microbiologia

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SINALOAESCUELA SUPERIOR DE AGRICULTURA DEL VALLE DEL FUERTE DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGÍA, RAMA DE FITOPATOLOGÍA NOTAS DEL CURSO DE: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA PARASITOLOGIA 7mo. SEMESTRE ING. FIERRO CORRALES DAGOBERTO ING. MENA ADRIANO JORGE DANIEL Profesor JUAN JOSÉ RÍOS, SINALOA. AGOSTO DE 2009 UNIDAD I.- INTRODUCCIÓN. 1.1.- CONCEPTOS FITOPATOLÓGICOS. LA MICROBIOLOGÍA: Es un área de la biología que se encarga del estudio de los microorganismos en forma general. Esta ciencia empieza a desarrollarse a fines del siglo XVII, la razón de esto es que hasta esta fecha se contó con la ayuda de un instrumento óptico (microscopio) y además que en esta época prevalecía “LA TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA” y otra razón es que se desconocían las técnicas apropiadas para estudiar aspectos sobre estos microorganismos. LA FITOPATOLOGÍA: Es una ciencia de síntesis: toma datos y técnicas de campos diversos como lo es la Agricultura, Microbiología, Anatomía Vegetal y Ciencias del Suelo; sin embargo, la Fitopatología es una ciencia aplicada que comprende el estudio de las enfermedades de las plantas y pretende dar soluciones prácticas para solucionar el problema. Las enfermedades de las plantas se pueden clasificar en varias formas, tomándose en cuenta diversos aspectos. Uno de los métodos más comunes de clasificación es el tipo de agente y de esta manera se clasifican en: enfermedades infecciosas (todas aquellas provocadas por parásitos como: hongos, bacterias, virus, nemátodos, fitoplasmas, espiroplasmas, viroides, rikettsias, plantas parásitas, etc.) y enfermedades no infecciosas (provocadas por efectos del medio ambiente). FITOBACTERIOLOGÍA: Ciencia que se encarga del estudio de las bacterias que inducen enfermedades a los vegetales. ¿QUÉ SON LAS BACTERIAS?: Son microorganismos unicelulares procariontes, que carecen de clorofila y se reproducen principalmente por fisión binaria. Las bacterias fitopatógenas se definen como microorganismos unicelulares en forma de bastón, que carecen de clorofila, presentan pared celular y no tienen núcleo definido. La palabra BACTERIA proviene de las letras griegas: BACTERIE, que significa varita o bastón. 2 1.2.- HISTORIA DE LA FITOBACTERIOLOGÍA. Investigadores que hicieron aporte al campo de la Bacteriología: ROBERTO HOOKE (1665): Fue el primero en observar protozoarios, utilizando lentes de 14 – 42 aumentos, analizando una gota de agua sucia, pero pasó a ser pura observación, ya que no describió y/o publicó nada. ANTON VAN LEEUWENHOECK (1675): Se interesó en el pulido de lentes y fue el primero en construir un microscopio simple (200 aumentos), reconoció a las bacterias y a otros microorganismos, se entusiasmó tanto con sus observaciones que escribió una serie de cartas a la REAL SOCIEDAD DE LONDRES, donde fue ignorado debido a la creencia en esa época sobre “LA TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA”. LUIS PASTEUR (1860): Experimentó en un frasco con caldo nutritivo en su interior, el cual permitía la entrada de aire libre pero filtrado, siendo con este experimento tan sencillo, lo que dio la pauta para refutar “LA TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA”. Además estudió la fermentación, producción de ácido láctico vía aerobiosis, estudia la enfermedad de la rabia en animales, ántrax del ganado, el cólera y la producción de vacunas y antisépticos. Considerando todas las aportaciones de este investigador, se le considera como “EL PADRE DE LA BACTERIOLOGÍA”. En el año de 1892 se le otorga el premio de la Soborna de París y en dicho reconocimiento menciona esta frase: “El hombre debe de tener un mejor modo de vida, tiene que buscar la verdad, no tener dudas, tener determinación aún en condiciones adversas, preguntarse que he hecho para mi persona y que he hecho para mi pueblo. Vivan felices por todo lo que han hecho para la humanidad”. ROBERTO KOCH (1876).- Trabajando en el laboratorio de PASTEUR, demuestra que el ántrax del ganado es ocasionado por una bacteria, al igual que la tuberculosis en humanos. Fue el primero en utilizar medios de cultivos de microorganismos en cultivos mixtos. Además estableció los criterios para determinar la patogenicidad de microorganismos parásitos, a lo que actualmente conocemos como POSTULADOS DE KOCH. TOMÁS BURRIL (1880).