Suplemento al1 NNectopsyche Neotropical Trichoptera Newsletter Recolección y Conservación de Trichoptera, con Énfasis en el Material Montado Roger J. Blahnik y Ralph W. Holzenthal Traducido en Español por Lourdes Chamorro-Lacayo y Rufino Vieira-Lanero University of Minnesota Insect Collection Probablemente la mayoría de sistemáticos Una de las ventajas de trabajar con Tricópteros especializados en Tricópteros en todo el mundo capturan montados en alfileres es que sus alas se conservan y conservan los imagos de este orden en alcohol. Esto se perfectamente; éstas están cubiertas con pelos y los colores y debe -en parte- a la tradición de capturar insectos adultos los diseños de estos pelos pueden ser útiles como caracteres de cuerpo blando, particularmente los acuáticos como taxonómicos, tanto como lo son los diseños de escamas en Ephemeroptera, Plecoptera y Trichoptera, en alcohol o las alas de las mariposas. Estos pelos se pierden fácilmente aguardiente, y las tradiciones son difíciles de cambiar. Los en los ejemplares que han estado en alcohol durante mucho estudiantes a menudo adoptan las prácticas de sus mentores tiempo. Además, los pelos o sedas de varias partes del cuerpo o instructores y así se perpetúan estas tradiciones. Los pueden variar considerablemente en tamaño, longitud trabajadores que se especializan en Ephemeroptera y y textura; a veces poseen funciones especiales, como las Plecoptera continúan recolectando ejemplares en alcohol, “sedas en forma de brocha” de Lepidóptera, que sirven para pero los imagos de Trichoptera se preservan mucho mejor dispersar feromonas. Sedas modificadas de este tipo se hallan en alfileres que los miembros de estos otros órdenes y uno frecuentemente asociadas con glándulas abdominales, pero de los objetivos de este artículo es animar a más sistemáticos también pueden de Tricópteros, especialmente a los nuevos Tricopterólogos, estar situadas a montar en alfileres por lo menos parte de sus colecciones. en la cabeza, La mayor parte de los métodos discutidos aquí siguen la tórax o en las tradición derivada de los métodos de conservación del alas. La pérdida Dr. Oliver S. Flint, Jr., actualmente Conservador Emérito de estas sedas en del Smithsonian Institution, y todavía una autoridad alcohol equivale mundial en los Tricópteros neotropicales. Estos métodos a la pérdida de fueron adoptados por Ralph Holzenthal y sus estudiantes i n f o r m a c i ó n de la Universidad de Minnesota y han sido modificados t a x o n ó m i c a gradualmente y mejorados con el transcurso de los años. y filogenética. Probablemente los métodos continuarán evolucionando e, También, los indudablemente, habrá mejores maneras de hacer las cosas. e s p e c í m e n e s Tenemos la esperanza de que este boletín de noticias sirva que han estado Una caja de Tricópteros montados también como foro para intercambiar ideas y técnicas. bien conservada y oraganizada. en alcohol por Introducción Ventajas de Montar Material en Alfileres 1 lo que queda apropiados. por lo menos en disponibles. Una advertencia. gradualmente. los tapones y el alcohol vs. cuando se hacen grandes proyectos de inventario. el investigador debe observar cuando se va a designar un holotipo. ¡Sin embargo. para insectos que serán montados en alfileres insectos en alfileres son muy frágiles y hay determinadas técnicas que realzan tienen que ser manipulados con cautela.Suplemento al1 N mucho tiempo pierden. es crucial que la sábana esté colgada deberá ser montado en alfiler posteriormente. Almacenar los y las luces encendidas por lo menos unas horas antes de Tricópteros en pliegos de papel o sobres. sus antenas y diversas partes de sus apéndices. con un 100 años o más a menudo retienen sus características segundo pico un poco antes de la aurora. suspender la También. Nosotros hemos continuado recogiendo especímenes en y para mantenerla alcohol y colocamos rutinariamente trampas de alcohol o tirante usamos de tipo Malaise como métodos complementarios de captura. particularmente generalmente en el campo con los Lepidóptera. deberán ser utilizados todos lo métodos Además se pierde la pigmentación. con especímenes en alcohol (especialmente con aquellos que El método para suspender la sábana es intuitivo. para amarradas a las cional Itatiaia. pero los imagos en alcohol. Río de Janeiro. Captura en el Campo de Ejemplares que serán Montados 2 . sábana 2 a 3 horas después de la puesta nos convencen de que la calidad del material montado es superior a la del material preservado del sol. es que si un Tricóptero es colectado en alcohol no reglas! Por otro lado. maravillosamente. por ejemplo la facilidad al manipular Se extiende una cuerda entre dos soportes (normalmente ciertas partes mientras se hacen observaciones. Finalmente. con serán holotipos o paratipos. Parque Naespecímenes que serán montados. trampas de emergencia. No animamos a los tricopterólogos a que abandonen grandes para totalmente el uso de recolectar especímenes en alcohol. De hecho. Cartago. el toldo y el uso de la luz de vapor de un río. donde se puede que suelen dañarse cuando los especímenes se montan. llegan casi en el momento en que uno este caso inefectiva. trampas de alcohol. no son muy antiguos). resulta en los hidroptílidos. el uso de sábana es un “fantasma” del exoesqueleto cuticular del insecto y se y luces. Nosotros el uso de trampas de alcohol tienen más probabilidades de también usamos capturar más diversidad total que los métodos que dependen pinzas para la de recolecciones hechas individualmente con frascos de ropa o clips cianuro. gomas elásticas Roger Blahnik armando una sábana incluso en situaciones en las que también recogemos fijadas al suelo y sobre el Río Campo Belo. las cajas para las colecciones y los Un método estándar de captura armarios para almacenaje. por ejemplo) de Tricópteros que serán montadas o los potenciales peligros asociados con cada método (evaporación del alcohol Recolectando a las orillas del Río es el uso de “luz negra” (ultravioleta y almacenaje de líquidos inflamables Grande de Orosí. el material montado debería ser el preferido el Neotrópico. y continúan volando a la embargo. en la solución de inventariar el conjunto de la fauna de Tricópteros de una almacenaje sus grasas corporales y proteínas (y el ADN). de forma que a menudo el espécimen pierde aspirador. Brasil. colgar la sábana. Como regla general. y desaparecen mientras otros Tricópteros Admitimos que existen ciertas ventajas al trabajar continúan llegando. ya que los Tricópteros no saben leer las embargo. casi 20 años de experiencia blancas estándar. facilitarán su manipulación después de Podemos discutir sobre la diferencia que sean montados. el precio de los alfileres. pero no limitando. enciende las luces. por ejemplo). trampas de luz. Después la actividad es esporádica. Sin portátil) además de luces negras y el crepúsculo o un poco antes de que oscurezca. La mayoría de las Tricópteros el problema de la humedad y la mercurio (que requiere un generador emergen y empiezan a volar durante exposición a la luz. región concreta. Especímenes que han estado montados durante mantendrán un nivel bajo de actividad toda la noche. en el precio monetario de mantener especímenes en viales o en los alfileres (el precio de los viales. vuelve frágil. el valor de los especímenes y que estos se preservan mejor a largo plazo. sábana. incluyendo. Aunque los Sin embargo. cría. etc. y la habilidad dos árboles) de de observar las verrugas de sedas de la cabeza y el tórax. Este tipo de preservación extendida es hemos observado que la gran mayoría de la diversidad se especialmente útil para