UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS QUIMICA FARMACEUTICA I LABORATORIO DE QUIMICA FARMACEUTICA I PRÁCTICA Nº 1 INTEGRANTES: BonifazCarina Reyes Jessica Suquillo Tomás Grupo Nº 3 Fecha: 23/09/2013 Hora de Laboratorio: Lunes 08:00-10:00 1. TEMA: VALORACIÓN DE AMPICILINA POR EL METODO ESPECTROFOTOMÉTRICO. 2. OBJETIVOS: 2.1 Objetivo general: Valorar Ampicilina en producto terminado. 2.2 Objetivo específico: Determinar el porcentaje de principio activo presente en polvo para suspensión inyectable de la Casa Farmacéutica LIFE por método espectrofotométrico a 254nm (UV). Comparar el porcentaje de ampicilina presente en el polvo para suspensión inyectable con las especificaciones de la USP35 NF30. Comparar el porcentaje de principio activo determinado con los demás grupos de laboratorio. 3. MARCO TEÓRICO: 3.1 Fundamento de la valoración. 3.1.1 Espectrofotometría. Es el método de análisis óptico más usado en el área de investigación. Es la medida de la cantidad de energía radiante absorbida por las moléculas de una muestra en función de las longitudes de onda específicas. El fundamento de la espectroscopía se debe a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia Para evitar este error se hace una primera medida con una solución de referencia o BLANCO. se emplea más la Absorbancia (A) porque la relación entre A y la concentración de una solución es directamente proporcional y la de la T es inversamente proporcional. . Se llama “TRANSMITANCIA (T)” a la relación entre la luz incidente y la luz transmitida: T = Is / I0 . El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. La relación entre la absorbancia y la transmitancia es la siguiente: Si el %T = 100 Si el %T = 0 A = 2-log T = 2-log 100 = 0 A = 2-log 0 = ¥ En los aparatos que se usan actualmente se presentan absorbancias. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto. Todas las medidas que se hagan con posterioridad serán referidas a esta medida inicial y se harán en la misma cubeta que se utilizó en la medida del blanco. que contiene todos los posibles compuestos que intervienen en la lectura menos el que vamos a medir. se registra una cierta pérdida de intensidad. y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.con la que se absorben dependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH. pero el aparato lo que mide realmente es %T que luego transforma a absorbancia. constante eléctrica) . la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida. Se puede perder intensidad por la interacción con la cubeta o el solvente. fuerza iónica. debido a la absorción por parte de la sustancia. LEYES DE ABSORCIÓN Cuando un haz de luz pasa a través de un medio. por lo que dicha técnica constituye un valioso instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas. parte de la energía es absorbida. La Transmitancia se usa poco. Cuando la luz atraviesa una sustancia. temperatura. %T = (Is / I0 ) x 100. 2 Reacciones de Degradación de Penicilinas en medio ácido. y dando como resultado la formación de un compuesto coloreado.t o te en bi am O (b) S R2 O NH N+ O H CH3 CH3 O O R1 R2 O CH3 CH3 N HN O O R1 (a) O HO S CH3 CH3 (c) N N O O R1 R2 ACIDO PENÍLICO .La valoración espectrofotométrica de las ampicilina se basa en la reacción que tiene esta en un medio ácido.1. 