OBTENCION DE LECITINA Y CEFALINA A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO - CUARTA PRÁCTICA DE LABORATORIO

April 4, 2018 | Author: Andres Vega | Category: Lipid, Cell Membrane, Cell Biology, Chemistry, Biochemistry


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INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO IV OBTENCIÓN DE LECITINA Y CEFALINA A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVOESTUDIANTES: PAOLA RODRÍGUEZ MUÑOZ VÍCTOR HUGO ESCALLÓN M. COD: 160591 COD: 160588 UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE INGENIERÍA AMBIENTAL OCAÑA (N.S) 2010 COD: 160591 COD: 160588 DOCENTE. Químico Puro.INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO IV OBTENCIÓN DE LECITINA Y CEFALINA A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO ESTUDIANTES: PAOLA RODRÍGUEZ MUÑOZ VÍCTOR HUGO ESCALLÓN M. CARLOS ALBERTO PATIÑO UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE INGENIERÍA AMBIENTAL OCAÑA (N.S) 2010 . Los fosfoglicéridos o glicerofosfolípidos son moléculas lipídicas del grupo de los fosfolípidos. un grupo fosfato y una base nitrogenada. los conceptos se deben tener claros para aplicarlos en el desarrollo de esta práctica. se dispersa en el agua en forma coloidal y es insoluble en acetona. este nutriente ayuda a proteger los órganos y las arterias de la acumulación de grasa. En su estructura química podemos observar una molécula de glicerol. sobre los lípidos complejos. La lecitina Posibilita la entrada y salida de nutrientes dentro de la célula. Parte de aquí la dispendiosa tarea de comprobar por medio de la práctica que estos fosfoglicéridos se obtuvieron a través de la yema de huevo. dos ácidos grasos. Es importante la responsabilidad del estudiante al efectuar el laboratorio. En contraste con las grasas y aceites.INTRODUCCIÓN Esta práctica ponen a prueba los conocimientos adquiridos teóricamente en Bioquímica. es posible separar la lecitina de un extracto etéreo. como son los glúcidos y los fosfolípidos. Es uno de los principales constituyentes de las bicapas lipídicas de las membranas celulares proporciona elasticidad a las membranas celulares y las protege de los efectos destructores de los radicales libres. La lecitina contiene glicerol y ácidos grasos como las grasas simples. Los fosfolípidos son los componentes más abundantes de la membrana citoplasmática. . es decir que son simultáneamente hidrofílicos e hidrofóbicos. al grupo fosfato se une un alcohol o un aminoalcohol. La lecitina pura es un sólido ceroso de color blanco que expuesta al aire se oxida de inmediato. una molécula compleja compuesta por glicerol. tienen en la "cabeza" (ácido fosfórico + alcohol) es decir un grupo fosfato cargado negativamente y las dos "colas"(ácidos grasos) cadenas hidrocarbonadas fuertemente hidrofóbicas. de los lípidos saponificables. particularmente los fosfoglicéridos. Esta práctica se fundamenta en la clasificación compleja. a su vez. añadiendo acetona. en el que se han esterificado dos ácidos grasos (uno saturado y otro insaturado) y un grupo fosfato. . Están compuestos por ácido fosfatídico. Por tanto. pero además poseen ácido fosforito y colina. De igual manera son anfipáticos. los cuales están constituidos por Cefalina y Lecitina. . La Cefalina está compuesta por un glicerol esterificado en los hidroxilos 1 y 2 por dos ácidos grasos. Promueve la reducción de los niveles de colesterol y triglicéridos en la sangre. es. junto con la fosfatidilcolina. y en el hidroxilo 3 con un grupo fosfato que. Las cefalinas difieren de las lecitinas solo en que la etanolamina reemplaza a la colina. a su vez. uno de los fosfolípidos más frecuentes en la bicapa lipídica de las membranas celulares. un derivado del etanol. Las cefalinas desempeñan una función muy importante en el proceso de coagulación de la sangre. se esterifica con el aminoalcohol etanolamina.mejora el funcionamiento del cerebro y facilita la absorción de algunas vitaminas del complejo B y de la vitamina