen o se desnaturalizan debido a agentes externos ya sea una base o un ácido. Jerome L. Madrid 1970. La mayoría de las proteínas pierden su función biológica cuando están desnaturalizadas. (una capa inferior de color amarillo turbio y una capa superior de aspecto viscoso de color transparente).org. BIBLIOGRAFIA  Química. esto es la base para fabricar quesos. Al agregar el ácido nítrico se forman dos capas. La leche se corta debido a que se destruye el azúcar por la presencia de ácido. McGraw – Hill.F. además la albumina no se desnaturalizo por completo en ningún caso. lo que indica que son proteínas. y el limón es un ácido.htm http://www. 2007 /Interamericana editores S. 7ma edición.profesorenlinea.