3. produciendo la ruptura del anillo betalactámico. llamado Ácido Penílico (cromóforo) el cual puede ser detectado en el UV a una longitud de onda de 254nm. NH O N O S R2 CH3 CH3 O O R1 + H S . y algunos bacilos entéricos como E. Actúan inhibiendo la última étapa de la síntesis de la pared celular bacteriana uniéndose a unas proteínas específicas llamadas PBPs (Penicillin-Binding Proteins) localizadas en la pared celular.2. se ha reportado que las penicilinas activan un sistema autolítico endógeno que inicia la lisis celular y la muerte en algunas bacterias. La ampicilina no resiste la acción hidrolítica de las beta-lactamasas de muchos estafilococos. Otros gérmenes sensibles son N. es el fármaco preferido para el tratamiento de infecciones urinarias producidas por enterococos sensibles. La ampicilina es similar a la bencil penicilina en su acción bactericida contra organismos susceptibles. Dado que muchos otros gérmenes se están volviendo resistentes a la ampicilina. . NOMBRE NOMBRE SISTEMÁTICO AMPICILINA (2S. la N.2 Ficha del medicamento. especialmente durante el estadio de multiplicación. H. junto con la amoxicilina. gonorrhoeae se ha ido volviendo resistente. la ampicilina ocasiona. por lo tanto. Asimismo. siempre que ello sea posible. Acinetobacter. las tetraciclinas. la eritromicina o las sulfonamidas. La ampicilina. coli. por lo que no se usa en el tratamiento de estafilococias. Gardnerella vaginalis.5R.0]heptano-2-carboxílico ESTRUCTURA MECANISMO DE ACCIÓN Los antibióticos beta-lactámicos como la ampicilina son bactericidas. Es por esta razón que la ampicilina no debe administrarse conjuntamente con agentes bacteriostáticos como el cloranfenicol. influenzae no productora de b-lactamasa. Las penicilinas se unen al sitio activo de la enzima transpeptidasa y previenen la formación de las uniones cruzadas y. muchas cepas se están volviendo resistentes medíante mecanismos diferentes de la inducción de b-lactamasas. Proteus mirabilis. y Shigella. El evento terminal de la síntesis de la pared celular es la formación de uniones cruzadas de unidades de peptidoglicano mediante una reacción de transpeptidación. Serratia. La Listeria monocytogenes es sensible a la ampicilina. inhiben la formación de la pared celular. Aunque la ampicilina es activa frente a los estreptocos. Salmonella.Otros gérmenes resistentes a la ampicilina son las Klebsiella. Proteus indol-positivos. Al impedir que la pared celular se construya correctamente. la lisis de la bacteria y su muerte. Aunque inicialmente era sensible a la ampicilina. 3-dimetil-7-oxo-4-tia-1-azabiciclo [3. y Bacteroides fragilis. meningitidis. FARMACODINAMIA La ampicilina inhibe la síntesis de la pared celular de bacterias susceptibles. se recomienda realizar un antibiograma antes de instaurar un tratamiento con ampicilina. en último término.3. Pseudomonas.6R)-ácido 6-(2-amino-2-fenil-acetil)amino-3. ya que estos antibióticos inhiben la acción bactericida de la ampicilina. Bordetella pertussis. por lo que la adición de ácido clavulánico no aumenta la actividad de la ampicilina frente a estas cepas resistentes. así como en orina y líquido prostático.. Streptococcus pneumoniae. con una Cmáx.5 a 27 litros.88 µg/ml en un Tmáx. Clostridium perfringens. Shigella sp. La ampicilina está indicada en el tratamiento de infecciones producidas por microorganismos sensibles. por lo que se absorbe mejor del tracto gastrointestinal que la bencil penicilina o penicilina G. Calymmatobacterium granulomatis.5 µg. Eikenella corrodens. de 3-4 µm/ml. Enterococcus faecalis.. Erysipelothrix rhusiopathiae.v. La eliminación renal es de entre 40 a 92%. Helicobacter pylori. posee una biodisponibilidad de 50% en ayunas. Proteus mirabilis. Streptococcus agalactiae (estreptococos del grupo B). Es estable en ácido. Brucella sp. Borrelia burgdorferi. Bacteroides funduliformis. Corynebacterium xerosis. Leptospira sp. principalmente por secreción tubular. Clostridium tetani.. de 2. Se ha