A. De igual forma estas prácticas experimentales son el complemento de los conocimientos adquiridos en la parte teórica. e interpretación lógica a los problemas planteados.JUSTIFICACIÓN En Bioquímica es necesario concederle gran importancia a las prácticas realizadas en laboratorio. se extraen y separan dos grupos de lípidos muy importantes. en la estabilización de la estructura las proteínas. clasificados en dos grupos según posean glicerol o esfingosina. quienes poseen características anfipáticas. la Cefalina y lecitina. . hidrofílicas e hidrofóbicas. Se pudo establecer que los fosfoglicéridos son moléculas lipídicas del grupo de los fosfolípidos. especialmente de los fosfolípidos. que participan en la estructura de las membranas celulares. ya que permiten la deducción. son los fosfolípidos más frecuentes en la bicapa lipídica de las membranas celulares. en la solubilización de lípidos no polares en las lipoproteínas. por contener fosforo: lecitinas y cefalinas. En esta práctica además de la extracción de lípidos totales. Las cefalinas difieren de las lecitinas solo en que la etanolamina reemplaza a la colina. De igual manera los fosfoglicéridos están constituidos por Cefalina y lecitina. mediante la demostración y experimentación de los resultados. Mediante esta práctica se comprobó la importancia de los lípidos complejos. Además se caracterizan por poseer un grupo fosfato que les otorga una marcada polaridad. ambos conocidos como fosfolípidos. Determinar la cantidad de porcentaje de lípidos extraídos.OBJETIVOS  Extraer y separar de un material biológico de fracción lipídica como la yema de huevo.  . el prensado y la filtración de semillas produce los aceites vegetales y su respectiva torta. En las membranas celulares los fosfolípidos juegan un papel muy importante. ácido fosfórico y un alcohol. la filtración de los tejidos grasos de los cerdos. Es en la parte hidrofílica donde se encuentran el grupo fosfato y el aminoalcohol o base nitrogenada. separando y aislando a los dos sistemas. Los fosfolípidos son anfipáticos. el calentamiento. interactuando entre ellas y dejando sus extremos hidrofílicos en contacto con el agua. En algunos casos la extracción de algunas grasas de hace por medio de los disolventes. produce manteca. Esta característica estructural hace posible que los fosfolípidos participen en el intercambio de sustancias entre un sistema acuoso y un sistema lipídico. es soluble en lípidos (hidrofóbica). Al entrar en contacto con el agua. las moléculas de fosfolípidos se organizan formando micelas o bicapas que son grupos macromoleculares con gran cantidad de lípidos. En medio acuoso las colas de los fosfolípidos (constituidas por la molécula de glicerol y los ácidos grasos) tienden a disponerse en manera tal de formar un ambiente local hidrofóbico. Son moléculas con características lipídicas formadas por una molécula de glicerol a la cual se le unen dos ácidos grasos y un grupo fosfato. bencenos entre otros ya que una característica de los lípidos es su insolubilidad en agua.MARCO TEÓRICO Las grasas se obtienen de fuentes naturales por medio de una gran diversidad de procesos. ya que controlan la transferencia de sustancias hacia el interior o exterior de la célula. el batido de leche separa la mantequilla de la leche. En estas estructuras las cadenas hidrofóbicas de ácidos grasos se alinean unas con otras. mientras que la otra. una parte de su estructura es soluble en agua (hidrofílica). a la vez que los mantiene juntos. esto es que son simultáneamente hidrofílicos e hidrofóbicos. En efecto. LOS FOSFOLÍPIDOS: son lípidos saponificables formados por ácidos grasos. tales como el éter o alcanos de bajo peso molecular. . compuestos orgánicos. adquiere una coloración amarillenta al exponerse al aire y forma una suspensión coloidal en el agua. Se cierra sobre sí misma y delimita un espacio interno. En su estructura química podemos observar una molécula de glicerol. en la cabeza se encuentran dos grupos iónicos. Se