“Año del Centenario de Machu Picchu para el Mundo”UNIVERSIDAD DE HUÁNUCO FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD E.A.P. ODONTOLOGÍA EFICACIA ANTIBACTERIANA IN VITRO DEL EXTRACTO DE HOJA DE COCA EN COMPARACIÓN CON CLORHEXIDINA FRENTE A STAPHYLOCOCCUS Y STREPTOCOCCUS HUANUCO 2011 Presentado por el Bachiller Ricardo A Rojas Sarco. HUÁNUCO – PERÚ 2011 INDICE DATOS GENERALES DE LA TESIS Pág. RESUMEN PRESENTACIÓN INTRODUCCIÓN CAPITULO I 1. EL PROBLEMA DE INVESTIGACION 1.1 Fundamentación del Problema ………………………………………………. 1.2 Formulación del Problema………………...……………………….……….….. 7 8 Problema General……………………………………………………………… 8 Problema Específico…………………………………………………………... 8 1.3 Justificación………………………………………………………….….……….. 9 1.4 Objetivos. ……………………………………………………………….….…….. 9 Objetivo General………………………………………………….…….….…. 9 Objetivos Específicos………………………………...……………………... 9 1.5 Limitaciones o Dificultades………………………………………………..…..…. 10 CAPITULO II 2. MARCO TEÓRICO 2.1 Antecedentes…………………………………………….……………………...... 11 2.2 Base Teóricas y Científicas……………………………………………….…….. 14 2.2.1 Coca (Erythroxylum)………………………………………………….. 14 2.2.2 Clorhexidina…………………………………………………………….. 19 2.2.3 Staphylococos Aureus y estreptococos mutans.……………………. 22 2.3 Definición de Términos…………………………………………….…………….. 32 2.4 Hipótesis………………………………………………………….……………….. 35 2.5 Identificación de variables………………………………………….………….... 35 2.6 Operacionalización de Variables………….……………….….......…..……… 36 CAPITULO III 3. DISEÑO METODOLOGÍCO 3.1 Tipo de Investigación……………………………………………………………. 37 3.2 Población y Muestra ……….…………………………………………………. 38 3.3 tecnica de recoleccion de instrumentos……………………………………………. 39 3.4 plan de tabulacion y analisis de datos……………………………………………… 40 CAPITULO IV 4. RESULTADOS 4.1resultados De Las Observaciones………………………………………….. 41 4.2 Prueba De Hipótesis………………………………………………………… 44 DISCUSIÓN……………………………………………………………………… 55 CONCLUCIONES……………………………………………………………….. 57 RECOMENDACIONES………………………………………………………………… 58 BIBLIOGRAFÍA………………………………………………………………………… 59 ANEXOS……………………………………………………………………………….. 65 Gracias a la investigación realizada por la U.CAPITULO I EL PROBLEMA 1. Cuando este sistema ecológico se encuentra en equilibrio se denomina eubiosis y.S. el consumo de la hoja de coca en la población. ha demostrado interferir con el rol del proceso carioso. ocasionando la perdida dentaria. en cambio. conllevando ha enfermedades periodontales. constituyendo un ecosistema. con numerosos microorganismos asociados a ellos. que correspondería a una boca enferma.M. se pretende comparar la eficacia antibacteriana de dicha hoja con la clorhexidina en el tratamiento de staphylococcus aureus 7 .1 FUNDAMENTACION DEL PROBLEMA La cavidad oral esta formada por un conjunto de tejidos. padecen de enfermedades buco dentales debido a la carencia de conocimiento sobre la higiene bucal. cuando estas relaciones se han alterado. pasara a llamarse disbiois. al mismo tiempo la excesiva actividad masticatoria a perjudicado las estructuras dentales produciendo traumas en las estructuras duras del diente y en las que lo rodean. La gran mayoría de la población andina del Perú.M. Pero de manera compensatoria e inconsciente. sobre la hoja de coca como antibacteriano sobre microorganismos de la cavidad oral. debido a los componentes beneficiosos que contiene dicha hoja.N. Para este estudio se elabora la siguiente pregunta: General • ¿Cuál es la eficacia antibacteriana in vitro del extracto de hoja de coca en comparación con la clorhexidina 0.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. y dar una opción en el futuro de revertir la dramática situacional de la salud bucal de la población andina del Perú. 1..2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja de coca en comparación con la clorhexidina al 0. Es por tal motivo que dicha investigación tiene como propósito principal dar solución a las enfermedades buco dentales de las personas de bajo recursos económicos y menos accesibilidad a un establecimiento de salud bucal.12 % en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans? Especifico • ¿Será el extracto de hoja de coca un eficaz antibacteriano in vitro frente a staphylococcus aureus y streptococcus mutans? • ¿Habrá diferencia entre la eficacia antibacteriana in Vitro de la clorhexidina 0.y streptococcus mutans.12% en comparación con extracto de hoja de coca frente a staphylococcus aureus y streptococcus mutans? 8 . 3 JUSTIFICACION Una de las incógnitas que se tratan de explicar de manera. Con los resultados positivos que se obtengan de la existencia de la eficacia antibacteriana del extracto alcohólico de la hoja de coca. se podrá comparar con otro agente bactericida efectivo que es la clorhexidina y encaminar una planificación para el tratamiento.4 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN Objetivo General: • Determinar la eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja de coca en comparación con la clorhexidina al 0. para poder aportar un mayor conocimiento en el área de la Odontoestomatología y aclarar las incógnitas sobre el beneficio de dicha planta. pero la mayoría de las investigaciones de la hoja de coca en el área de la Odontoestomatología no logran explicar.1. 9 .12% en comparación con el extracto de hoja de coca en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. es la causa de los bajos niveles de lesiones cariosas en personas que practican el hábito de masticar la hoja de coca crónicamente. y uno de los factores que necesita mayor importancia de estudio. es la actividad antibacteriana de la hoja de coca. de manera clara dicha eficacia.12 % en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans Objetivos Específicos: • Identificar la eficacia del extracto de hoja de coca como antibacteriano in vitro en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. tanto preventivo como interceptivo. Es necesario que se consideren todos los factores que puedan intervenir en la baja incidencia de las lesiones cariosas en los chacchadores de hoja de coca. de enfermedades orales de origen infeccioso con el uso de extractos de la hoja de coca o con los componentes exactos de la planta que causen dicho efecto antibacteriano. • Evaluar la eficacia antibacteriana in vitro entre la clorhexidina 0. 1. 1. • Contaminación del los agares con otros microorganismos 10 . la cual impide obtener datos importantes para realizar este trabajo. • El crecimiento inadecuado de la bacteria con la que se esta trabajando.5 LIMITACIONES O DIFICULTADES • Los pocos estudios realizados con la hoja de coca a nivel local. Mientras que el grado de abrasión dentaria fue alto.. C. en 1954.CAPITULO II MARCO TEORICO 2. A. en 1963. M.. realiza un estudio a 40 individuos en Puno. que los chacchadores (masticadores) de la hoja de coca presentaban lesiones cariosas en un mínimo porcentaje.3 11 .. que el número de piezas que faltaban y el porcentaje de caries eran bajos. en 1972. realiza un estudio en un grupo de 500 chacchadores de la hoja de coca. realizo un estudio en 30 masticadores de la hoja de coca.2 • Según ÚNGARO.1 ANTECEDENTES • Según GOICOCHEA. en el cual da como uno de sus resultados. que la prevalecía de lesiones cariosas era de un 68%.1 • Según AYALA. mientras que la abrasión dentaria fue elevada. realizaron un estudio sobre la acción inhibitoria in vitro de Erythroxylum coca Lam var. y CHAVEZ.5 • Según PANDO. sobre el crecimiento de Enterobacterias.. truxillense contenidos en el filtro de mate de coca frente a las especies de hongos. y VILLANUEVA..7 • Según AGUILAR. realizó estudios en comunidades de chacchadores de hoja de coca con un tiempo de hábito mayor de 10 años y edades comprendidas entre los 30 y 50 años. en 1994. en 1996. Ángel. J. E. O.. P. Y Erythroxylum novogranatense (Morris) var. en 1995. Gram (+) y levaduras aisladas. Cocos Gram (+) y Bacillus. estudio las propiedades inhibitorias del Erythroxylum coca lam. hicieron un estudio de actividad inhibitoria del extracto acuoso metanólico de los principios activos totales extraídos de las hojas de Erythroxylum novogranatense (Morris) var. con edades comprendidas entre los 30 y 50 años y con un tiempo de chacchado de la hoja de coca mayor de 10 años. P. J. var.. coca y del Erythroxylum Novogranatense var. y REYES. R. E... C. realizaron un estudio para observar el comportamiento “in vitro” de algunas especies del género Mycobacterium frente a Erythroxylum coca-Erythroxylum novogranatense (Mate de coca). truxillense contenidas en el filtro de “Mate de Coca” frente a cepas de uropatógenos Gram negativos multiresistentes. en 1988.. realizo un estudio con 67 sujetos entre 30 y 45 años de edad y con un tiempo del habito mayor a 10 años. en 1988.11 12 . en 1996. realiza un estudio en una comunidad de chacchadores con 60 individuos. M. y ENCARNACIÓN.8 • Según CASTRO. realizaron un trabajo de investigación sobre la propiedad inhibitoria de Erythroxylum coca lam. en 1988. en 1995.10 • Según MERTZ. truxillense Rugby contenidas en el filtro de “Mate de coca”..6 • Según LI SING.• Según CORONEL. M.4 • Según NAVARRO A. truxillense Rugby frente a cepas bacterianas de bacterias Gram (-).9 • Según CAM. coca y Erythroxylum Novogranatense var. enfermedad periodontal y desgaste dentario y su relación con la presencia. absceso radicular y gingivitis.15 • Según VENTURA G. caries dental..13 • Según GALVEZ. frente a dos extractos de Erythroxylum Novogranatense (Morris) var. la presente investigación ha comprendido el estudio de 40 muestras. F. realizó un estudio sobre la acción inhibitoria de crecimiento del extracto acuoso de Erythroxylum Novogranatense Morris var. Staphylococcus epidermidis. RUIZ J. en el 2009. Rusby: Acuoso y metanólico de principios activos totales.14 • Según BORROVIC RAMOS. truxillense. estudió la actividad antibacteriana del aceite esencial de la hoja de coca.16 13 ... en el 2006.12 • Según FLORES MIR. F. tiempo y frecuencia del habito de masticación de hojas de coca.