- Investigador que relacionó por primera vez a las bacterias como fitopatógenas, siendo la bacteria Micrococus amylovorus, hoy conocida como Erwinia amylovora, causante del “tizón de fuego” del peral y del manzano. 3 WAKER (1883).- Trabajando en el laboratorio de DE Bary, aisló y comprobó la patogenicidad de Xanthomonas hyacinty la cual ocasiona la enfermedad del “amarillamiento del jacinto”. ARTHUR (1886).- Trabajando en Nueva York, comprueba y afirma los resultados de BURRIL y WAKER. QUAITE (1891).- Asistente de BURRIL, estudió la epidemiología de Erwinia amylovora, además de la distribución o dispersión por medio de vectores. SAVASTANOI (1887).- Observó y describió las agallas de las ramas de olivo ocasionadas por Pseudomonas savastanoi. ERWIN F. SMITH (1887).- Estudia enfermedades de mucha importancia en América Latina, como la marchitez de las cucurbitáceas y la venación negra de las crucíferas. Dedicó aproximadamente 40 años al estudio de las bacterias fitopatógenas, por lo que en su honor, se le da el nombre al género Erwinia. 1.3.IMPORTANCIA FITOPATÓGENAS. Y DISTRIBUCIÓN DE LAS BACTERIAS En la actualidad el hombre por obtener productos vegetales diversos que satisfagan sus necesidades de alimentación, vestido y otras de menor importancia, se encuentran factores que disminuyen y en casos extremos aniquilan los rendimientos de los cultivos. Entre otros factores y en orden de importancia tenemos los insectos, ENFERMEDADES, malas hierbas y roedores. Las bacterias son importantes por varios puntos de vista: 1. 2. 3. 4. Son importantes en la ciencia de la biotecnología. Son importantes en la ciencia de la geomicrobiología. Son importantes en la genética microbiana. Son importantes porque forman parte de los ciclos constructivos y destructivos. 1.- Importancia en la ciencia de la biotecnología. Se utilizan bacterias fitopatógenas para la producción y recombinación de algunos productos, ejemplo: a. Escherichia coli: produce ÍNDIGO (teñir mezclilla). b. Clavibacter sp.: se utiliza para producir tomates secos, (CAMBELL) absorbe agua. c. Xanthomonas campestris: capaz de endulzar chiles sin calorías. d. Erwinia: la utiliza la Renault para filtrar los aceites (devoran impurezas). e. Xanthomonas sp.: produce cervezas sin calorías (Alemania). f. Erwinia: destapa caños en (Francia). 4 Intervienen en los ciclos del Carbono. Nitrógeno y Azufre. California.. Erwinia amylovora: (Tizón de fuego del peral y manzano). En el año de 1901 a 1904. En México en el año de 1975 ocasionó pérdidas del 10-100% en el cultivo de la papa. California. aproximadamente 200 se comportan como fitopatógenas. 3. Para el año de 1971 ocasionó pérdidas de 7 millones de dólares. ejemplos: Pseudomonas solanacearum: ataca diversos cultivos de importancia en el mundo. De las 1800 especies de bacterias que se conocen.Importancia de las bacterias en la geomicrobiología. En le ciclo del Nitrógeno: están involucradas bacterias del género: Nitrobacter: descomponen el amoniaco a nitritos. fue la enfermedad más seria en 14 frutales de importancia. utilizando el género Agrobacterium y Bacillus para el intercambio o traspaso de genes. 5 . destruyendo aproximadamente 150. y recientemente un problema potencial para el cultivo de tomate y chile en el estado de Sinaloa. Se han utilizado principalmente en Noruega. En la isla de Java en el año de 1978. Pseudomonas corrugata: Reportada en E. En el año de 1903 en Florida ocasionó pérdidas entre el 25-100% en el cultivo del tabaco. Las bacterias fitopatógenas juegan un papel muy importante en el ciclo destructivo de los vegetales debido a que ocasionan daños de suma importancia en la agricultura. ejemplo: con la ayuda de las bacterias se disminuye el costo para la obtención de vaselina.U. Agrobacterium tumefaciens: (Agallas de la corona). causó el 25% de pérdidas en el cultivo de cacahuate.Utilidades de las bacterias en genética microbiana.000 (95%) árboles de manzano y peral por lo que el cultivo se desplazó al Valle de Sacramento.. En 1963 en California.Debido a que forman parte de los ciclos constructivos y destructivos.U. bacterias capaces de producir gas. también descomponen derivados del petróleo para su utilización en la industria. En el ciclo del Carbono: algunos géneros de bacterias descomponen a los vegetales. en Chiapas se han abandonado plataneras por los daños ocasionados por esta bacteria. 