observado que también se elimina a través de la leche. o i. excepto cuando existe inflamación de meninges. ya que sólo 10% del fármaco es metabolizado. FARMACOCINÉTICA La ampicilina se elimina principalmente por la orina y en menor proporción por las heces. Escherichia coli. Estos parámetros farmacocinéticos son semejantes y bioequivalentes con la ampicilina en cápsulas de referencia.09 horas. sin biotrasformación. Streptococcus pyogenes (grupo A b-hemolíticos). Pasteurella multocida.5 µm/ml en un periodo de 12 horas después de una administración oral de 500 mg. la administración de ampicilina cápsulas a una dosis de 1 g origina una Cmáx. No atraviesa en concentraciones terapéuticas al sistema nervioso central. Sin embargo.. Eubacterium sp. Su volumen aparente de distribución varía entre 19.5-1 g i. En hueso también se alcanzan concentraciones elevadas. Haemophilus influenzae (negativos a la b-lactamasa).La ampicilina presenta una farmacocinética lineal. Listeria monocytogenes. Bifidobacterium sp.. Corynebacterium diphtheriae. Moraxella catarrhalis. Gardnerella vaginalis.4 a 6. por sus siglas en inglés) de cepas sensibles que es de 1. La concentración plasmática máxima después de una administración de 500 mg en cápsulas se alcanza en 1 a 2 horas. Treponema pallidum. Salmonella sp. Las dosis pueden aumentarse hasta 14 g/día INDICACIONES Y POSOLOGIA . cada 6 horas. Streptococcus dysgalactiae.. de 7. Los alimentos retardan y reducen la absorción. Las dosis recomendadas son: Administración parenteral Adultos y adolescentes: 0. Bordetella pertussis. También se elimina por vía biliar en cantidades menores.. Presenta una vida media de eliminación de 1 a 2 horas... Lactobacillus sp. En pacientes voluntarios mexicanos.m. Peptococcus sp. Neisseria meningitidis. Peptostreptococcus sp. Los siguientes microorganismos son considerados sensibles a la ampicilina in vitro: Actinomyces sp. Propionibacterium sp.. Se alcanzan concentraciones elevadas en la bilis.. Se ha observado que la concentración tisular de la ampicilina se encuentra entre 3 a 10 veces por arriba de la concentración mínima inhibitoria (MIC. Bacillus anthracis.. aunque las concentraciones plasmáticas en la leche materna son bajas. que varían de 0. Clostridium sp. Se une en 17 a 20% a las proteínas plasmáticas. Viridans streptococci. Salmonella typhi. Niños y bebés: 100-200 mg/kg/día i.2 a 2 kg: 75 mg/kg/día i.25-1 g cada 6 horas.2 kg: 50 mg/kg/día i.. La ampicilina está relativamente contraindicada en pacientes con infecciones virales o leucemia linfática ya que estos pacientes pueden desarrollar rash. etc. en particular si es de larga duración. CONTRAINDICACIONES Pueden producirse superinfecciones durante un tratamiento con ampicilina. fiebre el heno. por existir una incompatibilidad química. Los pacientes con alergia o condiciones alérgicas como asma. o i. o i. Los pacientes con alergias. asma o fiebre del heno son más susceptibles a reacciones alérgicas a las penicilinas. o i. Las dosis de pueden aumentar hasta 14 g/día Niños: 50-100 mg/kg/día en dosis iguales cada 6 horas.m. y pueden ocasionar en los lactantes diarrea. o i. INTERACCIONES En muchas ocasiones. Deberá ser considerado este riesgo si se decide mantener la lactancia en madres tratadas con ampicilina. La ampicilina está contraindicada en pacientes con alergias conocidas las penicilinas. Las penicilinas se excretan en la leche materna. eczema.v. Sin embargo. La incidencia de hipersensibilidad cruzada es del 3 al 5%.v.v. los antibióticos aminoglucósidos de muestran sinérgicos con la ampicilina frente a enterococos y estreptococos del grupo B. Prematuros de < 1. ambos