• Según SOLANO. D. ROQUE M. en 1997. frente a las cepas de Escherichia coli. en 1997... y Pseudomonas aeruginosa. realizo un estudio para determinar la prevalencia de lesiones cariosas... cálculo dental. CASTRO A. realizo una investigación acerca del efecto antibacteriano del extracto alcohólico de la hoja de coca frente a la microflora oral.. Bacillus subtilis. en 1996. correspondientes a placa bacteriana. O. truxillense (Rugby) frente a bacterias Gram negativas que presentaron resistencia a 5 antibacterianos. 2. MAMANI. P. América Indígena. “familia Erythroxylaceae”. M. que da vida. BURCHARD. Miami. planta arbustiva de crecimiento silvestre en las laderas de los Andes Peruanos.1 Generalidades: Etimológicamente la palabra coca proviene del quechua “kuka” o “koka” que debe interpretarse. “ka” o “kau” vivificante. (Anexo 1). según Storni. A.. principalmente entre los 1000 y 2000 m de altitud.17 El género Erythroxylum. y SANDAGORDA. 19. como medicina. CARTER. instrumento para adivinar el futuro y diagnosticar enfermedades.2.1. R. donde el uso más conocido que se le da a las hojas de coca es el “chacchado”. parte más destacada o principal de algo. El Erythroxylum coca.19.: Aspectos socioculturales del consumo de la coca. 20 ___________________________ 17.2 BASES TEORICAS 2. 18.1 COCA (ERYTHROXYLUM): 2. Se encuentra ampliamente distribuido en las regiones tropicales de Sudamérica.2. R.: Coca en Bolivia. Universidad de Florida. principalmente en el Perú y Bolivia y en menor escala en Colombia.: la masticación de la coca. Sin embargo también las usan como “lubricante” para la interacción social. Ecuador. “ku” o “ko”. TERRAN. W. BORGHELLI.18 Actualmente se cultivan varias especies de coca en el país.: Revista de la Asociación Odontológica Argentina. vigorosa y fuerte. y PARKENSON. Venezuela y Brasil. 20. Bolivia y otros países cálidos. 14 . En la población andina tradicional. M. cultivadas desde tiempos remotos en el Perú. 21. sabor dulce y aromático. color verde oscuro. la coca peruana es separada en dos variedades: 1. MACHADO GARZOLA. color verde claro. que presenta el más alto de todas las especies 1.1. cultivada en áreas secas de Colombia y la variedad truxillense. grandes. 15 . No obstante que la mayoría de las especies contiene alcaloides relacionados con la cocaína.: El Género Erythroxylum en el Perú. Erythroxylum Lambran coca y Erythroxylum Novogranatense son las especies más conocidas y extensamente cultivadas en el Perú. su contenido promedio de cocaína es de 0. cultivada en el norte del Perú.56%. MACHADO. Coca (Anexo 2).2. es cultivada en los valles tropicales de las faldas occidentales de los Andes (desde Ecuador hasta Bolivia).2.: Una nueva perspectiva sobre la masticación de la coca. Sus hojas son oblongas. BURCHARD.18. Derivada de Erythroxylum Novogranatense (Anexo 3). anchas. EDGARDO: “El género Erythroxylum en el Perú”. Es la más importante por su contenido promedio de alcaloide. Variedad de Trujillo: Hojas pequeñas y delgadas.1%. R. sabor amargo. Instituto Indigenista Interamericano. gruesas y de color verde oscuro. E.22 2. elípticas.22 _____________________________ 18. con alto porcentaje de cocaína.2 Botánica: Erythroxylum (Erythroxylaceae) es un género de 250 especies que se hallan distribuidos en las regiones tropicales de Sudamérica. 21 De acuerdo al lugar de su probable procedencia. 22. Esta coca es de gran comercialización por el agradable sabor se sus hojas debido a su alto contenido de ácidos grasos volátiles que son usados como saborizantes en la industria de bebidas gaseosas. Variedad de Huanuco o boliviana: Hojas anchas y gruesas. Derivada de Erythroxylum lambran. Z. 25 Estos efectos son de diversa índole. el efecto del resto de los alcaloides (menores) no puede ir más allá de un planeamiento teórico. por lo tanto tendríamos que esperar nuevos trabajos acerca del efecto del hábito sobre el estatus mental de los individuos que lo practican. CABIESES.: Revisión crítica bibliográfica y consideraciones generales acerca del masticado de coca. V. 25. pero entre ellos destacan los de carácter fisiológico y psicológico. pero generalmente se asocia a malnutrición. F. ligero aumento de presión arterial y de la temperatura corporal. etc. linfadenopatias. F. como de la personalidad.2. deficiencias visuales. su delimitación se ve obstaculizada por el alcoholismo.24. Cocaína 25. aumento de resistencia a la fatiga. ZAPATA O.3 Efectos: Sobre el Organismo: Los efectos del hábito de la masticación de la coca sobre el individuo se deben principalmente a la dosis de alcaloides que ellos ingieren. 26. 16 . En cuanto a las manifestaciones fisiológicas de carácter crónico. Las manifestaciones fisiológicas agudas se caracterizan por taquicardia. hepatomegalia. alteraciones respiratorias.2.1. Respecto a las alteraciones psicológicas. se hicieron diversos estudios los cuales se contradicen entre sí..: El problema de la masticación de la coca en el Perú. pues no existen estudios farmacológicos adecuados.23.: Aspectos etnológicos de la coca y la cocaína. la deficiente alimentación y en general por las desfavorables condiciones higiénicas en que viven los chacchadores. tanto agudos como crónicos. 26 ______________________ 23. DOMIC. CABIESES. entre otros. Se calcula que extraen un promedio de 86% de los alcaloides y que el 80% de los alcaloides es cocaína.: Apuntes de medicina tradicional. 24. además en algunos ellos se usaron técnicas que ahora no pueden aceptarse como válidas ni fidedignas. paraqueratosis. Se cree que la primera de ellas es causada tanto por efectos físicos (abrasión) como químicos (erosión) y la segunda por el contacto de las sustancias usadas en el chacchado con las estructuras de soporte dentario. E : The effect of coca leaf chewing on de buccal mucosa of Aymara and Quechua Indians in Bolivia. BERNAL. BORGHELLI. el desgaste dentario y la enfermedad periodontal tienden a incrementarse con el hábito del chacchado. Han sido motivo de diversas investigaciones sobre el efecto de dichas sustancias sobre la mucosa oral. las cuales son debilitadas. 28 Sobre los Dientes y Periodonto: Según la mayoría de estudios realizados. 17. A. acantosis. M.: Estudio de la cavidad bucal en los sujetos habituados a la masticación de hojas de coca 3.. Sobre la Cavidad Oral: La mucosa oral. entre ellos los hábitos de cada persona. causan a largo plazo. en el caso de la masticación de la hoja de coca y su efecto sobre las estructuras orales. alcohol. J. J. 28.: Lesiones de la mucosa bucal por el uso de hojas de coca 27.17. 3 Pero ninguno de estos estudios tiene un sustento científico con respecto a la relación entre los componentes de la hoja de coca y la incidencia a caries.: Odontoestomatología y Precancerosis oral. UNGARO. durante un tiempo promedio de 6 horas diarias. HAMER. 17 . R.1. Sobre la Mucosa Oral: El chacchador crónico mantiene el bolo de coca. rugosas. tales como zonas blanquecinas. es una de las estructuras de nuestro cuerpo que constantemente está expuesta a substancias extrañas dependiendo de muchos factores. agrietadas. etc. alteraciones en la mucosa oral 28 . 27. leucoedema y leucoplasia. GOICOCHEA I. habiéndose sugerido que la acción irritante y/o friccional de estas sustancias. de allí que sustancias como el tabaco. los estudios son limitados. café.: Patología oral en masticadores de hojas de coca. ________________________ 1. hiperqueratosis. O. 1996 18 . como intrínsecos tenemos la edad de la especie vegetal. Tesis de bachiller para Químico farmacéutico UNMSM. Actúa como estimulante leve. Sabiendo que estos mates son tan ricas en estos nutrientes. depende de factores intrínsecos y extrínsecos.2. 05. 06). La hoja de coca también presenta en su composición química: Aceites esenciales y son los que le dan a las hoja de coca su aroma especial. Estos mismos estudios de la Universidad de Harvard sostienen que en 100 gramos de coca se pueden tener casi dos gramos de potasio que son necesarios para el equilibrio del corazón y se le atribuyen además propiedades adelgazantes. se tiene a la ubicación geográfica. Lima. mejora la atención y la coordinación de ideas. P.2. Entre los factores extrínsecos. y VILLANUEVA VÍLCHEZ. Acción Inhibitoria in vitro del extracto acuoso y extracto metanólico de la hoja de Erythroxylumnovogranatense (Morris) var. titulada “Valor nutricional de la hoja de coca”. La concentración de cocaína en la hoja es muy baja. ingerida en forma natural. según investigaciones realizadas por médicos farmacólogos de la Universidad de Caldas.10 Propiedades Nutricionales de la Hoja de Coca: Gracias a la investigación realizada por la Universidad de Harvard. truxillense (Rusby) frente a bacterias Gram (-) y Gram (+). y por lo tanto. la forma en que ha sido cultivada la planta y el medio ambiente en el que se desarrolla la especie. en 1975. satisface la ración alimentaría recomendada tanto para el hombre para la mujer. ___________________________ 10. CAM ALBUJAR.1. se convierten en alimento y medicina. no produce toxicidad ni genera dependencia.4 Composición Química de la Coca: La hoja de coca (anexo 04. se ha probado que la masticación diaria de 100 gramos de hojas de coca. Su contenido en vitaminas y determinados oligoelementos hacen que al mismo tiempo el mate de coca constituya un complemento nutritivo de la dieta diaria. 1 Concepto: La clorhexidina es un potente antiséptico del grupo de las biguanidas que actúa eficaz y rápidamente como bactericidas sobre microorganismos Gram.12%) INTRODUCCIÓN La clorhexidina fue desarrollada en la década de los 40 por Imperial Chemical Industries en Inglaterra por científicos que realizaban un estudio sobre la malaria. ________________________ 29.2 CLORHEXIDINA (Bucoxidina 0. En odontología se utilizó inicialmente para desinfección de la boca y endodoncia. y tratamiento del acné vulgar. HERNÁN PÉREZ TORRES (2005) Farmacología Y Terapéutica Odontológica. MARISOL BETANCOURTH. 