La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece depoder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en el experimento 1. Sin embargo, en presencia de ClH y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrólisis se realiza con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo, aparecerá un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrólisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis parcial de la sacarosa. DISCUSIÓN DE RESULTADOS En el experimento A , se identificó a 3 tipos de azúcares: glucosa, fructosa y sacarosa.La glucosa que dio positivo tanto a Benedict como a Fehling lo cual indico que es un azúcar reductor, yaque al agregar el Benedict, en esta solución, el cobre se encuentra en forma del Ion complejo citratocúprico, por lo que la glucosa, que es un monosacárido redujo el Ion cúprico a Ion cuproso, el cualprecipitó como un oxido de color rojo ladrillo. También dio positivo con el Fehling debido a que lasacarosa al romperse el enlace del Carbono anomérico y dar el hemiacetal para reducirse al aldehído,reaccionó con la solución básica del complejo tartrato cúprico, el cual se oxidó nuevamente al acidocarboxílico correspondiente, mientras que le cobre (II) se redujo a cobre (I), el cual se precipitó comooxido cuproso rojo, Cu 2 O, también dando así positivo al reactivo.Para la sacarosa y fructosa dieron negativos en ambos reactivos (excepto en el Benedict ya que lafructosa dio positivo, y esto no debió salir como resultado ya que la fructosa no es un azúcar reductor; esuna pentosa y además una cetona por lo tanto no tiene el carbono anomérico hemiacetal los cuales danprueba positiva en este reactivo; posiblemente el resultado erróneo se debió a varios factores uno deellos es que el reactivo Benedict estaba contaminado, y otro factor que influyo fue la contaminación delazúcar por pipetas con monosacáridos); sin embargo en los que dio negativo, era correcto debido a queestos eran disacáridos, por lo que no son hemiacetales y por lo tanto no son reductores, razón por la cuállas pruebas dieron negativas. En el experimento B, la sacarosa como tal, al ser un disacárido (glucosa+fructosa) que no poseecarbonos anoméricos libres, ni forma hemiacetal, por lo que carece de poder reductor y al hacer lareacción con el Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en el experimento 1. Sinembargo, en presencia de HCl y al calentar, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una moléculade agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, la glucosa comovimos en el experimento 1 es un azúcar reductor, mientras que la fructosa no. La prueba de que seha verificado la hidrólisis se realizó con el Fehling y el Benedict y el resultado fue positivo para ambos(debida a la glucosa), apareciendo un precipitado rojo en ambos con la solución naranja para elBenedict y para el Fehling rosa (por la fenolftaleína). En el experimento C , se realizaron los 2 tubos testigos de almidón en tiempo cero a los que se lesagregó a uno la mezcla de yodo/yoduro y al otro la prueba de benedict. Ya que el almidón es unpolisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se coloreó de azul en presencia de yodo debido no a una reacción química sino a la adsorción o fijaciónde yodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Y ya que como lospolisacáridos no tienen poder reductor, la reacción de Benedict dio negativa en color azul cielo.Por último se agregó a la solución restante de almidón, HCl conc., y se calentó para hidrolizar ygenerar glucosa al romper los enlaces la amilosa y amilopeptina, generando así la maltosa, la cualtiene dos moléculas de D-glucosa unidas y es probable que ambas consten de un gran numero demoléculas de D-glucosa unidas mediante enlaces α-glucidos, y al hidrolizar un polisacárido, de estesiempre se obtienen sus constituyentes monosacáridos, por la acción de ácidos diluidos, dándonosasí glucosa.Cada 5 minutos se sacaban los tubos del baño maría, los primeros tubos no dieron el precipitado rojocon el Benedict, debido a que no terminaban de hidrolizarse sus componentes y tampoco se perdía lacoloración del yodo, sin embargo iban cambiando de coloración, los de yodo de un azul marino a uncafé oscuro y luego naranja claro que poco a poco iba perdiendo su color en los últimos tubos, lo queindicaba que los polisacáridos iban siendo hidrolizados para esta prueba y para los que conteníanBenedict de azul iba pasando por morado, después rosa hasta los últimos 2 tubos dar una coloraciónen rojo con su precipitado, lo que indicó la aparición de la glucosa y por lo tanto la hidrólisis delpolisacárido. Explique porqué se le llama inversión a la hidrólisis de la sacarosa Cuando se hidroliza (+)-sacarosa con ácido acuoso diluido, se obtienen cantidades iguales de D-(+)-glucosa y D-(-)-fructosa, esta hidrólisis va acompañada de un cambio en el signo de la rotación, de positivo a negativo; por eso se le suele llamar la inversión de la sacarosa, y la mezcla levógira de D-(+)-glucosa y D-(-)-fructosa se le llama azúcar invertido. 3.