antibióticos no se deben mezclar ni administrar al mismo tiempo. divididos cada 8 horas.m. Se ha comunicado una mayor incidencia de esta reacción adversa en pacientes con infeccción por citomegalovirus o con mononucleosis infecciosa. El uso concomitante de la ampicilina y el ácido clavulánico mejora la actividad antibacteriana de la ampicilina frente a las bacterias que producen beta-lactamasas . cefalosporinas o al imipenem. Se han comunicado candidiasis orales y vaginales Los pacientes deben ser monitorizados estrechamente si padecen alguna enfermedad gastrointestinal: las pencilinas puede exacerbar condiciones como la colitis que.v. candidiasis y rash. Algunas penicilinas inactivan los antibióticos aminoglucósidos cuando se mezclan en infusiones intravenosas. tienen un mayor riesgo de hipersensibilidad a las penicilinas.m. divididos cada 12 horas Administracion oral Adultos y adolescentes: 0. divididos cada 6 horas Prematuros > 7 days y de 1.m. divididos en administraciones cada 4 a 6 horas Neonatos > 7 días y > 2 kg: 100 mg/kg/día i. en ocasiones. puede llegar a ser pseudomembranosa. como la H. La entacapona deberá administrarse con precaución junto con fármacos que. dermatitis exfoliativa. su potencial toxicidad. Se han documentado casos de fracasos anticonceptivos en pacientes tratadas con ampicilina. Puede producirse una reducción de la excreción biliar de la entacapona. síndrome de StevensJohnson. la administración concomitante de lansoprazol. En algún caso puede producirse colitis pseudomembranosa durante el tratamiento o después. influenzae. en las pruebas que usan solución de Benedict o de Fehling o Clinitest®. Por lo tanto. Sin embargo. aumentanto las concentraciones plasmáticas de este último y. Se ha descrito eritema multiforme. y dolor abdominal. por consiguiente. Estas reacciones suelen ser más frecuentes con las aminopenicilinas que con las otras penicilinas. como es elcaso de la ampicilina. díarrea. bien a una estimulación del metabolismo de estos. anorexia. vasculitis y urticaria. En alguna rara ocasión se observado nefritis intersticial con necrosis tubular renal y síndrome nefrótico Los efectos secundarios más comunes. asociados al tracto digestivo son similares a los de otros antibióticos y se deben a la reducción de la flora: Naúsea/vómitos. se ha observado que la administración concomitante de ampicilina y alopurinol aumenta la incidencia del rash inducido por este último. rash maculopapular con eritema. interfieren con la excreción biliar o glucuronación. u omeprazol puede tener un efecto significativo sobre la biodisponibilidad de la ampicilina. se recomienda advertir a las pacientes que se encuentre bajo anticonceptivos orales de la posibilidad de un fallo anticonceptivos para que tomen medidas alternativas durante el tratamiento con ampicilina Los inhibidores de la bomba de protones tienen efectos de larga duración sobre la secreción gástrica de ácido. La ampicilina en grandes dosis inhibe la excreción tubular renal de metotrexato. si bien este efecto suele ser EFECTOS ADVERSOS . Se han observado falsos positivos en los tests de glucosa en orina de pacientes tratados con penicilinas. rabeprazol. Esta interacción es aprovechada y existen asociaciones de ampicilina + ácido clavulánico. Como la absorción gástrica de la ampicilina está influída por el pH gástrico. De igual forma. gastritis. aunque se desconoce la naturaleza de esta interacción. bien a un reducción de su circulación enterohepática al reducirse la flora gastrointestinal por acción del antibiótico. esta interacción no se produce con las tiras reactivas basadas en la glucosa-oxidasa Los efectos secundarios más frecuentes son los asociados a reacciones de hipersensibilidad y pueden ir desde rash sin importancia a serias reacciones anafilácticas. necrolisis epidérmica tóxica. La incidencia de rash con la ampicilina suele ser mayor en pacientes con enfermedades virales tales como mononucleosis o en pacientes con leucemia linfática. La ampicilina puede reducir la eficacia de los anticonceptivos orales que contienen estrógenos debido. 