2. 4. Estos experimentos se iniciaron en Bélgica y en la actualidad se usan en Suecia Y E. Nitrosomonas: degradan los nitratos a nitritos.. Pseudomonas: se utiliza para evitar que se encienda la lana. se presentó una epifitia en el valle de San Joaquín.g. Es una bacteria de mucha importancia en el mundo. Se refiere al intercambio de genes o bien a las bacterias como portadoras de genes. Esta pudrición puede ser de consistencia seca o húmeda. 6 . existen bacterias o especies que son compatibles a una sola especie de planta. esta puede ser parcial o total del hospedante (producción de toxinas) también definida como lesiones de crecimiento indeterminado. Mancha: Necrosis localizada en cualquier parte de la planta. En ocasiones éstas áreas presentan una coloración oscura o castaña debido a la producción de melaninas.. Necrosis: Áreas donde las células sufren primeramente plasmólisis. colapso y la muerte. Los síntomas pueden indicar la existencia de una enfermedad. Entre las enfermedades bacterianas encontramos variados tipos de síntomas. Cancro: Necrosis restringida en los tejidos corticales de tallos y raíz con crecimiento secundario. la determinación de su causa y el desarrollo de métodos de control.. vacuolas o cloroplastos dando como consecuencia: Clorosis: retardamiento o disminución de la clorofila por anormalidades en los cloroplastos.SINTOMATOLOGÍA BACTERIANA. aunque también existen especies de plantas que son susceptibles a más de una especie de bacterias a la vez. Son muy pocas las especies de plantas cultivadas que no están propensas al ataque de los agentes fitopatógenos. Disminución de clorofila e incremento de carotenos y xantofilas. Pudrición: áreas muertas debido a la maceración de tejidos con presencia de exudados bacterianos. estos son utilizados como guías para diagnosticar la naturaleza o causa de una enfermedad en particular. 2. Amarillamiento. Siendo una herramienta más la sintomatología inducida por las bacterias. pero ellos no son en sí la enfermedad.. Tizón: Desintegración rápida de los tejidos seguida por la muerte celular.4.Cambios de color.1.desintegración de tejidos: Son ocasionados por la acción enzimática o toxinas que producen los patógenos sobre la pared del hospedante y/o afectando el protoplasma celular. Antocianocencia: coloración púrpura como resultado del incremento del pigmento antocianina. los cuales son divididos en cuatro categorías: 1. usualmente delimitado por tejido sano. Las funciones principales de los fitopatólogos son el diagnóstico de las enfermedades de las plantas.. sin embargo.Alteraciones presentes en los plastidios. Fasciación: proliferación excesiva de brotes como consecuencia de la Hipoplasia (poca división celular)..Daños al sistema vascular Marchitez: Flacidez o pérdida de turgencia de la planta debido al taponamiento de los vasos que conforman este sistema. constituye la base de las pruebas serológicas. Con el fin de producir antisueros específicos para una determinada bacteria. pero para esto se requiere contar con el antisuero específico y la obtención de este es minuciosa y lleva tiempo. Los métodos serológicos.SEROLOGÍA Y PRODUCCIÓN DE ANTISUEROS. que se puede demostrar de muchas maneras. Para obtener antisueros bien concentrados (títulos altos). produciendo una reacción visible con la bacteria o virus que causó la infección. son de un valor incalculable para la identificación y diagnosis de rutina. Al suero que contiene anticuerpos se le llama antisuero.5. mientras que al suero proveniente de un animal al que nunca se le ha eyectado un material antigénico se le nombra suero normal. dicha especie de bacteria completamente purificada e inactivada se debe de inyectar a un animal. presentándose la planta como arrosetada. ya sea por estructuras del patógeno. por lo general se emplean procedimientos que hayan sido exitosos en otras ocasiones. en el cual se considera (se detecta) que se ha formado la mayor 7 . 