30. 19 . Antisépticos en el tratamiento de la enfermedad periodontal. se utiliza para enjuagues bucales en el tratamiento de la gingivitis y de la enfermedad periodontal y tópicamente en la preparación de la piel del paciente antes de una operación quirúrgica.pero poco eficaz sobre bacterias acido resistentes hongos o virus. En ese momento los investigadores fueron capaces de desarrollar un grupo de compuestos denominados polibiguanidas. BASCONES MARTÍNEZ A.29. Otros usos de la clorhexidina incluyen la profilaxis y el tratamiento de las infecciones de boca. la estomatitis.2. 30 2. 31. que demostraron tener un amplio espectro antibacteriano y salió al mercado en 1954 como antiséptico para heridas de la piel.. la estomatitis ulcerativa y la gingivitis aguda ulcerativa necrotizante. (+) y (-) 31 . lavado de heridas. Microorganismos inusuales en surcos y bolsas periodontales.2. Posteriormente comenzó a usarse en medicina y cirugía tanto para el paciente como para el cirujano.2.2. 2 Composición: Este compuesto es una base fuerte dicatiónica a pH superior a 3. lo que ocasiona una disminución de los niveles de ATP y la muerte celular. Cándida albicans. mientras que a altas concentraciones es bactericida.. VADEMECUN FARMACOLOGICO PERUANO. efectos secundarios locales y dificultad para formularla en productos. inhibiendo la utilización de oxígeno. 33 ________________________ 32. la clorhexidina afecta la membrana exterior permitiendo la liberación de las enzimas periplasmáticas. seguridad.2. Clorhexidina. salmonellas. Escherichia coli.a. La membrana interna de estos microorganismos no es destruída. Excipientes csp……………………. A bajas concentraciones..2. y bacterias anaeróbicas. La clorhexidina precipita el citoplasma y interfiere con la función de la membrana. BUCOXIDINA (clorhexidina 0. estafilococos. 33..100 ml. 20 .12g.5 con dos cargas positivas en cada extremo del puente de hexametileno. Los siguientes microorganismos muestran una alta susceptibilidad a la clorhexidina: Estreptococos.2.32. Es esta naturaleza dicatiónica la que la hace extremadamente interactiva con los aniones. pero sí que es impedida la absorción de pequeñas moléculas.0. la clorhexidina exhibe un efecto bacteriostático.. lo que es relevante para su eficacia.2. gianfarma s.3 Mecanismo de Acción: La clorhexidina desestabiliza y penetra las membranas de las células bacterianas.32 Cada 100 ml de solución contiene: Clorhexidina gluconato…………….2. En las bacterias Gram-negativas. 2.12%) – colutorio. debido al contenido en alcohol de los enjuagues orales.33 2. gianfarma s. La clorhexidina se debe mantener fuera de la luz.4%.33 2.12%) – colutorio. Esta es la dosis que se debe mantener en la boca durante aproximadamente 1 minuto.2.12% y al 0.2. evitando temperaturas extremas.32. 34. 34 2.8 Interacciones Aunque la clorhexidina se absorbe muy poco por el tracto digestivo puede haber una interacción potencial con el disulfiram.7 Contraindicaciones: Hipersensibilidad al gluconato de clorhexidina. 0.a. efecto cuya incidencia es reducida por la baja concentración de principio activo. La ingestión de alcohol en los pacientes tratados con disulfiram puede ocasionar serios efectos secundarios. 34 Clorhexidina para aplicación tópica: utilizar una gasa o algodón para tratar el área deseada. Los pacientes tratados simultáneamente con metronidazol y clorhexidina pueden experimentar una reacción similar a la del disulfiram. Clorhexidina.6 Indicaciones y Dosificación: Colutorios: la clorhexidina para enjuagues orales se comercializa en envases que contienen un vasito o medida de unos 15 ml. La clorhexidina. bases estructurales y aplicaciones en. DRA. MILEYDI. 33. 21 .2. Si esto ocurriera.2.2.2.33 ________________________ 32.2. al 0. enjuagar inmediatamente con agua abundante.5 Concentraciones: La clorhexidina suele presentarse en dos concentraciones. BUCOXIDINA (clorhexidina 0. 33.2. los oídos y la boca. la estomatología. VADEMECUN FARMACOLOGICO PERUANO.2%.2.2. 33 2.4 Reacciones Adversas Ocasionalmente se puede presentar alteración transitoria en el gusto. Evitar el contacto con los ojos.2. la boca se consideraba como un hábitat simple para los microorganismos pero en la actualidad se reconoce que los dientes.2. las cuales pueden complementarse o competir con otras en la misma población.1 Generalidades: Ecología de la Boca La boca alberga innumerables microorganismos en un ecosistema de complejidad considerable que todavía no ha sido investigado en su totalidad y está lejos de ser comprendido en toda su magnitud. a menudo. por tanto. la lengua. Hasta hace muy poco.2. todos forman habitáis o sitios diferentes donde los microorganismos se multiplican. otras superficies mucosas y la saliva. JOSE LIÉBANA UREÑA. Microbiología Oral. Cada zona o hábitat contiene su propia población característica. el surco gingival. 2.2. 22 .3 STAPHYLOCOCCUS AUREUS Y STREPTOCOCCUS MUTANS. con muchas especies microbianas distintas.3.35 _______________________ 35. la flora bucal es una entidad dinámica afectada por numerosos cambios durante la vida del huésped. Algunos son miembros de la flora normal de la piel y de las mucosas de los humanos. Los cocos jóvenes son fuertemente Gram positivos.. BROOKS.37 El genero staphylococcus contiene al menos 30 especies. En la actualidad este género comprende 35 especies o más y junto con otros géneros integra la familia de micrococcaceae 36 . aureus es un patógeno importante para los humanos. y producen varias encimas y toxinas extracelulares. Microbiología medica de jawets. Las tres de importancia clínica son staphylococcus aureus. Viven de manera libre en el ambiente y forman paquetes regulares de 4 u 8 cocos. STEPHEN A. Estos desarrollan con rapidez resistencia a muchos antimicrobianos y presentan problemas terapéuticos difíciles. formación de abscesos. GEO. __________________________________ 37.2.. fermentan carbohidratos y producen pigmentos que varían desde el color blanco hasta amarillo intenso. Bajo la influencia de fármacos los estafilococos sufren lisis 37 . rojo o naranja 37. crecen con rapidez sobre muchos tipos de medios y son metabolitamente activos. JANET S. BUTEL. que varia en gravedad desde intoxicación alimentaría o infecciones cutáneas menores hasta infecciones graves potencialmente mortales. después de envejecer muchas células se hacen Gram negativas 37 . F.5 a 1. tétradas y cadenas. sus colonias pueden ser de color amarillo.5 um de diámetro 36 . 23 . Características del Género: Los estafilococos son células esféricas de casi 0. staphylococcus epidermidis. varias infecciones piógenas e incluso septicemia mortal. Los cocos están desprovistos de motibilidad y no forman esporas. staphylococcus saprophyticus. el S. El primero es coagulasa – positivo que lo diferencia de las otras especies. en líquidos de cultivos también se observan cocos únicos en parejas. PhD.3. Casi toda persona padece algún tipo de infección por S.37 1. generalmente dispuestas en racimos irregulares parecidos a racimos de uvas.37 El tipo más común de envenenamiento alimentario es causado por una enterotoxina termoestable de los estafilococos. MORSE. aureus durante su vida. PhD.2 Staphylococcus Aureus Los estafilococos son células esféricas Gram positivas.2. MD. otros causan supuración.. Los estafilococos patógenos casi siempre causan hemólisis y coagulación del plasma. dispuestas en grupos irregulares. MORSE. sobre medios sólidos las colonias son redondas. PhD. 24 . Esta capa facilita la adhesión e inhibe la quimiotaxis y la fagocitosis. atrae leucocitos PMN y activa la lisozima.. F.. pero el pigmento se forma mejor a temperatura ambiente (20 a 25 ºC). PhD. BROOKS. que actúa como una endotoxina. Microbiología medica de jawets. por ejemplo. BUTEL. constituida por hidratos de carbono y proteínas extracelulares. Características de Crecimiento: Los estafilococos producen catalasa que los diferencia de los estreptococos. En dicha pared también se encuentra la proteína A. Los estafilococos muestran resistencia a muchos fármacos por la producción de beta lactamasa baja el control de un plasmido y confiere al microorganismo resistencia a muchas penicilinas 37. el polisacárido A. 37. hexaclorofeno al 3%. JANET S. STEPHEN A. unido al mucopeptido. al igual que la capa del limo o slime. 3. pero se inhiben con facilidad mediante ciertas sustancias químicas. lo que le da actividad antifagocitica. aureus comúnmente forma colonias de color gris o amarillo dorado intenso 37. GEO. MD. fermentan latentemente muchos carbohidratos y producen acido láctico pero no gas. que se une a la región Fc..2. Composición Antigénica y Factores de Virulencia: Los estafilococos poseen un antígeno específico de especie.36 El peptidoglucano de la pared.) y al cloruro de sodio al 9%. presenta en la pared celular. Cultivo: Los estafilococos crecen con facilidad sobre casi todos los medios bacteriológicos en condiciones aeróbicas o microaerofilicas. MARTA NEGRONI. y por lo tanto. Los estafilococos son relativamente resistentes a la desecación al calor (resisten 50º C durante 30 min.36 Los ácidos teitoicos favorecen la adhesión. De la IgG. lisas prominentes o brillantes. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. Crecen con mayor rapidez a 37º C. El S.36 ___________________________ 36. Y. • Toxina beta: degrada esfingomielina. se diferencia por los tipos de eritrocitos que lisan. MARTA NEGRONI. beta.Encimas y Toxinas Catalasa: Los estafilococos producen catalasa. que son negativos. La prueba de catalasa pude diferenciar los estafilococos que positivos. una estafilocinasa que produce fibrinolisis.. PhD. Estas toxinas también actúan sobre otras células 36: • Toxina alfa: daña el músculo liso. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. MORSE. La coagulasa puede depositar fibrina sobre la superficie de los estafilococos. si bien su mecanismo de acción no es muy claro. 25 . aparentemente parecería que consiste en alterar la permeabilidad de la membrana celular. la lipasas. linfocitos y plaquetas. de los estreptococos. 37. Microbiología medica de jawets. BROOKS. macrófagos. juntas se vuelven activas desde el punto de vista enzimático e inician la polimerización de fibrina. las células de la piel. una proteína parecida a enzima que coagula. PhD.37 Coagulasa y Factor de Agrupamiento: Los S.37 Otras Enzimas: Otras enzimas producidas por los estafilococos incluyen una hialuronidasa. F.36 ___________________________ 36. la proteinasa. que convierte el peroxido de hidrógeno en agua y oxigeno. BUTEL. los macrófagos y las plaquetas. GEO. • Toxina y: disuelve los eritrocitos de humanos y animales. O. o factor de propagación. Leucocidina: esta toxina posee dos compuestos (F y S) que actuan en forma sinérgica para dañar PMN y macrófagos.37 Exotoxinas: La hemolisina estafilococica o toxinas alfa.. • Toxinas o: toxina para muchas células polimorfonucleares. Se considera que la producción de coagulasa es sinónimo de patógeno potencialmente invasor. MD. La coagulasa de une la con protronbina.. pero actúa de manera mucho mas lenta en comparación con la estreptocinasa. y la beta lactamasa. aureus produce coagulasa. alterando talvez su ingestión por células fagocíticas o su destrucción dentro de dichas células. JANET S. STEPHEN A. 36 Toxina del Síndrome de Shock Toxico (TSSS-I) o Toxina Pirogenica: Se trata de una toxina semejante a las que producen los estreptococos y se la considera un súper antígeno. manifestaciones gingivales. 37. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”.Exfoliatina o Toxina Epidermolitica (Exotoxina): Hay dos tipos A y B. Microbiología medica de jawets. BROOKS. MARTA NEGRONI. ___________________________ 36. parotiditis. son codificadas por un plasmido y producen una lesión cutánea conocida como dermatitis aguda exfoliativa.. y algunos abscesos periapicales. F. MORSE. impétigo • Síndrome del shock toxico: Ataca a mujer en la etapa de menstruación • Neumonía • Osteomielitis • Infecciones de heridas • Enteritis o enterocolitis • Infecciones odontológicas: Se han encontrado infecciones endodonticas. No se la encuentra en todos los casos de shock séptico estafilococico (SSS). 26 . STEPHEN A. Puede causar una erupción escarlatiniforme. BUTEL. PhD. JANET S. orzuela. GEO.36 CUADROS CLINICOS 36 • Infecciones cutáneas: foliculitis.. MD. La osteomielitis de huesos maxilares. PhD. periodontitis y estomatitis.. La mayor parte de las cepas de los grupos A. Este último es importante para la adhesión de los estreptococos a otras células epiteliales. se agrupan en cadenas de longitud variable. 37.37 Los estreptococos son un grupo heterogéneo de bacterias y no hay un sistema apropiado para clasificarlos.37 Morfología e Identificación 1. MD. Los estreptococos tienen formas esféricas u ovoides y se disponen en cadenas. Las capsulas son mas notables es los cultivos jóvenes.2. Elaboran varias sustancias extracelulares y enzimas. MARTA NEGRONI. Los Pili semejantes a vellosidades se prolongan a través de la capsula de los estreptococos del grupo A. conforme un cultivo envejece y las bacterias mueren. Impiden la fagocitosis. pierden su Gram positividad y se tornan Gram negativos. Los estreptococos son Gram positivos.37 Algunos estreptococos elaboran un polisacárido capsular. otros se asocian con enfermedades humanas importantes atribuibles en parte a infección por estreptococos y en parte a sensibilización a ellos. esto puede ocurrir después de incubación durante una noche. T.2. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. PhD.3 Streptococcus Mutans Los estreptococos son bacterias esféricas Gram positivas que por lo general forman pares de cadenas durante su crecimiento. R). Algunos son miembros de la flora humana normal..3. Los miembros de esta cadena con frecuencia presentan una aspecto de diplococos.6 y 1 a 2 um 36 . STEPHEN A. sin embargo.. MORSE. Microbiología medica de jawets. Se distribuyen ampliamente en la naturaleza. GEO. Cada uno de los elementos aisladamente tiene un diámetro que oscila entre 0. PhD. Características del Género Los estreptococos son microorganismos sumamente difundidos y. 27 . BROOKS.37 ___________________________ 36. B y C producen capsulas compuestos de acido hialuronico. los Pili contienen parte proteína M y están cubiertos de acido lipoteicoico. la cavidad bucal alberga gran número de especies de este género 36 . F. JANET S. La pared de la célula estreptocócica contiene proteínas (antígenos M. BUTEL.. carbohidratos (específicos del grupo) y peptidoglucanos. No hemolíticos Grupo F (A. G) y no tipicables: S.. Sin grupo: S. la T (tripsina –resistente) y la R. Beta hemolítico Grupo B: S. están recubiertas por proteína M y acido teitoico. Alfa hemolítico y no hemolítico.2. esta proteína contribuye a la adhesión y. MARTA NEGRONI. PhD.. Microbiología medica de jawets. agalactia. Alfa y beta hemolítico. BUTEL. Grupo C. GEO. La llamada proteína M se comporta como un factor antifagicitico (hay mas de 80 tipos de proteína M). que desempeñan un papel en la adherencia. G: S. constellatus. pyogenes. Estas son 37: Grupo A: S. las más actuales tienen encuesta la biología molecular.36 Existen dos proteínas útiles para la identificación. por lo tanto a la colonización. Alfa hemolíticos Sin grupo: peptostreptococcus (muchas especies). mutans). 36 La secreción de una capsula de acido hialuronico les confiere cierto poder antifagocitico. Alfa hemolíticos y no hemolíticos. Grupo D: enterococcus faecalis (y otros enterococos). dysgalalactiae. Beta hemolítico.36 ___________________________ 36. C. viridans (S.37 Según la doctora lancefield (1933). JANET S. Clasificación de los Estreptococos: Las clasificaciones que se han propuesto para estas bacterias son innumerables y se basan en sus distintas características. Factores de Virulencia Los mayores factores de virulencia son los anfígenos de superficie. F. MD. MORSE. PhD. BROOKS. pneumoniae. pero hasta el momento no a demostrado que confiera virulencia al microorganismo. Bovis. millen). 37. ubico a estas bacterias en grupos identificados con letras. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. Alfa hemolíticos y no hemolíticos.36 Las fimbrias de los estreptococos. anginosus (S. Grupo D: S. intermedius. Alfa y beta hemolíticos y no hemolíticos No tipificados: S. 28 .. STEPHEN A. C y G. inmunosupresion y alteraciones de la permeabilidad de las células de la corteza cerebral. MARTA NEGRONI. C y G. Microbiología medica de jawets. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. MD. esta proteína digiere la fibrina y así impide la formación de una barrera de esta sustancia por lo que favorece la diseminación. sirve para identificar a los estreptococos en agrar sangre. BROOKS. BUTEL.. facilitan la diseminación de la infección. Casi todas producen 37: • Exotoxina Pirogenica Estreptocócica o Toxina Eritrogenica: Esta toxina que es excretada por la cepas que se encuentran en estado lisogénico. Al reducir la viscosidad del pus. de ahí la letra que lo identifica.36 • Estreptolisina S: Que debe su nombre a que la producen algunas cepas en presencia de suero. tiene acción lítica para los leucocitos pero no es un antígeno. erupción escarlatina y pirogenicidad. Se inactiva con el oxigeno. conduce ala lisis de os glóbulos rojos.36 ___________________________ 36.El acido lipoteitoico también actúa como un factor de adherencia y se une la fibronectina de las células del hospedero. STEPHEN A..36 • Estreptolisina O: Que se llama así por su labilidad frente al oxigeno y que es segregado por los estreptococos del grupo A y por algunos del grupo C y G. Se ha detectado una proteína F estreptocócica de unión a la fibronectina que genera una unión mas firme que la del acido lipoteitoico. las plaquetas y las células del tejido cardiaco. las desoxirribunucleasas hidrolizan ácidos nucleicos y nucleoproteínas que utilizan como nutrientes. 29 . GEO.36 • Estreptocinasa (Fibrinolisina): Es una proteína natural antigénica que secretan los estreptococos del grupo A.36 • Desoxirribonucleasa: Hay 4 tipos de esta enzima presentes en los de los grupos A.. PhD. F. MORSE. y es citotóxica para los neutrofilos. JANET S. es responsable citotoxicidad. PhD. 37.36 Enzimas y Toxinas Que no son muy específicas de cada una. MARTA NEGRONI.36 • Lipoproteinaza o Factor de Opacidad del Suero: Esta enzima es característica del grupo A tipo M.36 Fuentes De Infección Boca (presente en la saliva). HIV) ___________________________ 36. la vagina. C y G. el aparato respiratorio superior. Los estreptococos del grupo A también pueden segregar C5a peptidasa. 30 . de Shock Estreptocócico (Px.36 CUADROS CLÍNICOS 36 • Erisipela (puede conllevar a una celulitis de la zona) • Fiebre Puerperal (posparto) • Sepsis (en heridas y politraumatizados) • Faringitis • Impétigo o Piodermia (en niños) • Facitis Necrotizante • Miositis • Sd. favorece la disfunción en los tejidos y por eso también se le conoce como factor de disfunción. colonizan el tracto gastrointestinal. es antigénica y sirve para identificar a los estreptococos.36 • NADasa: Se relaciona al efecto leucotoxico y es producido por los estreptococos del grupo A. la lipoproteinaza esta relacionada con la proteína M. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. B. esta enzima inactiva al componente C5a del complemento que impide que se una a los PMN y altera la efectividad de este elemento de defensa.• Hialuronidasa: Que es producida por los grupos A. C y G. MARTA NEGRONI.Enfermedades Pos-Estreptocócicas: 36 • Fiebre reumática • Glomerulonefritis En Odontología: 36 • Lengua afranbuesada • Palidez peribucal • Abscesos • Caries dental ___________________________ 36. 31 . Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. la fructuosa. el almidón.42 o Bactericida: Que mata las bacterias.42 o Gramnegativo: que posee la coloración rosada de la contra tinción que se utiliza en el método de Gram. como la melanina.42 o Grampositivo: Que conservan el color violeta de la tinción que se utiliza en el método de Gram.42 o Bacteriostático: Concentración mínima de una sustancia capaz de impedir el desarrollo de una bacteria sin llegar a destruirla./ Poder bactericida: La más débil concentración de una sustancia capaz de provocar la destrucción definitiva de la vitalidad de un microbio.42 o Enzimas: Proteína producida por las células vivas que cataliza las reacciones químicas en la materia orgánica.42 o Toxinas: Veneno o toxico. para teñir microorganismos.42 o Pigmentos: Cualquier material colorante orgánico producido en el organismo.42 o Carbohidrato: Grupo de compuestos orgánicos entre los que se hallan la glucosa.2. para teñir microorganismos.4 DEFINICION DE TERMINOS o Microorganismos: También llamado microbio. es un ser vivo que sólo puede visualizarse con el microscopio.42 o Antibacteriano: Relativo a una sustancia que destruye las bacterias o inhibe su crecimiento y reproducción. la celulosa y la goma. generalmente producido por una planta o microorganismo.42 32 . hongos y virus. constituido por muchos aminoácidos.42 o Fibrina: Proteina filamentosa insoluble que proporciona su carácter semisólido al coagulo sanguíneo y esta producida por la acción de la trombina sobre el fibrinogeno en el proceso de la coagulación.42 o Aeróbio: Microorganismo que vive y crece en presencia de oxigeno libre. Los aerobios se dividen en aerobios facultativos y aerobios obligados.o Coagulasa: Enzima producida por bacterias en especial staphylococcus aureus. Es una proteína especializada que se sintetiza como respuesta a la invasión de bacterias.42 o Proteína: Compuesto nitrogenado natural de carácter organico complejo.42 o Patógeno: Cualquier microorganismo capaz de producir una enfermedad. La transformación de protrombina en trombina para la formación de coagulo.42 33 .42 o Fagocitosis: Proceso por el cual determinadas células engullen y desechan microorganismos y detritus celulares.42 o Quimiotaxis: respuesta que supone un movimiento positivo.: Uno de los 5 tipos de anticuerpos hormonales producido por el organismo.42 o Protrombina: Proteína plasmática precursora de la trombina. o negativo alejándose del mismo.42 o Virulencia: capacidad de un microorganismo para producir una enfermedad.42 o IgG. que desencadena la coagulación. hacia un estimulo químico.42 o Lisis: Sufijo que significa degradación o destrucción. o Hialuronidasa: Enzima que hidroliza el acido hialuronico.42 o Eficacia: Es la capacidad de lograr un efecto deseado o esperado. El efecto puede consistir en el aumento o disminución de la acción42.42 o Necrotizante: Muerte de una porción de tejido consecutiva a enfermedad o lesión. 34 .42 o Interacción: Modificación del efecto de un fármaco que se produce cuando este se administra con otro. 500 ug / 20ul.12% en el tratamiento de Staphylococos Aureus y estreptococos mutans.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. Hipótesis Nula La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca a las concentraciones de 250 ug / 20ul. 2.2. Hipótesis Alterna La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca a las concentraciones de 250 ug / 20ul.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.6. 1500ug / 20ul. 1000 ug / 20ul. 1000 ug / 20ul.2 Variable Dependiente Eficacia antibacteriano del extracto alcohólico de la hoja de coca.5 HIPÓTESIS: Hipótesis de Investigación La eficacia antibacteriana in Vitro del extracto de hoja coca es mayor que la eficacia de la clorhexidina al 0.12%.6. 2. es igual que la eficacia de la clorhexidina al 0. 500 ug / 20ul.6 IDENTIFICACION DE VARIABLES 2.1 Variables Independiente Concentración del extracto alcohólico de la hoja de coca y clorhexidina 0. 1500ug / 20ul. no es mayor que la eficacia de la clorhexidina al 0. 35 . 2. Concentración del extracto alcohólico de la hoja de coca y clorhexidina. 1000µg/ 20µl. 0. Numérica De Razón 1500µg/ 20µl. 8 mm. Es la inhibición en el desarrollo o crecimiento de las bacterias debido a la presencia del extracto alcohólico de Hoja de coca. resistencia 11 mm.6 OPERACIONALIZACION DE VARIABLES Variable Definición Indicadores Independiente Escala Categoría Numérica De Razón Numérica De Razón Numérica De Razón 250µg/ 20µl. Cantidad del extracto alcohólico de la hoja de coca contenidos en un volumen determinado de agua destilada y alcohol rectificado al 80º y clorhexidina al 0. sensible 36 .12% Numérica De Razón Numérica De Razón Dependiente Eficacia antibacteriano del extracto alcohólico de la hoja de coca.12% 500µg/ 20µl. 1 Tipo De Investigación Según el propósito: Aplicativa Según la ocurrencia de hechos: prospectivo Según el periodo y secuencia: longitudinal Según el análisis y la secuencia: experimental Según la participación del investigador: Participativo 3.1 TIPO DE ESTUDIO La presente investigación se realizó con un diseño de tipo experimental y longitudinal.CAPITULO III METODOLOGIA 3.1.1.2 Método Comparativo 37 . 3. 2 POBLACIÓN Y MUESTRA 3. Unidad de análisis: • Cultivos bacterianos de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.2.H.2 Muestra Muestreo no probabilístico.3.1.2. Diseño experimental G1 O1 X1 O2 G2 O3 X2 O4 G3 O5 X3 O6 G4 O17 X4 O8 G5 O9 X5 O10 38 .3 Nivel De Estudio Experimental 3. 3. • Criterios de exclusión: Cepas que no pertenezcan al genero staphylococcus aureus y streptococcus mutans. adquiridos del banco de bacterias del laboratorio del H.V. CRITERIOS DE INCLUSION Y EXCLUSION • Criterios de inclusión: Cepas que pertenezcan al genero staphylococcus aureus y streptococcus mutans.de diferentes espécimen clínicos. intencional por conveniencia (al azar).1 Población 20 Cepas staphylococcus aureus y 20 cepas streptococcus mutans.M. Unidad maestral: • Cepas de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.R. se dejo reposar por 7 días (se agito la botella 3 veces al dia). se coloco en su interior ¼ kg de hojas de erythroxylum lambran (coca) previamente cortada. En un envase de vidrio estéril (2 litros de capacidad) forrado con papel aluminio. G2 Muestra de estudio recibirá tratamiento con 500µg/ 20µl de extracto alcohólico de hoja de coca. para simular discos de sensibilidad.3 TÉCNICA DE RECOLECCIÓN DE DATOS INSTRUMENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS • Protocolo de trabajo • Guía de observación.G1 Muestra de estudio recibirá tratamiento con 250µg/ 20µl de extracto alcohólico de hoja de coca. “Ejemplo: 250µg (microgramos). luego se añadio el alcohol rectificado al 80º. para poder obtener los principios activos totales de la hoja de erythroxylum lambran (coca de Huanuco). 3. El insumo de hoja de coca obtenido se diluyó en agua destilada. Luego se filtro el macerado de hoja de coca a través de un papel estéril y el líquido obtenido se evaporo en un horno al vacio en 40º. luego fue impregnado en discos de papel filtro con las diferentes concentraciones. diluido en 20µl (microlitros) de agua destilada 39 .12% de clorhexidina. G3 Muestra de estudio recibirá tratamiento con 1000µg/ 20µl de extracto alcohólico de hoja de coca. Para detallar la medición de halos bajo la inspección clínica Procedimiento para la extracción de los principios activos totales El medio de extracción utilizado es el método de maceración alcohólica. G5 muestra de estudio recibirá tratamiento con 0. G4 Muestra de estudio recibirá tratamiento con 1500µg/ 20µl de extracto alcohólico de hoja de coca. 48 horas. • Examen De Laboratorio Con las cepas proporcionadas por el del laboratorio del H. se procedio a realizar el antibiograma en el agar Muller Hinton en el cual se coloco los discos de sensibilidad preparados con las distintas concentraciones del extracto alcohólico de la hoja de coca y con la clorhexidina.V. resistente halo <8mm. 3. • Programa de Análisis Estadístico SPSS 15. Los que se incubaron a 37°C por 24 y 48 horas.R. Medición del halo inhibición Las muestras son evaluadas en las primeras.H.4 PLAN DE TABULACIÓN Y ANÁLISIS DE DATOS Procesamiento de Datos El proceso de recolección de datos se realizo mediante la aplicación una guía de observación de campo. El procesamiento de datos se realizo de manera automatizada empleando una computadora utilizando el siguiente software: • Procesador de texto Microsoft Word XP..M.Técnica de Observación Directa. 24 horas. periodo en cual se realiza las mediciones correctamente estipuladas de los halos de inhibición con una regla flexible milimetrada para determinar con una escala categórica de sensible halo > 11 mm . Análisis de Datos Prueba U de Mann-Whitney (prueba no paramétrica) 40 . 1. Comparándolo con un antibiótico convencional como clorhexidina al 0.12 %.CAPITULO IV RESULTADOS 4.1 MUESTRA La muestra de estudio lo constituye 20 cepas de staphylococcus aureus y 20 cepas de streptococcus mutans de diferentes especimenes clínicos. El tratamiento consistió en la aplicación de dos diferentes concentraciones del extracto seco obtenido por extracción alcoholica.1.2 RESULTADOS Las observaciones se realizaron en cada una de las muestras indicadas anteriormente. el cual luego se diluyó en agua destilada en las siguientes concentraciones: 1000 µg/20 µl y 1500 µg/20 µl. Los resultados se presentan en las tablas 1 y 2 respectívamente 41 .1 RESULTADOS DE LAS OBSERVACIONES 4. observándose el tamaño de los halos como medida de la inhibición bacteriana ante el extracto de coca y el del antibiótico. adquiridos del Banco de bacterias del Laboratorio del Hospitar Regional Hermilio Valdizan Medrano de Huánuco. 4. 