5 a 27 1-1. insomnio.bastante raro. aunque no son muy frecuentes. Se han comunicado convulsiones en pacientes con insuficiencia renal a los que se administraron penicilinas en grandes dosis. Estas reacciones adversas son reversibles al discontinuar el tratamiento. Los efectos adversos sobre el sistema nervioso central incluyen cefaleas. (Vademecum.8 horas 1-2 Hepático 3-4 75 a 85 01897-MAC-04-02 13-0446 Febrero/2015 LIFE . agitación. y confusión. púrpura trombocitopénica. y leucopenia. neutropenia. PROCEDIMIENTO: AMPIBEX 1g Ampicilina Frasco de vidrio con caucho Polvo para suspensión para inyectable 50 75-85 15 a 20 19.3 Tabla del medicamento. agranulocitosis. Nombre del medicamento Principio activo Presentación Forma Farmacéutica Químico farmacéutico responsable Registro Sanitario N° Lote Fecha de elaboración Fecha de expiración Laboratorio 4. Los efectos hematológicos son poco frecuentes y suelen ir asociados a reacciones de hipersensibilidad: se han descrito eosinofilia y hemolisis anemia (incluyendo anemia hemolítica) trombocitopenia.es) Constantes farmacocinéticas proceso (LADME): Disponibilidad oral (%) Lugar de absorción Excreción leche materna (%) Unido a proteínas (%) Depuración (mL*min-1) Volumen de distribución (L) Semivida (horas) Tiempo máximo (horas) Metabolismo Metabolitos Concentraciones máximas (μg/mL) Excreción 3. Agregar 5mL de HCl 0. Primera réplica m1= 50. Leer la absorbancia de la muestra a 254nm en un espectrofotómetro. % Pureza: 97. Repetir un duplicado.1N.4 mg/mL PP= 1000mg Vf= 100mL .4 mg Am1= 0.8 % 97. 4. aforar a 100mL con agua destilada. CÁLCULOS: 5.0257 g estándar puros (corregido) 5.1N y agitar (Nota 1).025 g de estándar puros → X X= 0.8g de estándar puros → 100 g estándar impuros X → 0.0255 g estándar puros (teórico) Masa de estándar pesada (experimental)= 0.0263 g estándar impuros 97.1 Preparación del estándar. Nota 1: si no se disuelve utilizar un ultrasonido durante 15 minutos.8g de estándar puros → 100 g estándar impuros 0. 5. agitar y aforar con agua destilada.452 Cst= 51.4.0263g estándar impuros X= 0. Leer la absorbancia del estándar a 254nm en un espectrofotómetro.2 Preparación del estándar Pesar el equivalente de 25mg de ampicilina ST USP y ponerlo en un balón aforado de 50mL.1 Preparación de la muestra Pesar el equivalente a 50mg de principio activo Agregar 10mL de HCl 0.478 Ast = 0.2 Porcentaje de principio activo en la cápsula. Segunda réplica m2= 51.7% Media: 105% .9% Réplica 2 102.4 g Am2= 0.464 Ast = 0.4mg/mL PP= 1000mg Vaforo= 100mL 5.3 Promedio del porcentaje de principio activo en una cápsula.452 Cst= 51. Porcentaje de principio activo Réplica 1 107. RESULTADOS: CASA COMERCIAL NIFA LIFE LIFE PORCENTAJE DE PRINCIPIO ACTIVO (%) 93 94 105 GRUPO 1 2 3 7. 2012) Color Olor Sabor Aspecto Dureza Desintegración Peso medio Friabilidad % P. que al momento de la disolución en ácido clorhídrico (HCl) y agua destilada tanto la masa del estándar como del polvo para suspensión inyectable se disolvieron rápida y completamente. Se pudo observar que no había mucha variación entre los datos obtenidos de absorbancias del estándar como de la muestra. OBSERVACIONES: Se observó durante la práctica. DISCUSIONES: El porcentaje de principio activo (ampicilina) determinado experimentalmente por el método espectrofotométrico en el polvo para suspensión inyectable a 254nm fue de 105% en promedio. 