4.3. en respuesta a la infección aparecen en su sangre proteínas del grupo de las globulinas que se les llama anticuerpos. de preferencia a un conejo. sustancias que las bacterias producen o estructura del tejido vegetal. generalmente proteínas y polisacáridos. Cualquier sustancia que estimula la producción de anticuerpos y que además puede combinarse con ellos “IN VITRO” se denomina antígeno. Con las técnicas serológicas se detectan microorganismos en bajas concentraciones en tejidos vegetales. 1. Por lo anterior. sino también con una gran cantidad de materiales extraños. como una bacteria o virus.Desarrollo anormal del crecimiento: Ocasionado por alteraciones en las sustancias reguladoras del crecimiento ya sea aumentando o disminuyendo su concentración.. Un animal puede producir anticuerpos no solamente en respuesta a la infección con un agente causante de enfermedad. Se puede demostrar la presencia de anticuerpos en el suero de la sangre del animal inoculado. Si un animal de sangre caliente es infectado con un agente que causa enfermedad.. Después de un tiempo prudencial. Este acto de combinación. Agalla: desarrollo anormal donde las células dañadas sufren el fenómeno de Hiperplasia (multiplicación excesiva de las células) o Hipertrofia (aumento de tamaño de las células). por la propiedad que tienen de combinarse “IN VITRO”. es indispensable conocer las ventajas y limitaciones de la serología. así como un método cuantitativo para el estudio de algunos microorganismos. a juzgar por la cantidad de trabajos que se han realizado y los resultados que se han obtenido. 20 min y después. se extrae la sangre del animal inmunizado y se separa la fracción suero. Este antisuero es valorado seguidamente para determinar su título. a esta vena. tratando de que las gotas escurran por la pared interna del recipiente con el fin de que no golpeen y se rompan los glóbulos rojos. 2. a 60° C durante 2 horas para inactivarlas. como se muestra en el cuadro siguiente: 8 . Preparación del antígeno: se prepara una suspensión bacteriana con concentración aproximada de 3 x 109 células por mL. glutaraldehido o con otros métodos. de color blanco y se mantiene con alimento balanceado. Para tener la certeza de que las bacterias murieron al ser expuestas a esta temperatura. manualmente se le quita el pelo de una oreja hasta descubrir una vena. sano. se toma una muestra de la suspensión tratada y se siembra en una placa de medio artificial. El suero obtenido se conserva en congelación hasta el momento en que es utilizado. en la región más alejada de la cabeza se le practica una pequeña herida longitudinal. las bacterias se colocan en baño maría. Cuatro días antes de inyectarlo por primera vez y con un día de ayuno. por decantación se obtiene el suero. Inmunización del conejo: Para la inmunización se selecciona un conejo macho. La inyección del antígeno en el cuerpo del conejo se realiza bajo un programa calendarizado. joven.cantidad posible de anticuerpos. con una navaja de afeitar nueva y flameada. aunque también se pueden matar con cloroformo. en solución salina al 0. Posteriormente. Para el sangrado del conejo. con una espátula se separa el coágulo de las paredes del vaso. después de una noche de refrigeración. significa que se rompieron glóbulos rojos y entonces es necesario centrifugar para clarificar el suero.85% esterilizada y utilizando una cepa purificada en un cultivo de 48 hr de edad. La sangre se recoge con cuidado en un vaso de precipitado. Para preparar un antisuero para una bacteria específica se sigue el siguiente procedimiento: 1. el suero normal se utiliza para pruebas de aglutinación o de titulación del antisuero. ya que si se observa rojo. que se debe de observar de color amarillo. Esta sangre obtenida se deja en reposo durante 1 hr. se le extraen 10 mL de sangre para obtención de suero normal. de esta primera dilución se toma 0. al igual que otros animales. Este es el tubo que se utilizará como testigo. para que la dilución quede 1:10.0 mL 2. Después de agitar perfectamente. Nota: A otro tubo de ensayo con 0.85% (dos con 0.0 mL observaciones Intravenosa en la oreja Intravenosa en la oreja Intravenosa en la oreja Intravenosa en la oreja Músculo de la pata Músculo de la pata Músculo de la pata Cuando se inyecta 1.5 mL y se vacían en otro tubo de ensayo con 0. se desechan 0.9 mL de