12% - 10mm 10mm 8mm 7mm 7mm 8mm 8mm 10mm 10mm 8mm 8mm - 42 10mm 10mm 10mm 11mm 11mm 11mm 15mm 15mm 13mm 15mm 10mm 11mm 10mm 10mm 11mm 11mm 11mm 11mm 11mm 11mm 10mm 10mm 12mm 13mm 10mm 11mm 11mm 11mm 15mm 15mm 14mm 14mm 10mm 12mm 10mm 10mm 13mm 13mm 14mm 15mm 12mm 13mm 12mm 12mm 12mm 12mm 17mm 17mm 18mm 18mm 13mm 13mm 15mm 15mm 12mm 12mm 13mm 13mm 12mm 12mm 15mm 15mm 14mm 14mm 12mm 12mm 12mm 12mm 15mm 15mm 17mm 17mm 13mm 14mm 12mm 12mm 15mm 15mm 15mm 15mm 15mm 15mm 20mm 20mm 23mm 23mm 23mm 23mm 15mm 15mm 24mm 24mm 20mm 20mm 15mm 15mm 17mm 17mm 15mm 15mm 18mm 18mm 15mm 15mm 20mm 20mm 20mm 20mm 18mm 18mm 22mm 22mm 20mm 20mm 25mm 25mm 25mm 25mm 25mm 25mm . ANTIBIOGRAMA Staphylococcus Aureus Cultivo #01 24 horas Cultivo #01 48 horas Cultivo #02 24 horas Cultivo #02 48 horas Cultivo #03 24 horas Cultivo #03 48 horas Cultivo #04 24 horas Cultivo #04 48 horas Cultivo #05 24 horas Cultivo #05 48 horas Cultivo #06 24 horas Cultivo #06 48 horas Cultivo #07 24 horas Cultivo #07 48 horas Cultivo #08 24 horas Cultivo #08 48 horas Cultivo #09 24 horas Cultivo #09 48 horas Cultivo #10 24 horas Cultivo #10 48 horas Cultivo #11 24 horas Cultivo #11 48 horas Cultivo #12 24 horas Cultivo #12 48 horas Cultivo #13 24 horas Cultivo #13 48 horas Cultivo #14 24 horas Cultivo #14 48 horas Cultivo #15 24 horas Cultivo #15 48 horas Cultivo #16 24 horas Cultivo #16 48 horas Cultivo #17 24 horas Cultivo #17 48 horas Cultivo #18 24 horas Cultivo #18 48 horas Cultivo #19 24 horas Cultivo #19 48 horas Cultivo #20 24 horas Cultivo #20 48 horas Concentración del Extracto Alcohólico de la Hoja Clorhexidina de Coca 250µg/20µl 500µg/20µl 1000µg/20µl 1500µg/20µl 0.Tabla 1: Diámetros de los halos de inhibición obtenidos al aplicar extracto de coca y clorhexidina sobre staphylococcus Aureus. 12% 15mm 17mm 23mm 15mm 17mm 23mm 10mm 15mm 20mm 25mm 10mm 15mm 20mm 25mm 10mm 20mm 15mm 10mm 20mm 15mm 10mm 16mm 20mm 10mm 16mm 20mm 10mm 15mm 17mm 11mm 15mm 17mm 12mm 14mm 20mm 12mm 14mm 20mm 8mm 11mm 16mm 15mm 8mm 11mm 16mm 15mm 8mm 10mm 15mm 17mm 8mm 11mm 15mm 17mm 9mm 12mm 15mm 15mm 9mm 13mm 15mm 15mm 12mm 15mm 20mm 12mm 15mm 20mm 11mm 13mm 20mm 11mm 13mm 20mm 15mm 18mm 22mm 15mm 18mm 22mm 10mm 14mm 20mm 10mm 14mm 20mm 14mm 15mm 19mm 15mm 15mm 19mm 15mm 15mm 23mm 15mm 16mm 23mm 10mm 12mm 16mm 20mm 10mm 12mm 16mm 20mm 12mm 14mm 20mm 12mm 14mm 20mm 13mm 15mm 25mm 13mm 15mm 25mm 10mm 11mm 13mm 20mm 10mm 11mm 13mm 20mm 15mm 18mm 22mm 15mm 18mm 22mm 43 .Tabla 2: Diámetros de los halos de inhibición obtenidos al aplicar extracto de coca y clorhexidina sobre Streptococcus Mutans ANTIBIOGRAMA Streptococcus Mutans Cultivo #01 24 horas Cultivo #01 48 horas Cultivo #02 24 horas Cultivo #02 48 horas Cultivo #03 24 horas Cultivo #03 48 horas Cultivo #04 24 horas Cultivo #04 48 horas Cultivo #05 24 horas Cultivo #05 48 horas Cultivo #06 24 horas Cultivo #06 48 horas Cultivo #07 24 horas Cultivo #07 48 horas Cultivo #08 24 horas Cultivo #08 48 horas Cultivo #09 24 horas Cultivo #09 48 horas Cultivo #10 24 horas Cultivo #10 48 horas Cultivo #11 24 horas Cultivo #11 48 horas Cultivo #12 24 horas Cultivo #12 48 horas Cultivo #13 24 horas Cultivo #13 48 horas Cultivo #14 24 horas Cultivo #14 48 horas Cultivo #15 24 horas Cultivo #15 48 horas Cultivo #16 24 horas Cultivo #16 48 horas Cultivo #17 24 horas Cultivo #17 48 horas Cultivo #18 24 horas Cultivo #18 48 horas Cultivo #19 24 horas Cultivo #19 48 horas Cultivo #20 24 horas Cultivo #20 48 horas Concentración del Extracto Alcohólico de la Hoja de Clorhexidin Coca a 250µg/20µl 500µg/20µl 1000µg/20µl 1500µg/20µl 0. comparándola con un antibiótico convencional como la clorhexidina al 0.4.2 PRUEBA DE HIPÓTESIS La hipótesis de investigación plantea la eficacia antibacteriana del extracto de coca. Tabla 3: Tamaño del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca sobre staphylococus aureus medido después de 24 horas Concentración del extracto de coca Cultivo Nº 1000 µg/20 µl 1500 µg/20 µl 1 10 12 2 10 12 3 11 12 4 15 17 5 13 18 6 10 13 7 10 15 8 11 12 9 11 13 10 11 12 11 10 15 12 12 14 13 10 12 14 11 12 15 15 15 16 14 17 17 10 13 18 10 12 19 13 15 20 14 15 44 . en el tratamiento de staphylococcus Aureus y de Streptococcus Mutans. En primer lugar vamos a probar que el tratamiento con una concentración de extracto de coca de 1500 µg/20µl es superior al de 1000 µg/20µl.12 %. En la siguiente tabla se comparan los datos del halo obtenido con las dos concentraciones del extracto de coca. 317 . 2. α = 0. que es la probabilidad extrema es de 0. Hipótesis nula: No hay diferencias entre los dos tratamientos con el extracto de coca.500 258. Estadística U de Mann Whitney. Utilizaremos el programa SPSS 15. Los resultados del procesamiento de los datos se dan a continuación: La U de Mann Whitney es el más pequeño de los valores calculado para los 2 grupos.001 . Además el valor de Asymp.05 (nivel de significación) 4.001(a) a No corregidos para los empates. exacta [2*(Sig. En este caso es de 68. b Variable de agrupación: CONCENT 45 . HA: µ1500. Puesto que 68. asumiendo que los datos no son normalmente distribuidos. De tablas se obtiene para n=19. se rechaza la hipótesis nula. asintót. m=19 y α=0. 24 hr = µ1500. Sig (una cola).005<0.5<123. 24 hr.500 -3.> µ1000. Lo planteamos matemáticamente por Ho: µ1000. se utiliza para probar la hipótesis nula de dos muestras independientes. 24 hr.5.05 prueba de una cola wα=123. es más eficaz que con 1000 µg/20 µl. Tabla 4: Salida del SPSS para los datos de la tabla 3 HALO U de MannWhitney W de Wilcoxon Z Sig. (bilateral) Sig.05.El planteamiento de nuestra hipótesis lo realizamos utilizando una prueba estadística no paramétrica que es la U de Mann-Whitney. 5. unilateral)] 68. por lo que también se rechaza la hipótesis nula y se conviene que el tratamiento con una concentración de 1500 µg/20 µl. 24 hr (La concentración a 1500 es superior a la de 1000) 3. en previsión a la no normalidad de los datos 1. 12 % 17 23 20 25 20 15 16 20 15 17 14 20 16 15 15 17 15 15 15 20 13 20 18 22 14 20 15 19 15 23 16 20 14 20 15 25 13 20 18 22 46 . 1500 µg/20µL al 0.12 % sobre staphylococus aureus. así como sobre Streptococcus Mutans. medido después de 24 horas de aplicación. ya que no se observan cambios en el halo después de 24 horas.12 %. A continuación se presenta en las siguientes tablas el diámetro de halo obtenido con extracto acuoso de coca versus clorhexidina al 0. Por lo tanto utilizaremos la concentración de coca de 1500 µg/20 µl y tiempo de tratamiento de 24 horas para probar la hipótesis de que es equivalente al tratamiento con clorhexidina al 0. Tabla 5: Tamaño del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina sobre staphylococus aureus.La contrastación de los datos a 48 horas de tratamiento prácticamente arrojaría el mismo resultado. medido después de 24 horas Cultivo Nº 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Diametro del halo obtenido (mm) aplicando los siguientes tratamientos Extracto acuoso Clorhexidina de coca. 1500 µg/20µL al 0.Tabla 6: Tamaño del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina sobre streptococcus mutans. medido después de 24 horas Cultivo Nº 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Diametro del halo obtenido (mm) aplicando los siguientes tratamientos Extracto acuoso Clorhexidina de coca.12 % 17 23 20 25 20 15 16 20 15 17 14 20 16 15 15 17 15 15 15 20 13 20 18 22 14 20 15 19 15 23 16 20 14 20 15 25 13 20 18 22 47 . 00 22. los datos no son simétricos más bien están concentrados al lado negativo de la distribución. Esto significa que la mayoría de tamaños alcanzados serán superiores a 19 mm en el caso de clorhexidina. observamos una concentración de los diámetros entre 19 a 21 mm. El gráfico 2 nos muestra la distribución de tamaños del halo en el caso de utilizar un extracto de coca sobre staphylococus aureus 48 .50 25.90 Desviación típica =2.989 N =20 diámetro del halo en mm La distribución de tamaños observada en el gráfico no es normal.12 % 10 Frecuencia 8 6 4 2 0 15.00 17.50 20.00 Media =19.Gráfico 1: Histograma del diametro del halo de staphylococcus aureus aplicando clorhexidina al 0. es decir se tiene una gráfica con asimetría negativa. Estadística de prueba: U de Mann Whitney 5.00 16.Gráfico 2: histograma del diámetro del halo de staphylococus aureus aplicando extracto de coca Histograma 10 Frecuencia 8 6 4 2 0 12.00 20.00 18.70 Desviación típica =2. mm Nuevamente se observa que la distribución de tamaños difiere de la normal. con una concentración de datos entre 13 y 17 mm. HA: µdiámetros clorhexidina> µdiámetros coca 3. Cálculos obtenidos por el SPSS 15 49 .00 Media =15.05 4.003 N =20 diametro del halo. Nivel de significación α= 0. La observación de los datos nos inducen a sostener que la eficacia de la clorhexina es superior al del extracto de coca. para probarlo utilizaremos nuevamente la prueba estadística no paramétrica U de Mann Whitney. observándose que la mayoría de los diámetros se concentra en tamaños que oscilan entre 14 y 16 mm.00 14. teniendo la distribución una asimetría positiva.00 22. 1. Ho : µdiametros clorhexidina = µdiámetros coca 2. 