especímenes que eventualmente captura durante las primeras horas después del ocaso. el daño causado por Derméstidos. Cuando hay diferentes opciones poca distribución temporal en diversidad. una técnica usada que oscurezca ya que algunas especies. sin esto personalmente. Parque Nacional o UV) y una sábana colgada cerca de Tapantí. redes de mano. trampas Malaise. Observe vs. Costa Rica. que se pueda. durante un corto periodo de tiempo después de la puesta del es importante que sol y el uso de estas trampas con alcohol garantiza que especies la sábana no se que pueden ser pasadas por alto en la sábana serán colectadas. como el uso de pan traps con alcohol. mientras utilizamos un de la lluvia y segundo contenedor para recoger más ejemplares. un simple toquecito en las puntas de sus diversidad total. dentro del la sábana protege contenedor. también usamos un tubo dor para recolectar Byrsopteryx (Hy. podemos matar a la vez todas suspendido sobre las capturas del aspirador introduciéndolas. La energía para las luces proviene de una Aspirador batería de 12 voltios de un automóvil o Un método útil para recolectar de una motocicleta o de un generador de la sábana un gran número de de gasolina portátil. ya que proveerá una individuos que están descansando en la mejor iluminación y facilitará la vegetación y son encontrados mientras captura. No obstante. si estas trampas se dejan funcionando durante toda Aysha Prather recolectando Tricópteros y el la noche recolectarán especies que tienen periodos de vuelo Tricópteros de una sábana con la interior de los inusuales.transferir frecuentemente los especímenes del contenedor magnético que del aspirador a un frasco de cianuro. Habrá que buscar hidroptílidos u otro tipo de Tricópteros algún sistema para recargar la batería. por su pequeño tamaño) se recomienda de T r i c ó p t e r o s forma especial ampliar las capturas hechas sobre la sábana c o n t i n u a r á n con otros métodos. Parque Serra dos Órgãos. Cada vez visible. ayuda a mantener Pan Traps la sábana seca. Como discutiremos a continuación. Cuando un Tricóptero capturar llega a la sábana.del aspirador mientras uno continua fluorescente estándar que provee luz droptilidae) de una roca en el Río So. moje porque los Además. iluminando los alrededores. Es importante espectro electro. ya que éstos una porción del entran en las vías respiratorias al aspirar. Además de la luz Henrique Paprocki usando un aspira. En el caso de los hidroptílidos (también conocidos ya que los como “micros”. o algo similar.recogiendo más ejemplares. Esto garúas y lluvias es porque los “micros” usualmente aparecen en la sábana solo leves. en el frasco de cianuro. Otros Métodos de Captura 3 . nosotros usamos un palito se colecta durante el día. un vórtice en el contenedor y en poco colectando y a localizar los insectos tiempo las alas pierden todos sus pelos. La manera mejor y más efectiva h i d r o p t í l i d o s de capturar Tricópteros es directamente de la sábana. pequeños es con el delicado uso Necesitaremos algún tipo de apoyo para de un aspirador. Río que se aspira por el tubo. es importante todo lo posible recolectar colocar un poco de papel higiénico. Este método es suspender la luz y evitar el contacto especialmente útil para recolectar con la sábana. Un problema bifurcado ajustado a la sábana y al cable que se debe evitar es el de dejar de la luz con un clip. que llegan a la sábana. Aunque ayuda de luces negra (ulta-violeta). mojando y arruinando el espécimen (al r e c o l e c t a r menos si lo piensa montar). en alcohol para la usando frascos de cianuro (KCN). se produce que ayuda a ver el área donde uno esta de Janeiro. portátil. El tubo de luz fluorescente también Este método también presenta un problema para aquellos p r o p o r c i o n a que tienen alergia a los pelos de los Tricópteros. frascos de cianuro es necesario se humedecerán. alas provocará que se de la vuelta dejándose caer dentro del se deberá hacer frasco.Suplemento al1 N esquinas inferiores de la sábana. Brasil. llegando durante especialmente en sitios donde éstos son muy abundantes. Si el contenedor del puede atraer varias aspirador es suficientemente pequeño como para caber especies. Un toldo dentro del frasco de cianuro. en el para fondo del frasco para evitar que el espécimen se frote o se y montar en alfileres los más Un pan trap utilizando una linterna dañe mientras se mueven antes de morir. lo berbo.muchos ejemplares en el contenedor ultravioleta. Hemos tenido mucho Paulo. Las unidades portátiles suelen funcionar con donde actúan doblemente como trampas de intercepción y pilas de linterna. podemos evitar en un bote de plástico (un embudo facilita la transferencia). una roca o un tronco de es especialmente común durante la mañana. Nosotros En el Neotrópico (como en otras partes) podemos colocamos este tipo de trampas a cierta distancia del sitio observar durante el día varias especies volando o posadas en donde colgamos la sábana (50-100 m) y usualmente a la orilla la vegetación ribereña. varios días y son inspeccionadas tubo de luz negra (UV) o una linterna Estacão Biológica de Boracéia. São periódicamente.) para evitar que las mariposas y escarabajos almacenaje permanente. y la luz puede quedar encendida solo durante como trampas emergentes. de antemano un la vegetación o de nico y la envoltura protectiva. Nosotros generalmente resultados dispares con esta última y preferimos la anterior) cubrimos la trampa con un trozo de malla de alambre (malla y después son sacados y transferidos a 80% EtOH para su de 1 cm² aprox. Muchos hidroptílidos del agua. También sobre un pequeño tributario del Río sitio peligroso o podemos aspirar Dos tamanos de frascos con cianuro. el papel higiéMinas Gerais. número de especies del Neotrópico que Una pan trap simple consiste están activas durante el día y las que no en un contenedor cuadrado o son atraídas por las luces. Escriba la información de la localidad y la pueden ser colectados de la pared de tela de la trampa con fecha en un trozo de papel e introdúzcalo dentro del bote. 4 . sustituyéndolos en el depósito por una tira rellenándolo hasta el tope con alcohol nuevo y rotulándolo de Vapona® y papel higiénico. y/o por la habilidad del especialmente para capturar el elevado ojo humano para discriminar especies. ¡Lo mismo ambiente. Parque Nacional Caparaó. Los especímenes también apropiadamente.Suplemento al1 N Es frecuente capturar especies en la plan de escape! sábana que no fueron capturadas en Trampas de tipo Malaise una pan trap cercana o viceversa. días. Los imagos son capturados en unas horas o toda la noche. ¡Tenga los ejemplares de Observe la etiqueta. aunque hemos obtenido pilas estamos dispuestos a comprar. Caparaó. Brasil. incómodo. de la trampa. cuando el sol árbol) y a una distancia razonable del río en caso de que el tropical empieza nivel del agua se a calentar el eleve. Este es alerta frente a la el tiempo ideal posible subida del para recorrer a nivel del agua o a pie una sección las inundaciones! del riachuelo con Nunca muestree una red en mano al otro lado del para capturar río o de su salida i n d i v i d u o s y nunca coloque activos durante Una trampa de tipo Malaise puesta la sábana en un el día. Generalmente la lluvia ligera no es un problema. y antes deberá aplicarse al del comienzo colocar la sábana: de las lluvias de esté siempre la tarde. el alcohol deberá ser cambiado por etanol fresco de Red de Mano o Manga entomológica 70-80% para asegurar la conservación apropiada. y después se no adhiera la etiqueta por fuera del bote. un aspirador antes de que entren en el depósito. el