solución salina biológica.5 mL de solución salina. Para demostrar la presencia de anticuerpos en la sangre.1 mL 0. producen anticuerpos en contra de sustancias o microorganismos extraños que penetran a su cuerpo. PRUEBA DE AGLUTINAMIENTO O TÍTULO DEL ANTISUERO Los conejos.2 mL 0.5 mL y después se le adicionan 0. más compuestos con fuerte capacidad antigénica. Al conjugarse el antígeno con el anticuerpo se forman agregados de alto peso molecular que se precipitan y se agregan en el fondo de tubos de ensayo.5 mL) y se esteriliza con presión y calor húmedo. De esta sangre se obtiene antisuero y se realiza la titulación de la manera siguiente: Se preparan 10 tubos de ensayo con solución salina al 0.Programa para la inmunización del conejo en contra de una bacteria específica. al conejo se le extrae una pequeña cantidad de sangre. se le adiciona 0. Del tubo con la última dilución se desechan 0. Después de tres días de la última inyección.0 mL y se dejan en reposo en una gradilla. el antígeno se puede mezclar con un coadyuvante (sustancia a base de aceite.0 mL en el músculo de la pata.5 mL para que todos los tubos queden con 0.9 mL y el resto con 0. como se describió anteriormente.5 mL de antígeno para aforar a 1. para que quede una dilución 1:20 en este segundo tubo y así se prosigue diluyendo hasta llegar al 1:2560. A un tubo con 0.3 mL 0.5 mL 1. Fecha ------------------A los 3 días A los 2 días A los 2 días A los 3 días A los 8 días A los 5 días Volumen del antígeno a inyectar 0.5 mL del antígeno. A cada tubo se le adicionan 0.5 mL 0.1 mL del suero normal. 9 .9 mL con solución salina se le agrega 0.1 mL de antisuero. que puede ser de bacilos tuberculosos muertos o atenuados).5 mL de la mezcla. bacilares (bacilos) y las de forma de coma.. 2..2. además forma parte en la división celular y le da especialidad antigénica para la identificación..1. es una estructura que le confiere rigidez a la célula. látex y ELISA.2.5 a 1.el tamaño de las células de las bacterias fitopatógenas varía de 0..0 micras de diámetro. 2.5 micras de longitud por 0. cápsula.Pared celular. en la excreción de enzimas hidrolíticas.1.2.Situada inmediatamente después de la pared celular.. todas las fitopatógenas poseen su cuerpo en forma bacilar o bastón.1. Las bacterias Gram + tienen dos capas y las Gram – tienen cuatro. 10 .1. Están relacionados directamente con el aparato nuclear de la célula bacteriana y se les atribuye que tienen función directa en la síntesis del septum transversal. azúcares y lípidos. la cual generalmente es de 5 a 20 atmósferas.2.. hay esféricas (cocos).6 a 4. membrana plasmática. 2.1.2. La pared celular representa el 20% del peso seco de la célula bacteriana y sus componentes químicos son: aminas. II. citoplasma y organelos o estructuras citoplasmáticas.Tamaño..Mesosomas. CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LAS BACTERIAS FITOPATÓGENAS. Es una estructura que esta formada por capas de proteínas. Un grupo especial de microorganismos posee un cuerpo multicelular y filamentoso. aminoácidos.el cuerpo de la mayoría de las especies de bacterias está constituido por una sola célula que puede variar su forma. doble difusión en agar.ESTRUCTURA El examen microscópico de una célula bacteriana revela ciertas estructuras como: pared celular. inmunofluorescencia..Algunas pruebas serológicas son la aglutinación. elipsoidales (espirilos).. o sea el que divide la célula al momento de la reproducción asexual.Se encuentran en la membrana citoplasmática y es un retículo que se encuentra entre la MC que limita el contenido citoplasmático y aparecen como expansiones de la misma membrana. ácidos teitoicos.3.MORFOLOGÍA 2. lípidos y enzimas. de acuerdo con la especie: así pues.2.Es la envoltura de las células procarióticas. 2.. 2. como el de los hongos.Forma. Esta juega un papel importante en los procesos de biosíntesis basándose en el número de enzimas que se encuentran en su nivel.. 2. Además juegan un papel importantísimo en la respiración y transferencia de sustancias. flagelos.Membrana citoplasmática (MC).. pilis. le da forma y sirve de soporte a la presión interna. El 80% del citoplasma corresponde a agua y el resto lo componen ácidos nucleicos (AN). 2.5.0 y 7. carbohidratos.. Está definido como un HIDROGEL COLOIDAL. 