9. 8.A. BOLETÍN DE ESPECIFICACIONES: CONTROL DE CALIDAD Ensayos Organolépticos Especificación Resultado Cumplimiento Blanco Blanco Cumple Inodoro Inodoro Cumple Amargo Amargo Cumple Polvo Ensayos Físicos Especificación Resultado Cumplimiento NA NA NA NA Ensayos Químicos Especificación Resultado Cumplimiento 90%-120% 105% Cumple (FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA. este valor indica que no solo se encuentra dentro de los .6. CUESTIONARIO 11.2 pertenecientes a las casa comerciales NIFA y LIFE respectivamente. se encuentra dentro del rango (90-120%) y por lo tanto cumple con lo especificado en la USP35-NF30. 3 obtuvo un valor de 105%. indica que si hubo una hidrólisis ácida de la ampicilina por parte del ácido clorhídrico diluido.1) y 94% (Grupo No. sino que demuestra que los errores sistemáticos fueron lo más reducidos posibles como el hecho de tener material de vidrio completamente lavado y limpio. con porcentajes de 93% (Grupo No. Se comprobó que el porcentaje de ampicilina presente en el polvo para suspensión determinado espectrofotométricamente. elevado. CONCLUSIONES: Se determinó que le porcentaje de principio activo presente en el polvo para suspensión inyectable de la Casa Farmacéutica LIFE.1 Mecanismo de la hidrólisis ácida de las penicilinas. 10. en comparación a los demás grupos. en la cual hubo la formación del cromóforo que corresponde al ácido penílico capaz de ser detectado a una longitud de onda de 254nm. El resultado experimental obtenido de principio activo. Se comparó los diferentes porcentajes de ampicilina obtenidos por los tres grupos mediante el mismo método espectrofotométrico. CASA COMERCIAL NIFA LIFE LIFE PORCENTAJE DE PRINCIPIO ACTIVO (%) 93 94 105 GRUPO 1 2 3 11. por el método espectrofotométrico a 254nm fue de 105%. balanza analítica nivelada y calibrada. en el cual el grupo No.rango establecidos por la USP35-NF30. . un estándar con características que proporcionan seguridad durante la determinación experimental de dicho principio activo. (b) Formación de un anillo intermediario conocido como OXAZOLINA. (c) Nueva transposición a un anillo denominado IMIDAZOL formado el ácido penílico. que es producto de degradación a pH ácido.2 En que afecta los radicales R1 y R2. Relaciona con el espectro de acción. O R2 NH S CH3 CH3 N O O O R1 Solubilidad Tiempo de acción Responsable de la sensibilidad a la hidrólisis por parte de la βlactamas. 11. . seguido de un ataque nucleofílico del resto carbonilo de la cadena lateral. Vínculo con las proteínas bacterianas PBP que transportan a la penicilina dentro de la célula.R2 O NH S CH3 CH3 N O O O R1 + H S .t o te en bi m a O (b) S R2 O NH N+ O H CH3 CH3 O O R1 R2 O CH3 CH3 N HN O O R1 (a) O HO S CH3 CH3 (c) N N O O R1 R2 ACIDO PENÍLICO (a) Inicia con la protonación del Nitrógeno (N) lactámico. Enlace a proteínas transportadoras. es/principios-activos-cloranfenicol-j01ba01 .scribd. Imprenta Mariscal. BIBLIOGRAFÍA: (s. Estados Unidos De América. de http://www.).f.cl/farmacologia/cloranfenicol. de http://www.radiodent. (2012). FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA. Recuperado el 5 de Mayo de 2013. SCRIBD.pdf EDIFARM.12. (26 de Mayo de 2009).f. VADEMÉCUM FARMACÉUTICO .). Recuperado el 5 de Mayo de 2013.vademecum. (2013). Recuperado el 5 de Mayo de 2013. (s.es. de http://es.com/doc/15822154/15/Aspecto-Analitico-del-Cloranfenicol Vademecum.
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