crepúsculo. llenado con Aysha Prather recolectando imagos bien si se dejan funcionando durante etanol. Esto El uso de una trampa Malaise puede ser debido simplemente a la y recolectar con una red de mano o fuerte iluminación generada por las cazamariposas durante el día son otros luces de la sábana comparada con la luz métodos complementarios de captura. Sobre el contenedor se pone un activos durante el día en el Río Claro. fluorescente portátil equipada con una éxito colocando estas trampas sobre bombilla ultravioleta y se enciende en pequeños riachuelos (de primer orden). o sobre rocas. grandes caigan en el alcohol. Brasil. Después el contenido se vierte especialmente en áreas de mucha humedad. Las trampas rectangular. Si va a ser inspeccionada a menudo. Después de varios transfieren a un frasco con cianuro para luego ser montados. La actividad de los imagos bajo alguna estructura (un puente. usar los líquidos. Los factores limitantes serán la un depósito de la trampa lleno de líquido (alcohol etílico seguridad de la localidad (¿destrozarán la trampa?) y cuantas o una solución de etilenglicol. se exhiben y caminan sobre las rocas situadas a lo largo del pero si se espera lluvia recia sería bueno colocar la trampa borde o dentro de la corriente. poco profundo y de plástico Malaise funcionan particularmente (preferiblemente blanco). Algunas personas estarán poco dispuestas a usar cianuro. especialmente mariposas y escarabajos. peligro de que el cianuro entre en la herida. frasco se rompiese y rotuladas con la fecha de su creación y una advertencia de que el contenido es venenoso. con el potencial. no deben ser incluidos en el mismo frasco con Es importante montar los especímenes lo más los Tricópteros. luego se cubre con una capa fina sea dañado en de aserrín absorbente (que facilita el lento desplazamiento una futura madel cianuro). al día siguiente.Suplemento al1 N las rocas si es que podemos acercarnos sin espantarlos. Lleve los frascos aparte. nunca lleve un frasco con cianuro en los bolsillos de su pantalón. cuando se están ejemplar fresco montando. Los especímenes pertenecientes a otros órdenes. Los Tricópteros son más delicados que la mayoría de los insectos y necesitan ser manipulados con cuidado en el campo para mantenerlos en buenas condiciones. Nosotros usamos un método solo causará que corriente que incluye el uso de cianuro de potasio (KCN) el espécimen en el fondo de un frasco. y rotaran en su El procedimiento para hacer frascos con cianuro ha sido alfiler. El Al secarse. pero nada que hayamos usado anteriormente ha funcionado tan bien y de forma tan efectiva. pequeños de reserva para recolectar miembros de la familia Si lo montamos Hydroptilidae. Olvidar un frasco con cianuro en el campo representa un peligro para personas confiadas o para los niños. Uso y Construcción de un Frasco con Cianuro Ni siquiera el montaje más cuidadoso de un espécimen ayudará si el espécimen sale dañado de un frasco. se una cutícula relativamente fina y suelen secarse rápidamente. como el acetato pécimen se emde etilo. También es una buena idea tener frascos adhieren al alfiler. Observe la distande París mojado que se deja secar antes de usar el frasco. en una bolsa de tela o en una mochila. Algunas especies que son particularmente activas durante el día raramente. bases de estos frascos se envuelven cuidadosamente con su posterior y el vial de genitalia a lo largo del alcinta adhesiva para contener el material en caso de que un c o n s e r v a c i ó n . solemos realizar las capturas al atardecer y montamos los destruyendo cualquier Tricóptero que esté en el frasco. Los ejemplares de dentro de la red deberán ser engañados para que entren en el frasco con cianuro y. especialmente al atravesar rocas resbaladizas en el lecho del río. Los escarabajos son mucho más grandes y más robustos que los Tricópteros y tardan más en morir en pronto posible después de que han sido capturados. están en excelente estado para ser montados. o solo accidentalmente (ó nunca) serán capturadas con luces. seguidamente se empolva con una capa fina nipulación. Esto no es tan difícil como suena si se toman en cuenta ciertas precauciones. y deberá ser cambiado después de cada pegamento y lo noche de colecta. cuente el número de frascos que lleva al campo y asegúrese de que todos han sido recogidos antes de irse del sitio de captura. sino de yeso de París y todo ello se cubre con una capa de yeso que también Un montaje doble. Montaje de Especímenes en el Campo 5 . y a veces hasta 2-3 años. También es buena idea tener disponibles varios frascos extra (2-3 por colector) para evitar que se llenen mucho de ejemplares. La mejor manera de recolectarlos es usando un frasco con cianuro que ha sido reservado exclusivamente para los Tricópteros. La velocidad con papel suave (Kleenex. Las d i f i c u l t a r á cia entre la tira de silicona. por si acaso han quedado ejemplares escondidos actúan como entre los pliegues. dependiendo de la frecuencia de uso y de la cantidad de cianuro usado al hacer el frasco. en general. cuando el esOtras soluciones usadas a veces. Además. por otro lado. despojan de sus escamas ensuciando a los Tricópteros. especialmente los grandes. un desliz puede provocar la rotura del frasco y un corte en la pierna. no son del todo buenas para recolectar Tricópteros. Los Tricópteros muy de mañana. El acetato de etilo en particular humedece los pelos de las después giraran alas y deja el espécimen muy blando y difícil de montar. Una vez hechos. En esta situación. y para poder rotar los frascos durante la captura y permitir que el ejemplar recién capturado muera antes de añadir más ejemplares. Este papel deberá corporales de un ser inspeccionado la mañana siguiente. pieza a secar. especialmente si no han sido rotulados. Otra ventaja de montarlos pronto es que los líquidos y así los pelos de las alas se protegerán. papel higiénico) para permitir que el la que se secan depende en la temperatura y en la humedad espécimen se mueva o caiga entre los pliegues al morirse relativa. la eitqueta. cualquier atento de montarlo dañará el ejemplar frasco con cianuro deberá tener en el fondo algún tipo de inutilizándolo como espécimen montado. ya que tienen Lepidópteros. Nosotros el cianuro. aunque improbable. Esto no descrito en varios lugares. filer. los frascos nos durarán por lo menos una temporada. Deberemos extremar las precauciones al caminar por el campo con un frasco con cianuro. un escarabajo grande se moverá mientras muere. poco mas arriba de su posición final. dejando suficiente distancia por encima del campo dificulta la recolección de los Tricópteros más que con ejemplar como para manejarlo con seguridad y rapidez en otros grupos de el laboratorio. el dedo índice. con ejemplares antiguos montados en alfileres que ni fueron probablemente uno puede hacer un calibrador similar colectados con cuidado ni manipulados apropiadamente. como los pronto se vuelve hidropsíquidos parte de una rutina de los géneros del trabajo en el Leptonema o campo. que podrían realizado. después es empujado Por lo que nosotros sabemos. y también debajo de la longitudinal del cuerpo del espécimen. Asegúrese el ejemplar para así poder manejarlo de que el alfiler esté perpendicular al eje sin dañarlo. Lo importante es que el espécimen sea quiebran fácilmente y esto es particularmente cierto en manipulado cautelosamente para evitar eliminar los pelos los Tricópteros. modificando. El espécimen puede ser Lo importante es dejar suficiente empujado hacia arriba cuidadosamente espacio entre la cabeza del alfiler y con los dedos o con las pinzas. Los alfileres con pinzas de puntas fina. Nuestros calibradores son caseros y. El calibrador es una captura y sacar del frasco pocos especímenes a la vez cuando varita plástica con forma de lápiz que tiene perforado un estos están siendo montados. El frasco en sí actúa como agujero en la punta del “lápiz” de 12 mm de profundidad y un humidificador. un bolígrafo retráctil. La excepción son las especies relativamente insectos. sufrir daños en las Si en la patas al colocar las Unas tablas hechas en casa para exmente del lector etiquetas debajo tender las alas de pequeños LepidopUn calibrador plástico casero para dehay todavía del ejemplar si se teros y Tricópteros (cuarta fila de la terminar la altura inicial del ejemplar derecha). como un trozo manipulados por individuos diferentes loca el ejemplar entre el dedo índice y de espumilla plástica.Suplemento al1 N Para impedir que los ejemplares se sequen antes de ser espacio para trabajar con dedos “gordos”. 