11 ..Ribosomas. Los ribosomas están compuestos aproximadamente en un 60% de ARN y un 40% de proteínas. Además de los ribosomas.6. iones orgánicos. En este fluido espeso ocurren muchas reacciones químicas tales como la síntesis del material celular a partir de los nutrientes (anabolismo). 2..5 (neutro).2. compuestos de bajo peso molecular y partículas diversas. El pH del citoplasma es de 7. Cada grupo o especie de bacteria sintetiza una sola categoría de sustancias y ésta puede ser: almidón.Citoplasma. En los ribosomas se lleva a cabo la biosíntesis de proteínas. el citoplasma contiene: el material nuclear (núcleo).. proteínas. es un fluido que contiene sustancias disueltas y partículas en suspensión como los ribosomas. forman lo que se llama granulaciones.. sustancias de reserva (gránulos) y pequeños órganos especializados. glucógeno.Las bacterias pueden acumular materiales orgánicos e inorgánicos en el citoplasma y constituyen reserva de energía.4. cuando estas sustancias llegan a acumularse en una cantidad suficiente. lípidos.2.Son partículas o pequeñas granulaciones esféricas que se encuentran libres en el citoplasma o bien asociados a la parte interna de la MC.2. sustancias carbonatadas y Nitrógeno.2.Granulaciones o sustancias de reserva del citoplasma. Es el portador del material genético (herencia).Las células procarióticas (bacterias) no poseen una membrana que englobe al núcleo.. Como se mencionó anteriormente el aparato nuclear tiene un solo cromosoma y este cuerpo cromosomático tiene una estructura fibrilar que está constituida exclusivamente de ADN y.1..es un material mucilaginoso que rodea a la pared celular. el mensajero del ADN es transmitido bajo formas de ARN mensajero.2.. también se cree 12 .. Este material nuclear llamado nucleoide esta formado por un único cromosoma circular.Plásmidos.2. que luego va a transformarse en secuencias polipéctidas que formarán las proteínas de estructura o bien las enzimas.2. Son portadores de la variación genética (resistencia). 2.Cápsula.9.9...Elementos inconstantes en las bacterias.8.Son fragmentos extracromosomáticos de ADN.. El material nuclear ocupa la zona central de la célula y parece estar unido a los mesosomas.ESTRUCTURA CELULAR DE UNA BACTERIA FITOPATÓGENA 2..2.7. protege a las células contra la desecación (deshidratación) y fagocitosis.Existen estructuras que solo están presentes en ciertos grupos o especies de bacterias como lo son: 2.Material nuclear (Nucleoide). 2. . requieren de sustancias orgánicas que son capaces de sintetizar. 3.que está involucrada con la patogenicidad.9. arginina y el triptofano. bases puricas y pirimídicas y éstos son los que conocemos como FACTORES DE CRECIMIENTO. ácido glutámico.Pilis o fimbrias. quebradizas y contienen una proteína que se llama “pilina”. III.Es decir. vitaminas. como son: C. 13 .. ya que las bacterias se multiplican a partir de los alimentos o nutrientes presentes en los medios de cultivo. A diferencia de los flagelos. Su función es darle movimiento a la célula y funcionar como estructuras quimiorreceptoras. los cuales pueden impedir..2. O. pH y O2. Generalmente se encuentran con mayor frecuencia en las bacterias Gram – y son más raras en las Gram +. Para estudiar la nutrición de las bacterias es necesario analizar las necesidades elementales y energéticas necesarias para su crecimiento. los aminoácidos..Son estructuras en forma filamentosa compuestas por proteínas (flagelina) y 14 aminoácidos (queratomicina del flagelo). son cortas. fuentes de energía) y otros que son capaces de utilizar ciertos elementos. FISIOLOGÍA BACTERIANA. Entre los aminoácidos están: lisina. Se consideran de importancia en la fusión. por ejemplo. al momento de la conjugación bacteriana (paso de plásmidos a través del pili de una célula a otra) y le da adherencia a la célula. Las bacterias siempre tienen un número de necesidades comunes.2. Una de las características que hace importante a las bacterias es su rápida reproducción y por esto LA NUTRICIÓN BACTERIANA debe de estar completada con dos tipos de sustancias: Sustancias elementales. K. Miden aproximadamente tres veces la longitud de la célula bacteriana. ya que algunos mutantes avirulentos carecen de este mucílago.. como son las necesidades elementales (N. Mg y P). inhibir o bien acelerar la nutrición y dentro de estos factores tenemos: temperatura.Son estructuras que se encuentran distribuidas en gran cantidad alrededor de la célula bacteriana. Intervienen también en la nutrición y el crecimiento de los FACTORES FÍSICOS.2.1. mientras que en las vitaminas están: riboflavina y el ácido pantoténico. al igual que los factores físicos y químicos que la condicionan. 