05.500 -4.00 23 20.00<0.00 CLORHEX COCA CULTIVO La mediana del halo para clorhexidina es de 20mm y para coca es de 15 mm. con clorhexidina el 50 % de los datos oscila entre 18 y 22 mm y en el caso de coca los datos 50 .Tabla 7: salida SPSS de la prueba estadística para staphylococus aureus DIAMET RO 53.000 U de Mann-Whitney W de Wilcoxon Z Sig. En el diagrama de cajas que se presenta a continuación se puede confirmar esta conclusión.00 12. que la media de los diámetro obtenidos con clorhexidina es mejor que la obtenida con extracto de coca aplicado a stapylococus aureus. lo que confirma la distribución de los datos.00 22 18.000(a) unilateral)] a No corregidos para los empates. exacta [2*(Sig. asintót.00 14.029 . . Gráfico 3: diagrama de cajas de los diámetros del halo para staphylococcus aureus 24. b Variable de agrupación: CULTIVO Siendo la significación asintótica bilateral 0.05. concluimos con un nivel de significancia del 0. (bilateral) Sig.500 263.00 DIAMETRO 22.00 16. Los datos para 24 horas después de su aplicación son los siguientes: Tabla 8: Tamaño del halo obtenido (mm) al aplicar extracto de coca y clorhexidina sobre streptococcus mutans. En el caso del tratamiento sobre streptococcus mutans. por medición del halo en mm. Clorhexidina 1500 µg/20µL al 0. pero también se debe percibir la eficacia como tratamiento aunque en menor cuantía del extracto de coca.están entre 14 y 17 mm. los datos que se presentan a continuación comparan la eficacia entre el tratamiento con clorhexidina al 0.12 % 17 23 20 25 20 15 16 20 15 17 14 20 16 15 15 17 15 15 15 20 13 20 18 22 14 20 15 19 15 23 16 20 14 20 15 25 13 20 18 22 51 . Nuevamente se puede confirmar la ganancia en eficacia de la clorhexidina. medido después de 24 horas Cultivo Nº 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Diametro del halo obtenido (mm) aplicando los siguientes tratamientos Extracto acuoso de coca. donde un tamaño mayor del halo representa mejor eficacia de tratamiento.12 % y extracto de coca de 1500 µg/20 µl. 00 17.00 Media =15.00 21.00 22.50 25.00 16.70 Desviación típica =2.Gráfico 4: histograma del diámetro del halo de streptococcus mutans Aplicando extracto de coca STRPCOC 10 Frecuencia 8 6 4 2 0 12.50 20.00 14.00 22.00 18.00 15.00 20.00 17.989 N =20 STRPCLR 52 .00 19.90 Desviación típica =2.00 13.00 Media =19.003 N =20 STRPCOC Gráfico 5: histograma del diámetro del halo de streptococcus mutans Aplicando clorhexidina STRPCLR 10 Frecuencia 8 6 4 2 0 15. Para la coca oscila entre 14. Gráfico 4: Diagrama de cajas del diámetro del halo para streptoccus mutans 24 DIAMETRO 22 23 20 22 18 16 14 12 CLORHEX COCA CULTIVO Los histogramas obtenidos nos confirman la no normalidad de los datos. y en el caso de clorhexidina nos presenta una ligera asimetría negativa. teniendo una mediana de 20 mm. Los tamaños para el intervalo entre el percentil 25 y el percentil 75 para la clorhexina es de 18 a 22 mm. De modo que nuevamente se determina que que el tratamiento con clorhexina es superior al obtenido con extracto de coca a esa concentración.5. Nuevamente se observa que los diámetros obtenidos con clorhexina son superiores a los obtenidos con el extracto de coca. siendo más bien asimétrico positivo en el caso de coca y streptococcus. con una mediana de 15 mm. La prueba estadística no paramétrica U de Mann Whitney se proporciona en la siguiente tabla: 53 .5 a 16.En el gráfico de cajas podemos observar el comportamiento de los datos. tendría una eficacia de 75 % en el caso de streptococcus mutans y en el caso de staphylococcus aureus la efectividad es también de 75 %. por ejemplo se ha demostrado que el tratamiento con 1500 µg/20 µL. entonces la coca con una mediana de 15mm.5%).Tabla 9: salida SPSS de la prueba estadística para streptococcus mutans U de Mann-Whitney W de Wilcoxon Z Sig.000(a) Nuevamente la probabilidad extrema es 0.029 .05. (bilateral) Sig. El tratamiento de streptococcus aureus con clorhexidina al 0. Del análisis de los datos se concluye que la clorhexidina es más eficaz que la coca para el tratamiento de 2 bacterias. lo que nos indica que el diámetro medio obtenido con clorhexidina es superior al obtenido con el extracto de coca. Si consideramos que la eficacia de la clorhexidina es del 100%. asintót. 54 . exacta [2*(Sig.000 .12 % resulta más eficaz.500 263. El aumento de la concentración de extracto de coca aumenta la eficacia del tratamiento. 2. es mejor que con 1000 µg/20µL. pero el extracto de coca también tiene una eficacia del 75 % con respecto a la clorhexidina.00 < 0.5%). CONCLUSIONES DE LA PRUEBA DE HIPÓTESIS 1.500 -4.12 % es más eficaz que con extracto de coca de 1500 µg/20µL(7. pero que la coca representa el 75 % de la eficacia del antibiótico. 3. siendo su mediana 20 mm. unilateral)] DIAMETRO 53. que con extracto de coca de 1500 µg/20µL(7. El tratamiento de staphylococcus aureus con clorhexidina al 0. donde el extracto de coca tiene una eficacia del 75 % con respecto a la clorhexidina. Gálvez14 los cuales obtienen resultados positivos del efecto antibacteriano del Erythroxylum Novogranatense var. Stretococcus de la cavidad bucal. Ayala2.DISCUSIÓN En la presente investigación se busco evaluar si el extracto de la hoja de Erythroxylum lambran ejercía una eficacia antibacteriana en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans de la flora oralen comparación con la clorhexidina al 0. Además en los resultados de Coronel4. lo cual quedó demostrado. Los resultados indican que existe una accion antibacteriana del extracto de la hoja Erythroxylum lambran. Coronel4. Aguilar y Encarnación8. como son los trabajos de investigación de Goicochea1. se observa una tendencia de aumento en la prevalencia de enfermedad periodontal . la existencia de un efecto de inhibición de desarrollo bacteriano del extracto estudiado. truxillense sobre agentes microbianos como Mycobacterium 55 . Pando6 y Flores13 sobre la enfermedad periodontal en personas que presentan el hábito de chacchado de hoja de coca. quienes obtuvieron como resultados una disminución en la prevalencía e incidencia de caries en sus grupos poblacionales que tenían el habito del chacchado. Mertz y Reyes11 basaron sus estudios sobre el efecto bacteriano sobre el mate de coca de Erythroxylum coca Lambran-Erythroxylum Novogranatense var. Castro y Chávez9. pero no demuestra superioridad para con los resultados obtenidos con la clorexidina a además se encontró diferencias significativas (según los análisis estadísticos) con respecto al tamaño de los halos de inhibición en las distintas concentraciones utilizadas del extracto de Erythroxylum lambran (coca de Huanuco). bacterias Gram (-) resistentes. Navarro5 y Pando6. Solano12. según los resultados obtenidos. truxillense en distintos agentes microbianos como son respectivamente bacterias Gram (-) y Gram (+). por el contrario si hay estudios sobre el mismo genero de la planta pero distinta especie como en el caso de investigaciones de Can y Villanueva10. Mertz y Reyes11. lo cual da sustento a otras investigaciones realizadas en chacchadores de coca. Existen estudios que tratan sobre las propiedades antibacterianas del extracto de Erythroxylum lambran como en el caso de Castro y Chávez9.12% normalmente utilizado como colutorio. Pero en ningunos de las investigaciones mencionadas realizan comparaciónes con agentes bactericidas (clorhexidina 0. 1000 y 1500 μg) con un control negativo sobre la flora mixta salival. Por los tanto.tuberculosis. en dicho estudio solo se analizó la flora mixta salival para ello tomo la muestra solo de origen salival. se observa que los distintos estudios observados se obtiene un efecto antibacteriano del Erythroxylum. enterobacterias. motivo que demuestra tal investigación.12%. en la presente investigación se encontró un efecto antibacteriano en las concentraciones (1000 y 1500 μg) pero no una eficacia en la comparación con la clorhexidina al 0. como en el caso de la presente investigación. Con respecto a los resultados se observo coincidencia en la inhibición bacteriana. ya sea que la extracción de los principios activos totales hayan sido bajo el método de la extracción alcohólica (la utilizada en el presente estudio) o la extracción acuosa (mate de coca).12% u otros). 56 . borrovic15 utilizo un medio de cultivo enriquecido no selectivo como es el Agar Tripticasa Soya. en distintos agentes microbianos se obtuvieron resultados de un efecto antibacteriano del Erythroxylum (coca). uropatógenos Gram (-) multiresistentes. a diferencia de la presente investigación que se utilizó un medio de antibiograma como es el agar muller hinton con el fin de observar un efecto eficas frente a las bacterias de staphylococcus aureus y streptococcus mutans en comparación con la clorhexidina. con el fin de observar un efecto antibacteriano de la flora salival. En el caso de estudios microbiológico de índole oral solo se halló el realizado por borrovic15. sin embargo. 500. para tratar de desarrollar al máximo todas las bacterias presentes en la saliva. a diferencia de borrovic15 que hallo efecto antibacteriano a partir de las concentraciones de (250. mayor será el halo de inhibición producida sobre las bacterias para determinar el efecto antibacteriano de dicha planta. obteniéndose resultados positivos con respecto al efecto antibacteriano del mate de coca estudiado por los autores antes mencionados. Cabe resaltar que a mayor sea la concentración utilizada del extracto de hoja de Erythroxylum (coca). • A mayor concentración del extracto de Erythroxylum lambran mayor efecto antimicrobiano.CONCLUSIONES • Existe un efecto antimicrobiano positivo a las concentraciones de 1000 y 1500 μg/ 20 μl del extracto de Erythroxylum lambran en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. 57 . • Las concentraciones 1000 y 1500 μg/ 20 μl utilizadas tienen una diferencia estadísticamente significativa pero no superior con respecto al grupo control. • Se recomienda realizar estudios con respecto a la composición de la hoja de coca con el fin de determinar el o los compuestos químicos que causan la acción antimicrobiana. 58 .RECOMENDACIONES • Se recomienda continuar con las investigaciones utilizando microorganismos patógenos de la microflora oral. • Se recomienda hacer estudios sobre la posibilidad de una acción sinérgica entre el o los compuestos antimicrobianos del Erythroxylum lambran y los distintos fármacos antimicrobianos. • Se recomienda realizar trabajos comparativos entre las distintas especies de hoja de coca. R.BIBLIOGRAFÍA 1) GOICOCHEA I. truxillense (Mate de coca). Lima. 1988.: Acción de la coca y la llipta frente al ácido láctico y pH de la saliva y la dentadura del aborigen del altiplano. Tesis de Bachiller en Estomatología. departamento de Junín. C. 2) AYALA M. Lima. 1963. A. Lima. Lima. 1988. UPCH..: Estudio comparativo de la prevalencia de caries. 