6 . Para esas especies. c o n s e r v a c i ó n por encima del mismo. La Encontramos que esta es una buena altura para la mayoría de necesidad de montar los ejemplares mientras uno esta en el los especímenes. se debe dejar suficiente el pulgar. oscuro. situado en un lugar fresco. Use las modernos han sido estandardizados en pinzas para colocar cuidadosamente longitud y suelen venir con una cabeza el espécimen que se va a fijar sobre la “V” que se forma al juntar el pulgar y de nylon que facilita su manipulación. o de los ejemplares especies de tratados de este Phylloicus (Camodo compensará lamoceratidae). y pincharlo directamente sin tener que usar los en este aspecto. La distancia Otra alternativa consiste en colocar el ideal depende del grosor de los propios ejemplar cuidadosamente sobre una dedos. Nosotros usamos montados. Asegúrese también de que el frasco esté lo suficientemente ancho para aceptar la cabeza de un alfiler. etiqueta del ejemplar. para prevenir dañar las prejuicio resultante de experiencias anteriores al trabajar patas en un futuro. dudas sobre la deja tanto espacio en el alfiler. Todos los insectos en alfileres son frágiles y se en un futuro artículo). y hasta cierto grado del tamaño del espécimen. es mejor empujar de especímenes en alfileres. el trabajo extra etc. (Si alguien divisa un modelo más simple podrá informarnos o rotos. La calidad Macronema. lejos de los rayos del sol.superficie de montaje. una buena idea es asegurarse de que las tapas un calibrador para montarlos en el campo y así obtener una de los frascos estén bien cerradas después de una noche de misma altura en todos los ejemplares. No estamos seguros de quién tuvo la idea de las alas. con un poco de ingenio. las hacia abajo hasta la altura apropiada colecciones originales de Linnaeus y usando el calibrador. Como estos serán Fijando un Phylloicus mientras se co. probablemente sea por el el espécimen un poco más arriba. pero el grandes y las que esfuerzo no es tienen patas excesivo y muy largas. El insecto se coge por el mesotórax y se empuja original de que al poner un insecto en un alfiler el espécimen cuidadosamente hacia arriba en el alfiler hasta un punto un podría ser manipulado sin que los dedos de uno lo dañen. Lo ideal sería otros entomólogos de antaño fueron que los ejemplares fuesen manipulados conservadas en alfileres. por lo tanto se encuentran dañados (con las alas sin pelos). Dentro de los viales que preservan adultos y larvas Helicopsychidae. leptocéridos pequeños y delgados. Este código de campo se anota junto con 0. y especies información más detallada de la localidad en un cuaderno de pequeñas de otras familias (Philopotamidae. pegándolos en cartulinas de montaje se habrá percatado de En el campo. total). probablemente la mayoría mejor colocarlos en alcohol antes de de los especímenes puedan ser que se sequen. observación de la venación. pero w w w . es de una recolecta. usando un extensor de alas del tamaño i l u m i n a c i ó n (12 x 19 cm) y su papel adecuado. podemos morfoespecie se monte en alfileres. En general.Suplemento al1 N dedos. que disponibles ninguno de nosotros tiene!). si solamente se trata así un pequeño en todos los de campo de porcentaje de los ejemplares. escritas en Casi todas las especies que son demasiado pequeñas para tinta indeleble (pluma Pigma Micrón. aunque algunos especímenes con sus incluyendo al aire libre. que tienen menos probabilidad de minucias sobre ser dañadas si son conservados directamente en alcohol. de montaje” en todo tipo de situaciones. de eficientemente en minucias (¡o muy buena vista. también se introduce unas etiquetas parecidas. de la venación. preferiblemente de acero ejemplares (una docena o más) de cada inoxidable. lógicos en el Los ejemplares demasiado pequeños para ser campo. ya que pocos Tricópteros tienen buena selectipo de protección diseños característicos en las alas posteriores y el montaje de ción para las alas en preparaciones es más útil para observar caracteres contra el viento y trabajos biola lluvia. campo. Cualquiera que haya trabajado con Tricópteros. Tenemos la fortuna clavamos con un Una caja Schmidt con Tricópteros en de tener una antigua y obsoleta de laboratorio que funciona alfiler las tiras alfileres. funciona bien. extender las alas de los Lepidópteros puede ser usada para disponer de una Su tamaño los Tricópteros. los grandes para ser montadas en minucias. en tiendas de alas extendidas quedan muy bonitos y también facilita la campaña. etc. la ventaja de tener ejemplares con adecuada (natural impermeable o artificial) y es sus alas extendidas probablemente no es tan grande como en lo hacen una esencial algún el caso de los Lepidópteros. Un buen ejemplar se consigue capturadas series extremadamente mediante una cuidadosa manipulación. La misma técnica usada para casos es deseable Ingienería. en restaurantes y hasta a la orilla de extender las alas de los Tricópteros si se hace con cuidado de una piscina: Un cuaderno y. En experiencia.15 mm para hidroptílidos.05) sobre un ser montadas en alfileres estándar son suficientemente papel duradero. En tiras de espumilla el campo es indispensable algún tipo de lupa o microscopio m i c r o p o r o s a si queremos montar los especímenes debidamente y (como Plastazote. en chozas. con excepción de Fijamos los hidroptílidos más pequeños. largas. horizontales precedidas por una etiqueta temporal con el Nosotros usamos minucias de acero inoxidable de tamaño “código-de-campo”. no es necesario Fijando Tricópteros la manaña despu. en la cabina trasera de una camioneta. los ejemplares son almacenados en que no es un buen método de conservación. por usar solo los tamaños 0 y 2. los ejemplares son dispuestos en elegantes filas termina sumergido completamente en la gota de pegamento.Nosotros hemos instalado “estaciones extender las alas de los Tricópteros. es poco práctico intentar montar En cuanto al tamaño del todos los ejemplares y en ese caso es alfiler. En general. como ciertas especies de especímenes en Neotrichia o Hydroptila. terminan siendo pegados por el costado de un ala en vez de por el cuerpo del espécimen. glososomátidos. No obstante. Una pequeña lupa de 10 BioQuip® http:// aumentos (10X). preferimos una lupa binocular (microscopio estereoscópico com/) y luego o estereomicroscopio) cuando es posible. Según nuestra cajas Schmidt con fondos de polietileno expandido. especialmente. Cuando son dentro de las Etiquetado y Almacenaje en el Campo 7 . o el ejemplar la caja. tamaño 0. Observe las etiquetas temporarias con codigos-de-campo. es deseable colocados en alfileres de tamaño 0 que por lo menos unos cuantos hasta 3. Hydropsychidae. b i o q u i p .). excepto las razones anteriormente comentadas para los ejemplares muy pequeños para preferir ejemplares montados (casi siempre un gran porcentaje del en vez de los preservados en alcohol. maravillosamente para trabajar en el campo. sin embargo. No nos oponemos a la práctica en habitaciones de hoteles. de mano o con soporte. dispuestos en alfileres estándar necesitan ser montados en minucias. cajas Schmidt. Un taxónomo ve eso e inmediatamente 8 . Todos hemos visto exhibiciones de insectos en museos que fueron colocados obviamente por artistas. Se debe usar algún tipo de marcador permanente. Este consejo puede parecer demasiado obvio como para mencionarlo. porque los insectos que son similares se disponen por los alrededores y se colocan con otros insectos para crear una yuxtaposición estética de forma y figura. la separación de especímenes en alfileres le parecerá más directa y mucho menos aburrida que la separación de material en alcohol. no está disponible hoy en día. que se usaba en el pasado para el montaje doble. ahora -para proteger la caja. El hongo Polyporus. pero es sorprendente la cantidad de veces que no se sigue en práctica. con la experiencia. pero las tiras de silicona funcionan muy bien. pero la ventaja de poder manipular y separar eficientemente los ejemplares en alfileres compensa cualquier desventaja. no solo para separar familias y géneros. provincia. y uno nunca debe fiarse de su memoria para recordar la información referente a un sitio. Por lo menos la localidad deberá incluir la latitud. sino a menudo también para separar especies dentro de los géneros. Esto es claramente diferente del “ojo artístico”. fecha. unidad protegida. una pluma con tinta indeleble o un lápiz. Vale la pena tomarse la molestia de colocar todos los especímenes en minucias mirando en la misma dirección sobre la tira. Finalmente. uno cerca del otro. nombres de personas del área. Los colores y diseños se convierten en caracteres muy útiles. Como los ejemplares están secos y las alas pueden tapar los órganos genitales. Además. Cualquier material descubierto posteriormente sin etiqueta será mejor tirarlo. Después de la experiencia de haber encontrado una caja de nuestros especímenes destruidos por las hormigas en el campo. Si no disponemos de una bolsa como esta. distrito. seguramente el ejemplar se desintegrará en una pequeña nube de polvo de insecto. condiciones. etc. Separación de Especies y Sexos Normalmente nosotros empezamos a separar especímenes en el campo mientras se colocan en las cajas de campo. longitud y elevación (ahora obtenidas fácil y económicamente con tecnología GPS (Sistema de Posicionamiento Global)). En los siguientes párrafos ofrecemos una corta explicación sobre los métodos de conservación. Cualquiera que trabaje con Tricópteros desarrollará su propia metodología y atajos. siempre hay que asegurarse de que todo el material de un sitio está rotulado. ya que son pequeños y el papel está compuesto en un 50% por algodón. Esto empieza con la obsesión del taxónomo de colocar objetos similares en grupos.la guardamos dentro de una bolsa de malla fina con cremallera hecha en casa. El hecho de mantener el cuaderno al día deberá realizarse con constancia.). Un cuaderno estándar de ingeniero o de topógrafo funciona particularmente bien.. donde podría ser tocada accidentalmente con el dedo durante su manipulación. direcciones.) para que la minucia pueda ser montada a cierta distancia del alfiler y no directamente al lado de éste. por lo que es impermeable. Al realizar el montaje doble de las minucias es importante usar tiras lo suficientemente largas (como 1 cm. Si tocamos la minucia accidentalmente. la tira en la que está fijada la minucia debe estar lo suficientemente lejos de la cabeza del alfiler (por lo menos 12 mm) para que la minucia permanezca después lo mas lejos posible de los dedos del investigador (recordando que el extremo superior de la minucia siempre quedará más alto que la tira de silicona). Por la misma razón. deberemos estar constantemente alerta contra las hormigas y tomar las precauciones apropiadas. Sin embargo. Esto ayudará cuando se vaya a realizar el montaje doble de los ejemplares sobre las tiras de silicona (también de BioQuip) al regresar al museo. alguna indicación de su distancia y dirección a una ciudad o pueblo. observaciones sobre la biología o comportamiento.Suplemento al1 N Montaje Doble de Ejemplares en Minucias Un ejemplo de notas hechas en el campo. se necesita mucha habilidad para manipularlos durante la separación por sexos. Es importante mantener un cuaderno de campo. Manipulación y Separación de Especímenes Montados La separación y conservación de especímenes en alfileres varía un poco respecto a la separación de ejemplares en alcohol. etc. etc. el cuaderno debe incluir toda observación pertinente sobre el hábitat. nombre de la masa de agua. y la unidad política o administrativa (estado. Observe el estilo de anotar la información de la localidad. Si después de que los ejemplares fácilmente distribuidas ayudará al proceso de separación. una vez sexos presentan. Si no se observan diferencias.. por lo menos la separación. las hembras son más grandes que los machos. y organizar el material para que éstas sean perpendicularmente). Nuestra experiencia nos las familias. En una de Los Tricópteros son mucho mas difíciles de separar estas series. Estos incluyen diferencias en la la serie serán co-específicas con los machos. aclarar todos los ejemplares en una serie. Ocasionalmente. La identificación final. se Una serie separada. más grandes o más pequeños. la serie con más individuos). seguida de un símbolo de hembra en un bajo el microscopio. lo los machos son más complejos y se pueden ver los diversos cual ayudara cuando se vayan a asociar las hembras con los apéndices y prolongaciones. los ejemplares deben ser alfiler y la serie de hembras. estructuras androconiales. por supuesto. Los dos eventual asociación de las hembras con los machos. el ápice del abdomen puede estar tapado por las alas. de todos modos. tamaño y y pueden ser emparentados con las la forma de las alas son suficientes para genitalias de aquellos ya aclarados. etc.Suplemento al1 N empieza a juntar los objetos similares que comparten una ser cuidadosamente empujadas hacia un lado con una sonda relación genealógica. se seleccionan unos cuantos machos para aclarar que otros insectos porque hay una gran uniformidad en la la genitalia. Las hembras son la diversidad de la naturaleza en forma que la diversidad sea rotuladas con un pequeño símbolo de hembra (♀) colocado fácil de entender. que tendrán que órganos genitales de los machos sean extraidos y aclarados. En la mayoría de (Ej. dice que las series organizadas de esta manera facilitan la pero en Leptoceridae. Normalmente. Las hembras de algunas especies machos. aclarar las hembras de la serie. coloración y diseño y de la misma Después de que los especímenes localidad y fecha. requiere que los morfología de las patas. sin embargo. los machos el numero de espolones. Nosotros situamos en el campo continua cuando uno regresa al laboratorio y primero –y de izquierda a derecha. marque éstos para después aclararlos (a veces solo con dejar Generalmente unas cuantas especies serán relativamente el espécimen un poco de lado en la fila en vez de situado más abundantes. Seleccione uno o dos individuos típicos. una separación alguna característica. glándulas de feromonas. Las binocular (estéreomicroscopio) u otro sistema de aumento diferencias en los caracteres de la genitalia de unas especies hasta el nivel de “morfoespecies” independientemente de que