clasifican de acuerdo con el aminoalcohol unido al fosfato. La molécula de lecitina tiene dos partes la cabeza y la cola. La Cefalina es el segundo fosfolípido más abundante en los animales. acido fosfórico y un aminoalcohol que puede ser colina. fosfato y colina. el fosfoglicérido es la fosfatidilcolina o lecitina y si el alcohol es uno de los restantes la serina o etanolamina. los fosfoglicéridos se denominan cefalinas. si el alcohol es la colina. serina. Juega un papel clave en la estructura de las membranas. “Los agentes emulsificantes son sustancias que ayudan a suspender las grasa en el agua ”. Son los componentes primarios de las membranas celulares. y en la cola las dos cadenas no polares de los esteres de ácidos grasos. en contacto con el medio acuoso. son los componentes de la capa de mielina o membrana que rodea una fibra nerviosa. como los demás lípidos son solubles en disolventes orgánicos (éter. las cabezas (polares) hacia fuera de la estructura. CEFALINA: Son otro grupo de fosfoglicéridos. aunque se distinguen de los lípidos menos polares por su escasa solubilidad en acetona fría. La lecitina es muy abundante en la yema de huevo y la soya. es utilizada como emulsificante de las grasas en los helados y las mayonesas. el aminoalcohol que se une al fosfato puede ser la serina o la etanolamina. glicerina. o etalonamina Los fosfoglicéridos. dos ácidos grasos. FOSFOGLICÉRIDOS: Están constituidos por ácidos grasos de 14 a 24 carbonos. jugando un rol especifico en la . en contacto con el medio acuoso. Bicapa: dos capas de fosfolípidos con las cabezas hacia afuera. LECITINA: Fosfatidilcolina o lecitina es un solido con la apariencia de una cera. un grupo fosfato y una base nitrogenada.Micelas: estructura esférica con las colas de los fosfolípidos (no polares) hacia adentro y. y las colas hacia el medio de la bicapa. lo que permite su precipitación selectiva. cloroformo). estabilización de la estructura de algunas proteínas. mechero) Embudo de vidrio Soporte universal Malla de asbesto Pinzas para crisol Aro de hierro . Éter. Material Biológico: Yema de huevo Vaso precipitado de 100 ml Varilla de vidrio Papel filtro Baño María: (Vaso de 600 ml. permitiéndoles que desempeñen en la membrana una función de transporte o enzimática. Etanol. MATERIALES Y REACTIVOS Disolventes orgánicos: Acetona. 2. 6. Deje secar un poco y luego lleve el residuo a la estufa hasta que sequedad. Añada éter hasta cubrir totalmente la yema y agite con una varilla de vidrio para homogenizar bien y con cuidado durante dos minutos. 8. Filtre sobre un papel filtro humedecido con etanol. . Evapore el filtrado lentamente en un baño de vapor. 7. 3. Pese los dos precipitados.PROCEDIMIENTO 1. 5. separe la yema y vacíela en el vaso precipitado de 100ml. Pese la yema. Rompa el huevo. Agregue lentamente y sin dejar de agitar el volumen de acetona igual al del éter. 9. Lave el residuo que quedo en el papel filtro con alcohol etílico bien frio. 4. Pese un vaso de precipitado de 100 ml. Se observara inmediatamente un precipitado. Deje reposar la mezcla por 10 minutos. Anote el peso de la yema. peso del vaso precipitado. Porcentajes totales de fosfolípidos.CUESTIONARIO   ¿Por que se usan diferentes solventes para separar lípidos? Escriba las formulas general de los lípidos que usted separo en cada fracción y ubíquelos en la clasificación de lípidos. y cálculo del porcentaje de lecitina y cefalina luego de la separación.   . DESARROLLO DE LA PRÁCTICA  ¿Por que se usan diferentes solventes para separar lípidos? Porque permiten romper los enlaces covalentes y la extracción de las sustancias de interés. (una liquida y una solida). El Éter es un solvente de muy baja polaridad y de bajo punto de ebullición 35ºC. pero se precipito formando dos interfaces. Es el solvente por excelencia de uso en el laboratorio. solventes latentes y diluyentes.  