- ¿Para que se efectúa la prueba de Benedict antes y después de hervir la sacarosa? Antes para que se rompa el enlace y de esta manera se hidrolice y se calienta hasta llevar la mezcla aebullición, el azúcar en solución alcalina a elevadas temperaturas se convertirá en D- gluconato y su ene-diol, rompiéndose luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electronesexpuestos,reaccionarán con el Cu ++ . Se obtiene entonces un azúcar oxidado y dos iones Cu+. Posteriormente el Cu+ producido reacciona con los iones OH- presentes en la solución para formar el hidróxido de cobre, después este pierde agua y se convierte en óxido de cobre que precipitaevidenciando así la presencia del azúcar reductor. 4.- ¿Para que se efectúa la prueba de yodo-yoduro y la prueba de Benedict antes de hidrolizar elalmidón y cada 5 minutos que dura en calentamiento con HCl concentrado? Para verificar que no es un azúcar reductor al ser un polisacárido y de esta manera tener un blancocomo testigo de las reacciones posteriores que se efectuaran, ya que al realizar las demás pruebas deesta manera se podrá apreciar la hidrólisis del almidón en el transcurso del tiempo. 5.- ¿Se pueden desechar libremente los efluentes líquidos al drenaje? Diga que tratamiento debería darleen cada caso para poder desecharlos. En todos los casos se podrían desechar por el drenaje por que muchos fluidos ya fueronneutralizados previamente , además de que no es mucha la cantidad de efluentes. 6.- ¿Qué concepto tiene de actividad óptica, rotación específica y luz polarizada? Actividad óptica : Una sustancia ópticamente activa es aquella que rota el plano de la luz polarizada. Cuando se le hace pasar luz polarizada, vibrando en un plano determinado, por unasustancia ópticamente activa, emerge vibrando en un plano diferente. Rotación específica:Es el número observado de grados de rotación si se emplea un tubo de 1dm(10cm) de largo y si el compuesto examinado está presente en la cantidad de 1g/ml. Para tubosde otras longitudes y concentraciones diferentes se calcula por medio de la ecuación:Rotación específica = rotación observada (grados)/ largo (dm) x g/ml Donde d representa la densidad de un líquido puro o la concentración de una solución. La magnitud derotación depende de cuántas moléculas sean interceptadas por la luz a su paso por el tubo.Si se considera la longitud del tubo y la concentración, resulta que la magnitud del giro, además de su sentido, es una característica de cada compuesto activo individual. Luz polarizada: En un plano es luz cuyas vibraciones ocurren en uno solo de los planos posibles. CONCLUSIONES Por medio de esta práctica se lograron reconocer algunas de las propiedades de los carbohidratos, comolo es su propiedad reductora. Se realizó la hidrólisis tanto de un disacárido como de un polisacárido, delos cuáles se comprobó esta reacción por medio de pruebas químicas con reactivos que ayudan a la [ ] d l ×= α α identificación de los compuestos que se forman después de estas reacciones para determinar ycomprobar que se realizó bien el procedimiento.Para poder detectar los azucares reductores se utilizo el reactivo de benedict, el cual se utiliza paradetectar azúcares reductoras, ya que detecta los grupos aldehídos libres presentes en azúcaresreductoras (monosacáridos y algunos disacáridos). Los carbohidratos con estos grupos funcionales (losaldehídos) pueden ser oxidados; al añadir el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y al calentarlo,obtuvimos un cambio en el color de la reacción a naranja o ladrillo intenso mientras más sea laabundancia de azúcares reductoras, y un cambio a color verde indica la presencia de azúcaresreductores en menor cantidad.Se demostró que los polisacáridos como el almidón están compuestos de monosacáridos unidos por enlaces glicosídicos. Como se mencionó anteriormente, el almidón está constituido de un solomonosacárido, la glucosa. Las propiedades del almidón son diferentes a las de la glucosa como seevidencio mediante la hidrólisis del almidón para generar glucosa. Todos los polisacáridos sonhidrolizados en sus constituyentes monosacáridos, por la acción de ácidos diluidos. La hidrólisis delalmidón se puede evidencio con dos pruebas:a. Desaparición del color azul característico de la prueba del yodo.b. Aparición de glucosa, un azúcar reductor. La aparición de glucosa se evidenció mediante la prueba deBenedict http://es.scribd.com/doc/17151688/1Hidrolisis-de-carbohidratos Manual de practicas http://www.veterinaria.uabjo.mx/manuales/MANUAL%20DE%20PRACTICA%20DE%20BIOQUI MICA.pdf Metodos http://www.youtube.com/watch?v=yu9k2iPta-k hidrolisis de polisacáridos http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/hidrolisis%20polisacaridos.html Para personas que se encuentran en Ecuador: desde el 29 de Abril hasta el 30 de Mayo en efectivo o cheque certificado en las oficinas de Yachay EP ubicadas en Amazonas N23-146 y La Niña, de 9:00 a 13:00; o a través de depósito (utilizar papeleta de recaudaciones/efectivo/cheque) o transferencia alBanco Nacional de Fomento y enviando el comprobante de depósito o transferencia a
[email protected] hasta el 30 de Mayo.