están siendo separadas pueden ser observadas en los las de otras localidades. tamaño y color o más oscuros o más claros. Extracción de la genitalia 9 .. la serie tendrá que es por fecha y localidad de captura. los machos especie.más refinadamente una serie parece abdomen bajo la lupa. Normalmente haber más de dos especies. El separar hasta el nivel de morfoespecies. La separación es un durante la primera separación. modificaciones de los escapos de las antenas. probablemente es pueden ser un poco más oscuras que los machos (como en mejor colocar a las hembras con la serie más larga de machos algunos Smicridea) o un poco más claras. todo esto antes de observarlos de una especie. es fácil reconocer a los machos y a observar más cuidadosamente las las hembras. por ejemplo aquellos que son un poco aproximada teniendo en cuenta la forma. ya que los órganos genitales (la genitalia) de diferencias leves en los diseños y colores de las alas. venación de las alas. Una meta de la taxonomía es organizar fina para dejar al descubierto el abdomen. y de hecho de determinada localidad son separados bajo una lupa no es deseable. ya que usualmente algunas de las hembras en dependiendo en la especie.la serie de machos los insectos son etiquetados. el especímenes que no han sido aclarados color o patrón de coloración. separados separan por sexo viendo el extremo del por un símbolo de hembra en un al. morfología y número de segmentos de los palpos maxilares. tamaño y y las hembras de una serie serán casi forma de las antenas. se deberán filer (♀). y uno puede características que contribuyen a asumir sin problema. la estructura de los palpos maxilares. los machos son más grandes. que proceso interactivo que se refinará con aquellos de ambos sexos con la misma el tiempo. etc. El proceso inicial de organizar especies debajo de la etiqueta de la localidad. son de la misma son separados en una primera ronda. En general. Esto también facilita luego la etiquetados antes de ser separados! introducción de los ejemplares en la base de datos. Si después de haber separado seguidos por las hembras. pero forma habitual del cuerpo y las diferencias en color son también trate de buscar individuos que se diferencian en usualmente muy sutiles. ¡Sin embargo. otros muchos dimorfismos que son encontrados los caracteres diagnósticos para segregar sexuales (además de los órganos genitales) que varían a las hembras. representativos de una serie son aclarados la serie resulta Hemos encontrado que la mejor forma de separar el material estar compuesta por dos o más especies. mismo proceso puede ser utilizado para pero la presencia o ausencia de ocelos. A veces no es necesario. y los patrones de coloración iniciará el proceso de organización. son otras idénticos en coloración. Todos los ejemplares ser separada otra vez. Estas los Hidroptílidos pequeños y varios son un poco caras.Suplemento al1 N Puesto que los ejemplares secos son Como los Tricópteros tienen una delicados y frágiles. Sin embargo. pero son una géneros en otras familias. esponja húmeda en el espécimen y fondo que aumentará su genitalia. adherido al abdomen. porque en ciertos grupos el Un método estándar para aclarar la genitalia es el abdomen está firmemente adherido al metatórax. Para el abdomen con unas microtijeras. hidróxido de potasio para reducir el tiempo de aclarado. dejando a este potasa). algunos Tricópteros. pero nema con unas microtijeras antes de ventral hacia arriba y con las pinzas también en los segmentos más basales aclarar la genitalia. contiene algún Normalmente existe cierta flexibilidad en cuanto al tiempo tipo de fungicida. Después midificador. si uno tiene cuidado. o toda la noche. El aclarado a temperatura ambiente también si el tarro no ofrece un tiempo más relajado durante el proceso de aclarado. describir e ilustrar Mantenga el espécimen con una mano glándulas abdominales (estas se hallan Removiendo el abdomen de un Leptobajo el estereomicroscopio con la parte frecuentemente en el 5º segmento. como las de los Hidroptílidos. el proceso es cutícula fina.y el metatórax. tienden a absorber diferente al que se usa para ejemplares la humedad y a volverse flexibles conservados en alcohol. en un vidrio de reloj lleno de agua destilada (a veces los trozo de espumilla. las alas se caliente o hirviendo es muy peligroso. además tiende a mojaran y el ejemplar desbordarse mientras hierve con riesgo de perder el abdomen puede enmohecerse en el proceso. antes de cortar alfileres al lado del el abdomen. saque el abdomen del vial y colóquelo alfileres son colocados en un para reblandecerlos. El KOH tiempo. Algunos investigadores prefieren calentar el la humedad relativa. y la rotura uso de solución de 10-12% de hidróxido de potasio (KOH o se producirá entre el meso. Este procedimieno un sonda en la otra mano empuje to es hecho bajo un microscopio en en algunas especies. y evita el problema de distorsión de las durante mucho genitalias que se produce al calentar la solución. Un sistema muy útil que hemos ideado es el uso de último. deténgase y coloque donde se colocaran el ejemplar aparte para luego colocarlo en un humidificador. mientras se agua o con una separación del asegura una asociación correcta de el ejemplar y su genitalia. ¡Esto deberá una bandeja con fondo de espuma con una serie de hoyos evitarse! Si después de un empujoncito delicado parece que el cortados en ella para acomodar viales pequeños (9 x 30 mm) abdomen no se quebrara limpiamente. Si se mantienen pero hemos visto que la solución de KOH a temperatura los ejemplares en ambiente y dándole más tiempo para aclarar da resultados el humidificador más predecibles. hasta Rehidratando y reblandeciendo deberán quedarse en seis horas más o menos. de aclarado que dará buenos resultados. Un su genitalia humidificador es en proceso de esencialmente un aclarado. Una vez que el abdomen de potasio. delicadamente contra la base del un ejemplar que ha sido rehidratado. para poder observar. proceso de identificación que le sigue Una vez hidratados es posible cortar es esencialmente el mismo. particularmente de las usadas en oftalmología. Las patas y los apéndices de los ejemplares vial que contiene hidratados tienen menos probabilidades de quebrarse. para ejemplares ejemplares en alfileres en un huel humidificador más grandes o aquellos que tienen una cutícula gruesa. con sus patas y alas. permite colocar Un método más seguro es colocar el ejemplar en un los ejemplares en humidificador por unas cuantas horas. Preparación de las Genitalias 10 . desde unas horas Los ejemplares no para genitalias pequeñas. Esto es extraido deberá ser situado en un vial para aclarar. pero el rápidamente en un humidificador. y así Una bandeja con fondo de espumilla tarro cerrado con se evitará la para aclarar la genitalia. Los ejemplares en tiempo del necesario del tiempo adecuado. las genitalias Para extraer el abdomen de esta manera son necesarias unas con el hidróxido manos firmes y destreza manual. Es romper el abdomen sin dañar el importante cortar lo más que se pueda ejemplar. se debe extremar el cuidado. abdomen (normalmente contra el 7º u 8º segmento) hasta que se quiebre en la base. es posible buena inversión si se cuidan bien. es necesario el tamaño más grande 4. por lo que deberemos añadir unas cuantas gotitas cantidad de glicerina al fondo del vial.22 aclarando la mm (número de catálogo SC – 5/32). para ejemplares pequeños o delicados. Nosotros cortamos La variabilidad que es observada entre los ejemplares con una esquina del extremo posterior del corcho para que así se respecto al aclarado mientras están almacenados se