2.3. los materiales constitutivos de la célula. H y en menor proporción sustancias minerales y sustancias orgánicas (Ca.Flagelos. Estos constituyentes permiten a las células bacterianas elaborar sus propios alimentos. N.. además le da adherencia a la célula y sirve de reserva de carbohidratos 2.9. H2O.NUTRICIÓN BACTERIANA. cercanas a 15 o 20° C. 14 . en cuanto a necesidades de pH hay bacterias: Acidófilas: se desarrollan en pH ácido (< 7).. Termófilas: Crecen mejor entre 45 y 60° C. en parte. en la mayor parte de las especies los límites mínimos y máximos corresponden a cualquier punto entre pH 4 y 9. Las variaciones en la temperatura también pueden influir en los procesos metabólicos y en la morfología celular. termófilas obligatorias o estenotermófilas.Ya que el proceso de desarrollo de las bacterias depende de reacciones químicas y la velocidad con que se efectúan estas reacciones es influida por la temperatura. Aunque cabe señalar que la temperatura óptima de crecimiento así definida. son el oxígeno y el dióxido de carbono.Los gases principales que afectan el desarrollo bacteriano. De acuerdo a las necesidades de temperatura para la nutrición y crecimiento las bacterias se pueden dividir en los siguientes grupos: Psicrófilas: Capaces de desarrollarse a 0° C o menos.En la mayor parte de las bacterias el pH óptimo de crecimiento está entre 6.. Neutrófilas: se desarrollan en pH neutro (7). Estas especies se denominan termófilas verdaderas. La temperatura de incubación que permite a las bacterias el desarrollo bacteriano en un período corto (12 a 24 hrs) se llama temperatura óptima de crecimiento..5 y 7. La temperatura puede. Otras que pertenecen a las termófilas crecen mejor a temperaturas superiores a los 60° C y no se desarrollan a temperaturas que están en la región mesofílica. determinar la velocidad de crecimiento y el grado total de desarrollo de los microorganismos. y sobre esta base se dividen en cuatro grupos: Aerobias: bacterias que se desarrollan en presencia de oxígeno libre. Basófilas: se desarrollan en pH alcalino (> 7. puede no serlo para otras actividades celulares. Anaerobias facultativas: bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de oxígeno libre. pH. el patrón de desarrollo bacteriano puede ser influido profundamente por esta condición. aunque algunas bacterias pueden desarrollarse a pH extremo. Microaerófilas: bacterias que crecen en presencia de pequeñísimas cantidades de oxígeno libre. aunque crecen mejor a temperaturas superiores.Temperatura. Gases. Anaerobias: bacterias que se desarrollan en ausencia de oxígeno libre. Cada especie de bacterias crece a temperaturas que están dentro de ciertos límites. A estas especies se les conoce como termófilas facultativas o euritermófilas. Mesófilas: Crecen mejor en límites de temperatura que va de 25 a 40° C.5).5. Las bacterias presentan una respuesta amplia y variable al oxígeno libre. Los límites de desarrollo de algunas bacterias termófilas se extienden a la región mesofílica. lo anterior indica que la resistencia es la regla o la generalidad y la enfermedad es la excepción. que le permita al patógeno ser aceptado por las células hospedantes. La mayoría de las plantas son resistentes al ataque de la mayoría de los patógenos vegetales. no le pueden inducir enfermedad. o sea que los microorganismos no llegan a inducirles enfermedad. En la naturaleza es muy frecuente que las plantas sean atacadas por parásitos y aún así la mayoría de éstas permanecen sanas. azúcares. otras veces inhiben la germinación de estructuras de resistencia del parásito o actúan como atrayentes o repelentes de los mismos. vitaminas. toxinas. Los procesos de infección incluyen: Migración de la bacteria desde el lugar de multiplicación o sobrevivencia hasta el hospedante. como ejemplo se puede mencionar la producción y exudado de sustancias (aminoácidos. etc.PROCESOS FITOBACTERIAS. porque para que esto suceda debe de existir una relación genética.) ya sea por las raíces o partes aéreas de las plantas que favorecen o desfavorecen al microorganismo. La influencia química se da de muchas formas. 