Etanol. La acetona es un solvente intermedio entre los muy polares y los no polares. Se utilizaron los siguientes disolventes:  Éter. sirviendo para hacer miscibles dos solventes que no lo son o para extraer conjuntamente sustancias no polares y polares. Su importancia y patrón de uso determinan su clasificación en solventes activos. . Los solventes: Son compuestos orgánicos basados en el elemento químico carbono. permitió diluir y homogenizar completamente la mezcla. es un alcohol que se presenta como un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78 °C. Etanol o alcohol etílico. permitió la fácil filtración de la mezcla. cosolventes.  Acetona. solvente especial para los lípidos. se uso para dar miscibilidad a la mezcla. resinas y grasas minerales. ESTRUCTURA GENERAL FOSFOLÍPIDOS L .lecitina L – Cefalina . Escriba las formulas general de los lípidos que usted separo en cada fracción y ubíquelos en la clasificación de lípidos. 87 gr Peso de secado al horno 61. Anote el peso de la yema. peso del vaso precipitado.46 gr .990 gr 1.08 gr + Cefalina = 54.08 gr 27.87 gr 54. Peso del material utilizado en laboratorio.368 gr 25.548 gr 17.46 gr + 1.53 gr 115. Vaso precipitado de 100 ml Yema Papel filtro Embudo de vidrio Erlenmeyer Vidrio reloj CEFALINA Peso antes del secado Vidrio reloj + papel filtro 25.062 gr = 27.08 = 27.95 gr Cefalina = 27. y cálculo del porcentaje de Lecitina y Cefalina luego de la separación.95 – 27.062 gr 16. Peso de vaso precipitado = Peso de vaso precipitado seco = Cefalina = 61.485 gr 123.853 – 115.405 gr  Porcentajes totales de fosfolípidos.780 gr 7.780gr = 7.102 gr LECITINA Peso antes del secado Erlenmeyer + Lecitina = 123. .768 gr = 20.485 gr Peso de secado al horno Peso de lecitina en seco = Peso de papel filtro = Lecitina = 9.768 gr 61.768 gr Cefalina Antes del secado – Cefalina después del secado.368 gr Lecitina = 8.548 gr 53.485 gr – 8.062 gr 8.08 gr = 0.368 = 8.142 gr 1.87 – 7.08 gr Lecitina antes del secado – lecitina después del secado. 8.548 gr – 53. 27.853 gr Peso Erlenmeyer = 115. 405 gr x 100 % X= --------------------------8.x 100 % 78.405 gr 100% X PORCENTAJE PARA CEFALINA 27. Valor Experimental: Valor obtenido mientras hacías el experimento.77 % 20.87 gr 20.485 gr 0.PORCENTAJE PARA LECITINA 8.485 gr X= 4.102 gr 100% X 0.53% Porcentaje de error para la Lecitina . Porcentaje de error para la Cefalina 78.12 % PORCENTAJE DE ERROR Valor Teórico – Valor Experimento Porcentaje de error = ------------------------------------------------------.x 100 % Valor Teórico Valor Teórico: Valor o resultado que dice en los libros o que debías obtener.102 gr x 100 % X= ---------------------------27.12% Porcentaje de error = --------------------------------. % – 72.87 gr X= 72. % Porcentaje de error = 7. La lecitina es una sustancia blanca de aspecto grasoso. también contiene lípidos (triglicéridos 65%. seguido por la Cefalina y pequeñas cantidades de fosfatidilserina. 77 % y 72. En la yema de huevo se encuentran las lecitinas en gran abundancia y el colesterol en suficiente cantidad para hacer su asilamiento y detección fácil. Los porcentajes obtenidos para la lecitina y Cefalina en la yema de huevo fueron de 4.77% Porcentaje de error = -----------------------. que al mezclarse se homogeniza y separa los lípidos. caso contrario se observo al .6 % CONCLUSIÓNES A través de la práctica desarrollada en el laboratorio. contiene vitaminas exceptuando la C.5 % – 4.x 100 % 5% Porcentaje de error = 4. Se determino que la lecitina es el principal fosfolípido. que expuesta a la luz se oxida y descompone tomando coloración café.12%. La yema de huevo es soluble en solventes orgánicos como el éter. fosfolípidos 29% y esteroles 5% aprox). La principal propiedad funcional de la yema es su gran poder emulsionante. se aprecio que la yema de huevo corresponde casi al 30% del peso total. tiene una mayor densidad de nutrientes. Las cefalinas se diferencia de las lecitinas por tener a la colamina como base nitrogenada. html http://milksci.net/miguelovsky/12-lpidos-2009 http://html.htm http://www. 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