puede pueda colocar paralelo a la etiqueta de la localidad. SC – 3/32) para la mayoría de las el KOH residual especies. El interior de los Caplugs tiene un pequeño borde transfiéralo a una cerca del fondo que puede dañar ejemplares muy pequeños placa con 10% o delicados. para que este problema mediante los pasos descritos anteriormente. vial para genitalias.06 x 14. a un “rutinario”.caplugs. Los viales hemos podido resolver. hayamos identificado todos los factores que contribuyen a que llegase a hacer contacto con la glicerina alrededor de la continuación del aclarado mientras están almacenadas. se adherirá a las paredes del tubo Animamos a los lectores a escribirnos con sugerencias y habrá que romper el tapón para abrirlo y remplazado la o información sobre los procedimientos que dan como próxima vez que el ejemplar sea examinado. o a los diferentes tiempos que los ejemplares tiende a moverse hacia arriba por las paredes de los viales se dejan en cada placa. para neutralizar el KOH. etc. Estos viales están de etanol o de detergente al agua destilada). diluido en 9 partes dentro del vial (esto también ocurre en los viales de plástico. Un corcho en contacto con la glicerina a los viales de plástico usados para las genitalias. Vale la pena limpiar la abertura del vial con una vial correspondiente. especialmente puede continuar Leptonema. Después inserta una pequeña cantidad de glicerina con una jeringa de que el ejemplar después de haber doblado la punta de la jeringa contra un ha sido limpiado piedra (esto asegurará que la glicerina vaya al fondo del en agua destilada.Suplemento al1 N especímenes con muchas sedas no rompen la tensión de la de localidad. desde algunos usa un tapón de corcho para los viales de plástico o un tapón ejemplares que no se aclaran del todo o solamente un poco de silicona de los que vienen con los viales para genitales de a otros que continúan aclarándose hasta que la cutícula se vidrio o de plástico. que son más caros. Hemos tratado de evitar contacto con la glicerina y fijar los viales en ángulo. la glicerina se quede al fondo del tubo. pero continuar aclarándose mientras están almacenados. no estamos completamente seguros de que que éste se seque. pero se debe tener cuidado mientras 11 . y es que a veces tienen la tendencia de de vidrio están equipados con un tapón de silicona. deberán pasar por una serie tamaños. Un sustituto. es importante evitar que el tapón haga vuelve transparente y sin pigmento. cavidad abdominal después de ser aclarado (y también para adoptado por el Dr. La glicerina de lavados. de etanol –EtOH) que son muy similares. ya que (número de catálogo. Sin probablemente alejara la glicerina del ejemplar y provocará embargo. finalmente. un tapón de corcho o silicona. Adicionalmente. pero generalmente estos Caplugs funcionan alcohol ácido bastante bien. Los Caplugs están disponibles en varios y limpiados en el agua destilada. Finalmente. la pared interna del vial. vial). Use una pequeña jeringa llena de que funciona bastante bien es el uso de pequeños cierres agua para lavar el tejido macerado de dentro de la cavidad protectivos utilizados en la industria electrónica (caplugs) del abdomen. Después de que los órganos genitales hayan sido enjuagados calidad XXXX).99 mm de enjuagues para detener el proceso de aclarado. El tope es cortado un poco debajo con unas pinzas con punta fina o con una aguja enmangada del primer borde interno para reducirlos en tamaño. Normalmente disponibles en varios proveedores. El medio de almacenaje es una pequeña superfecie. mientas deber a que no se ha seguido estrictamente el protocolo que el vial con la genitalia se mantiene en ángulo. especialmente si están hechos de vidrio. Para los ejemplares montados en alfileres es del corcho suelen disolverse en la glicerina y pueden afectar necesario almacenar las genitalias con el ejemplar en el el ejemplar. que es fijado debajo de la etiqueta trozo pequeño de papel. pero usamos los viales para genitalias de vidrio. pero generalmente son será necesario extraer el tejido macerado que queda de la caros. Parece también pueden ser cerrados con un tapón de corcho.com. transfiéralo de ahí a otra con 95% Nosotros usamos estos viales de plástico como material EtOH. pero para las especies más grandes. Se haber mucha variabilidad en este aspecto. Además. y aclarados en KOH conservados en glicerina que todavía no para holotipos y otros ejemplares “importantes”. de ahí a una placa con glicerina y. La desventaja es que los tubitos son acético glacial opacos y puede ser difícil observar las genitalias que están Enjuagando tejidos con una jeringa. Hemos observado un problema con ejemplares como las genitalias de los Hidroptílidos o Protoptilinos. y son con el extremo doblado en forma de un pequeño gancho. cerrados con un tapón de corcho pequeño (tamaño 0000. Oliver Flint. especialmente si uno es cauteloso al sacar (una parte ácido las genitalias del vial. y que hemos encontrado enjuagar el restante KOH).29 x 14. sino los mismos que los Caplugs). En el fondo del vial se genitalia. cuando el corcho hace contacto con la glicerina los taninos resultado buenas preparaciones. Nosotros usamos el tamaño 2. el tejido puede ser retirado http://www. o a impurezas de las soluciones o de plástico y vidrio. BioQuip Products). hasta que los tejidos internos se disuelven. seguidamente. Tinción de las Genitalias Ocasionalmente es necesario teñir las genitalias que se han vuelto demasiado transparentes debido a que se aclararon demasiado. Si el ejemplar se vuelve demasiado oscuro. Un método alternativo para aclarar las genitalias que hemos adoptado recientemente. El único inconveniente es que hay que dejar que los tubos se enfríen y hay que limpiarlos por fuera al sacarlos del baño de glicerina. si el baño ha sido precalentado. pero por lo demás este sistema funciona muy bien y es muy cómodo. Use siempre una lupa binocular mientras coloca o extrae las genitalias del vial (nosotros usamos una minucia enmangada con el extremo doblado en forma de gancho) y asegúrese de que cuando devuelva la genitalia al vial. aunque puede que no ocurra en especies con una membrana endotecal especialmente larga. fue desarrollado por Aysha Prather a partir de una técnica usada por los dipterólogos. la luz transmitida por debajo de la placa es esencial para localizar la genitalia teñida. Algunas de las ventajas son que las genitalias requieren poca limpieza de tejidos internos después de ser aclaradas. ya que al ser recalentado tiende a concentrarse y espesar. Transfiera el ejemplar del ácido láctico a una solución de agua o agua con unas cuantas gotitas de alcohol. En una placa pequeña con glicerina introduzca y disuelva unos cuantos granos de negro de clorazol (Chlorazole Black E. devuelva la genitalia a la tinción. dejando los ejemplares relativamente más frágiles que los aclarados en KOH. Examine el ejemplar en glicerina o en 80% EtOH. a una pequeña placa con glicerina (donde puede ser observado y dibujado). A continuación comentamos el método de preparación de las alas. Después del enjuague final con alcohol comentado anteriormente para aclarar la genitalia. dependiendo del grado de tinción deseado. pero con solo unos cuantos granos es suficiente para lograr un tinte oscuro. Para ello. Una desventaja de este sistema es que el ejemplar se reblandece más que en KOH. pero tal vez no para los fuertemente esclerotizados. o para examinar estructuras membranosas. Una vez preparado. Experimente para determinar el nivel apropiado. El ácido láctico no deberá ser reutilizado. hasta finalmente transferir el ejemplar al vial de genitalias