1972.. Lima. Lima. 5) NAVARRO A. M.: Patología oral en masticadores de hojas de coca.: Propiedades inhibitorias del crecimiento de hongos oportunistas in vitro de Erythroxylum coca y Erythroxylumnovogranatensevar. Tesis de Bachiller en estomatología. enfermedad periodontal y abrasión en un grupo de sujetos con el hábito de masticación de coca y un grupo controlen la comunidad de Punsay. 1988. 7) LI SING. UPCH. 3) UNGARO.. provincia de Tarma. 59 . provincia de Tarma.: Estudio comparativo de la prevalencia de caries.: Estudio de la cavidad bucal en los sujetos habituados a la masticación de hojas de coca en la hacienda Collambay-Trujillo. 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Revista estomatologíca de México 2008. la estomatología. 35) JOSE LIÉBANA UREÑA. Pág. Cáp. MD. DR.. SAMARANAYAKE LP. KOBAYASHI. 32) BUCOXIDINA (clorhexidina 0. 2004 pag. Microbiología Oral. PFALLER. PhD. MURRAY... Farmacología Y Terapéutica Odontológica. bases estructurales y aplicaciones en. BUTEL.12%) – colutorio. Microbiología Estomatología “Fundamentos Y Guía Práctica”. 38) PATRICK R. GEORGE S. 523. KEN S. Microbiología medica de jawets. ROSENTHAL. 29. DRA. MILEYDI DE LA C. MICHAEL A. gianfarma s. Editorial Celsus 2005.377. Editorial Médica Panamericana 2009. Microbiología Medica. MORSE.. ALINA ACOSTA MORALES. F. 43) WALPOLE. Medica Panamericana 2009. Mexico 1992. 64 . Bioestadística. MYERS. Pág.A. Probabilidad y estadística. Mexico 2004. MMIV Editorial Océano. editorial Mc Graw Hill 44) DANIEL. 41) ENACO. milanesat 21 – 23.40) TRIPATHI. Editorial Limusa S. cuarta edición. 489. 42) LUIS MISSOURI USA.A 2011. Empresa Nacional De La Coca S. Editorial. Farmacología Odontología “Fundamentos”. Clorhexidina. cuarta edición. 317.: Océano Mosby. 487. ANEXOS 65 . ANEXO Nº1 PRINCIPALES ESPECIES ERYTHROXYLUM EN EL PERÚ REINO : Vegetal DIVISION : Discífloras SUBDIVISION : Displotemonas CLASE : Dicotiledóneas ORDEN : Gerianales FAMILIA : Erythroxylaceae GENERO : Erythroxylum ESPECIE : Erythroxylum coca Lambran (Huanuco) Erythroxylum Novogranatense Var. Truxillense (trijillo) 66 . ANEXO Nº2 ERYTHROXYLUM COCA LAMBRAN (HUANUQUEÑA) 67 . ANEXO Nº3 ERYTHROXYLUM NOVOGRANATENSE VAR. TRUXILLENSE (TRUJILLO) 68 . 46 43.5 305 cal % 12.35 mg % mg % mg % mg % mg % mg % mg % mg % BARIO CINC POTASIO CALCIO COBRE CROMO YODO 4.25 % COCAÍNA BENZOILECGONINA CINNAMOILCOCAINA BENZOILTROPINA CUSCOHIGRINA DIHIDROXITROPINA HIGRINA TROPOCAINA ALFA-TRUXILLENSE BETA-TRUXILLENSE HYGROLINA METILCOLINA METILECGONIDINA NICOTINA OTROS TANINOS FLAVONOIDES FENOLES SAPONINAS ACEITES ESENCIALES GLICOSIDOS 69 .6684 0.05 1.02 1.503 0.99 g % 46.00 213.50 9.ANEXO Nº4 PRINCIPAL COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LA HOJA DE COCA HUMEDAD CALORÍAS PROTEÍNAS CARBOHIDRATOS GRASAS 6.67 2.90 1.65 5.0 mg % mg % mg % mg % mg % mg % mg % ALCALOIDES TOTALES 0.60 39.2 g % 5g% VITAMINAS VITAMINA A VITAMINA C VITAMINA E VITAMINA B12 RIBOFLAVINA NIACINA ÁCIDO PANTOTENICO PIRIDOXINA TIAMINA BIOTINA 11000 1.50 1.70 2.25 % A 2.54 1.0863 UI mg % UI mg % mg % mg % mg % mg % mg % mg % MINERALES FÓSFORO MAGNESIO FIERRO SODIO ALUMINIO ESTRONCIO MANGANESO BORO 911.80 40.35 0.71 6.29 0.21 0.00 45.359 5. 70 .ANEXO Nº5 COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS HOJAS DE COCA (HUANUCO) CONTENIDO EN 100 gr. glúcidos y carbohidratos. que es el que elimina las toxinas y patologías del cuerpo. tiene propiedades de metabolizar Egnonina grasas. la tiamina. Atropina. regula la producción de Pectina melanina para la piel Esta proteasa. traduciéndose en una mejoría del cuerpo en general Evita la formación de la caries dental junto al fósforo y al calcio. es una especie de fermento que acelera la digestión. ayuda a aumentar las propiedades Cocamina anestésicas y analgésicas de la cocaína natural. que produce aumento de células de la sangre.ANEXO Nº6 Alcaloides Naturales de la Hoja de Coca Es el éter metílico de la benzoilegnonina. C y E. Es absorbente y antidiarreico. los ácidos y las vitaminas A. Es absorbente y antidiarreico. Evita el sorojche (mal de altura) Acelera la formación y funcionamiento del cerebro. de ahí sus propiedades terapéuticas para gastritis y úlceras. es muy parecida a Papaína la catepsina animal. que en mayor proporción contiene la papaya. junto a la Vitamina E. Excita las glándulas salivares cuando hay deficiencia de oxígeno en el Higrina ambiente Es un cardiotónico que regula la carencia de oxígeno en el ambiente. muy parecido a las vitaminas B-12. tiene propiedades anestésicas y Cocaína analgésicas. la convierten en la planta más completa del universo en Nitrógeno No Proteico. Acelera la formación de células musculares y evita la putrefacción de Benzoína alimentos. Refresca y mejora el funcionamiento del hígado. O es anestésico que produce sequedad en el árbol respiratorio. aumenta la irrigación Piridina sanguínea a la hipófisis y las glándulas. B1. Es un polisacárido. Adelgaza la sangre. la secreción de la bilis y su Inulina acumulación a la vesícula. Es un derivado carboxilado de la atropina. Estos 14 alcaloides. los aminoácidos que contienen. regula la producción de melanina para la piel. Regula la presión arterial en hipo e hipertensión y ayuda a la formación de Reserpina células óseas. Es diurético. Quinolina Es un anestésico poderoso. niacina y riboflavina. obteniendo combinaciones óptimas con frutas y plantas medicinales 71 . Conina Es un analgésico que junto a la anterior. Globulina mejorando la circulación sanguínea. escopolamina Pectina. junto a la Vitamina E. ANEXO Nº7 Materiales para el proceso de maceración alcohólica de la hoja de coca Erythroxylum Coca Lambran (Huanuqueña) Botella de vidrio transparente alcohol rectificado al 80º Papel aluminio para forrar la botella de vidrio Hoja de coca huanuqueña 72 . ANEXO Nº8 Procesamiento de filtrado y evaporación en horno al vacio de extracto alcoholico de hoja de coca Laboratorio de biotecnología de la UDH 73 . ANEXO Nº9 Dilución y preparación de las concentraciones del extracto de hoja de coca de pasta sólida 74 . ANEXO Nº10 Impregnado de la solución de extractote hoja de coca con la s concentraciones en los discos de papel filtro 75 . ANEXO Nº11 Los discos de sensibilidad 76 Anexo nº12 Discos de sensibilidad insertados en los agares Muller Hinton ya sembrados con las bacterias en cultivo y verificación de la formación de halos 77 ANEXO Nº13 Lecturas de las láminas al microscopio 78 79 . Elaboración del proyecto de investigación 80 .ANEXO Nº14 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES Setiembre 2010 Octubre 2010 Noviembre 2010 Diciembre 2010 Enero 2011 Febrero 2011 Marzo 2011 Abril 2011 Mayo 2011 Junio 2011 X x X X x x x Aprobación del proyecto de investigación x Ejecución del proyecto de investigación x Análisis e interpretación datos (estadísticos. x x Sustentación de la tesis x ACTIVIDADES Elaboración del anteproyecto de investigación. x Presentación del informe final. tablas y gráficos). Numérica 1000µg/ 20µl.12% en comparación con extracto de la hoja de coca frente a staphylococcus aureus y streptococcus mutans? 2. Con los resultados positivos que se obtengan de la existencia de la eficacia antibacteriana del extracto alcohólico de la hoja de coca. 1000. se podrá comparar con otro agente bactericida efectivo que es la clorhexidina y encaminar una planificación para el tratamiento.12% en comparación con el extracto de la hoja de coca en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans.12%.12% en el tratamiento INDICADORES De Razón 250µg/ 20µl.1. GENERAL ‐ Determinar eficacia antibacteriano in Vitro del extracto de la hoja de coca en comparación con la clorhexidina al 0. 1500ug / 20ul. de enfermedades orales de origen infeccioso con el uso de extractos de la hoja de coca o con los ESPECÍFICOS componentes exactos de la planta ‐ Identificar la eficacia que causen dicho efecto del extracto de la hoja de antibacteriano. De Razón 500µg/ 20µl. tanto preventivo como interceptivo.12% Hipótesis Nula VARIABLE DEPENDIENTE La efectividad antibacteriana (Vd) De Razón De Razón De Razón in Vitro del extracto de la Eficacia antibacteriano del extracto alcohólico de la hoja de hoja coca a las coca. INDICADORES ESCALA CATEGORIA 1000. resistencia streptococcus mutans. no es mayor que la efectividad de la clorhexidina al 0. concentraciones de 250.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. 81 . Hipótesis Alterna 11 mm.‐ HIPÓTESIS Aclarar las incógnitas sobre el beneficio de dicha planta. 500.‐ FORMULACIÓN DEL PROBLEMA GENERAL ‐ ¿Cuál es la eficacia antibacteriana in vitro del extracto de la hoja de coca en comparación con la clorhexidina 0. Numérica 1500µg/ 20µl. efectividad de la clorhexidina ESCALA CATEGORIA al 0. 500.12 % en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans? ESPECÍFICOS ‐ ¿Será el extracto de la hoja de coca un eficaz antibacteriano in vitro frente a staphylococcus aureus y streptococcus mutans? ‐ ¿Habrá diferencia entre la eficacia antibacteriana in Vitro de la clorhexidina 0. 1500ug / 20ul. es igual que la efectividad de la clorhexidina al 0.12% en el tratamiento de staphylococcus aureus y 8 mm.‐ JUSTIFICACIÓN 4.‐VARIABLES Hipótesis de Investigación VARIABLE INDEPENDIENTE La efectividad antibacteriana (Vi) in Vitro del extracto de la Concentración del extracto alcohólico de la hoja de coca y hoja coca es mayor que la clorhexidina 0.‐ OBJETIVOS 3. ‐ Evaluar la eficacia antibacteriano in vitro entre la clorhexidina 0. coca como antibacteriano in vitro en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans. Numérica de Staphylococos Aureus y estreptococos mutans. Numérica Numérica 0. sensible Numérica De Razón La efectividad antibacteriana in Vitro del extracto de la hoja coca a las concentraciones de 250.12 % en el tratamiento de staphylococcus aureus y streptococcus mutans 5.