lleno de glicerina para su almacenaje permanente. así que tenga cuidado de recuperar la genitalia de la solución. una ventaja para ejemplares poco esclerotizados. ésta queda en el fondo del mismo. Para teñir las alas que son muy pálidas usamos el “teñido doble” (Double Stain. por lo que los futuros resultados serán impredecibles. La mayoría de los ejemplares se aclaran tras 30 minutos en el hornillo. Sumerja el ejemplar en la tinción durante varios minutos. Un tercio del tubo que contiene el abdomen se rellena con ácido láctico y se coloca en un vaso de precipitados que contiene glicerina. transfiéralo a una placa con 80% EtOH durante unos cuantos minutos para eliminar el exceso de tinte y glicerina. esta tinción puede ser usada una y otra vez. que es evidente en insectos pequeños como los hidroptílidos (que a veces se aclaran perfectamente con este método). colóquela en la glicerina teñida durante unos cuantos minutos.Suplemento al1 N de no extraer accidentalmente la genitalia con el papel. La técnica de ácido láctico tiene sus ventajas y desventajas comparada con el uso de KOH. Numere los tubos e idee un sistema para asegurar la reasociación de las genitalias con el resto del ejemplar. Una vez teñida. El baño de glicerina en el vaso de precipitados no se va a evaporar durante el uso y se puede usar una y otra vez. El aclarado de la cutícula es usualmente menor que usando KOH. y que el uso de este método provoca en la eversion de la membrana endotecal del falo.). Este vaso se calienta a un nivel bajo en un hornillo a 110-125˚C. después transfiéralo a alcohol (80-95%). El proceso de teñir es especialmente útil para examinar estructuras internas de la genitalia de las hembras. algunos ejemplares continúan aclarándose). 13 . No obstante. Implica el aclarado de ejemplares en ácido láctico. Puede ocurrir que los ejemplares muy transparentes se “pierdan” en la solución de tinción. Introduzca las alas en una placa con la solución Double Stain durante unas cuantas horas/días antes de eliminar los pelos. con lo que la cápsula genital tiene tendencia a desarticularse del resto del abdomen. Para teñir membranas y estructuras esclerotizadas podemos utilizar la fucsina ácida. La intensidad de la tinción está relacionada con la cantidad de granos introducidos. solo es necesaria para cada ejemplar una pequeña cantidad de ácido láctico (más o menos un 1/3 del volumen del tubo). el tiempo utilizado influirá en el resultado final y variará con cada ejemplar. lo que es Un vaso de precipitación sobre definitivamente un hornillo que contiene tubos estrechos con ácido láctico. Sigma Chemical Co. como cualquier método de aclarado que requiere el uso de calor. Si el tinte original resulta ser insuficiente. y así permite observar estas estructuras. Este método requiere el uso de 85% ácido láctico (tal como viene en la botella) en un tubo estrecho marca Pirex (10 x 75 mm). examínela en un vidrio de reloj con glicerina. después lávelo en agua destilada para eliminar el exceso de tinte. particularmente las membranas intersegmentales. Los ejemplares aclarados con ácido láctico deberán ser lavados para detener el proceso de aclaración (hemos observado que con ácido láctico. preparación puede ser fijada en el alfiler. se ven ordenadas y la venación es fácil de observar. el (varias horas). o sistemáticos es valioso montar las alas. monedas) hasta que las alas se sequen completamente Mientras que el ala delantera es delgada y más robusta. para observar la lo que ayudara a que éstas se queden en posición. Mientras están mojadas. Usamos cubreobjetos de diferentes diámetros. hasta que éstas Es importante que la preparación se rehidraten (usualmente solo dura este completamente seca. se observen claramente. son relativamente fáciles de el ala delantera de la placa con unas pinzas o una minucia preparar. aunque solo se hace elimine agua para hacer que las alas se coloquen bien sobre el con algunos ejemplares. que esta doblada. añada unas cuantas como pegamento. Para montar las alas. ya que provocará la ruptura de las alas. pero deberá ser extendida identificar un ejemplar hasta el nivel de género después de cuidadosamente con los pinceles o con las pinzas. los Tricópteros para su identificación rutinaria. para estudios taxonómicos eliminar un poco de agua con la esquina de un papel suave. Se pueden levantar los dos cubreobjetos ala trasera es más ancha y especialmente delicada.Suplemento al1 N Preparación de las Alas que esté completamente extendida (no doblada sobre si No es necesario extender o preparar las alas de misma) y con el ápice del ala apuntando hacia la izquierda. hasta que se suelten. Añada o venación o para hacer ilustraciones. Si tiene preguntas o comentarios por favor contacte a M. pero tenga cuidado de no cuidado de no dañar la frágil región deslizar un cubreobjetos contra el otro anal del ala trasera. das con el resto del ejemplar en un Después de que las alas se sequen. deje caer un segundo montados en alfileres. borde de los cubreobjetos con Gelva entre los extremos de A continuación. Sin embargo. incluyendo las venas cruzadas que son con el ejemplar. en la práctica normalmente es mas fácil su posición doblada natural. o el Gelva unos cuantos minutos). Tenga a la vez con pinzas y sellar sus bordes con unas gotas de pegamento. borde del los cubreobjetos que contienen las alas hasta que el tome un cubreobjetos redondo y coloque suficientes gotas Gelva se seque (5 minutos). Las preparaciones de alas hechas de agua como para romper la tensión superficial con el de esta manera son compactas y pueden ser almacenadas peso de las gotas adicionales. cubreobjetos de vidrio y guardamos la preparación con el luego se coloca Gelva en la superficie interna del papel y ejemplar. podemos aclarar su genitalia. Cepille con cuidado para evitar rasgar las alas. las alas si se aplica demasiado. pegamos el pequeñas y poco visibles.tome directamente con el ejemplar. es posible empezar de nuevo usa el otro para –delicadamentequitar los pelos. La región anal del ala trasera querrá mantener familias o géneros. Si esto sujete un ala con un pincel mientras sucede. transfiera las alas sin pelos a una placa de un trozo de papel rígido doblado por la mitad (como si fuese agua limpia.con solo disolver el Gelva en alcohol. con penetrará entre los cubreobjetos hasta un par de pinceles suaves de artista. Luego se colocan entre un de un lado (generalmente del lado derecho) empujándolas papel suave con un pequeño peso sobre ellas (unas cuantas de la base hacia fuera con unas pinzas. para ello. gotitas de alcohol. la alfiler. Luego -con cuidado. con unas pinzas sujetamos los dos lados del papel sobre el dependiendo del tamaño de las alas. Coloque las alas en agua (como Nosotros usamos el adhesivo Gelva anteriormente. Nosotros luego montamos las alas entre dos una pinza): primero el alfiler se fija al papel cerca del pliegue. Luego. enmangada y colóquela sobre el cubreobjetos mojado hasta ilustrar o fotografiar bajo el microscopio. desprenda cuidadosamente las alas cubreobjetos sobre el primero. Para montar las alas de ejemplares cubreobjetos. Aunque Haga lo mismo con el ala posterior y colóquela paralela al la venación se utiliza frecuentemente en las claves de ala anterior. de ambas alas hasta que la venación. que tiene la ventaja gotitas de detergente si las alas no de ser soluble en alcohol y permite se hunden) o agua con unas cuantas separar los cubreobjetos si es necesario. Lourdes Chamorro-Lacayo cham0138@umn. Cepille ambos lados Una preparación de las alas guarda.edu 13 .
Report "Protocolos para analisis de genitalia y estudio de insectos"