15 . lo anterior es un ejemplo de influencia física. Cuando en las hojas existe mucha cera y esta es de calidad. en ocasiones estos exudados son tóxicos para algunos microorganismos y para otros no. Las plantas influyen sobre los parásitos en forma física y química. Las células bacterianas individuales son muy frágiles y están desprotegidas. la temperatura óptima y la presencia de ciertos factores de crecimiento aumentan la velocidad de proliferación. los procesos de infección terminan y a este momento se le considera como el tiempo en que se inicia la fase logarítmica de la división celular. Aún cuando muchos microorganismos potencialmente fitoparásitos llegan a estar en contacto con su hospedante. Los requerimientos inmediatos son alta humedad relativa y un sustrato nutricional adecuado. fisiológica y específica entre los dos. con el tiempo llegan a perder su resistencia. Penetración y establecimiento de la bacteria en los tejidos hospedantes. aunque una nutrición mínima y alta humedad relativa con frecuencia son suficientes para establecer la infección. por lo tanto deben de encontrar con rapidez un ambiente propicio para su proliferación y así evitar la muerte. de ahí que cultivos de plantas resistentes a una raza de un patógeno.IV. DE COMPATIBILIDAD E INFECCIÓN DE LAS Los agentes cambiantes de enfermedad son muy cambiantes porque sus poblaciones genéticamente no son estables ni uniformes.. el agua de rocío o de lluvia resbala impidiendo que se presente una película de humedad que favorezca el establecimiento preintroductorio del parásito. Reconocimiento y contacto de la bacteria con su hospedante. Ya que el patógeno se ha establecido en el hospedante. Lo anterior se da siempre y cuando las condiciones del ambiente favorezcan esa relación. La inoculación es el proceso mediante el cual entran en contacto. azúcares. el reconocimiento es un evento temprano específico que (induce) dispara una rápida respuesta en el hospedante. Esta humedad se 16 . esto es cuando el microorganismo se desarrolla y produce sustancias como desecho de su metabolismo cerca de órganos vegetales como la raíz. Esta complementariedad manda una señal que llega a los organelos de la célula hospedante y se da una respuesta (reacciones) que puede ser positiva (se acepta el patógeno y la enfermedad se desarrolla) o negativa (opuesta al patógeno y se disparan los mecanismos de defensa) y se forman barreras estructurales o barreras químicas. sin embargo el contacto se da más bien como resultado de la locomoción del microorganismo en suelos microcapilares.INOCULACIÓN. el hombre.4. Las bacterias pueden migrar desde el sitio de hibernación o desde su fuente de multiplicación por medios propios o auxiliada por otros agentes como el agua. además de proporcionar locomoción a las células bacterianas. El reconocimiento se establece mediante superficie de dos organismos que se ponen en contacto (esto último es la Teoría de Moléculas Complementaria). nucleótidos y vitaminas. el viento. en la pared celular o en la membrana citoplasmática de las células del hospedante pueden estar presentes proteínas o glicoproteínas que se reconocen con los carbohidratos del patógeno. ya sea facilitando o impidiendo el crecimiento del patógeno. Los flagelos. Las bacterias fitopatógenas son capaces de seguir un gradiente de concentración químico. Se requiere de una película de agua sobre los órganos del vegetal para que las bacterias puedan nadar y llegar a los sitios específicos de penetración. algunas bacterias no necesitan penetrar para llegar a causar indirectamente daño en plantas. La atracción de los patógenos es hacia sustancias o soluciones aminoácidos. el patógeno (en este caso una especie de bacteria) con la planta hospedante. Según Sequéira. Para que las bacterias causen infección en plantas hospedantes susceptibles. sino una respuesta a estímulos que se originan en el hospedante. se requiere que primero penetren a los tejidos y tomen contacto con las sustancias que ellas necesitan para su desarrollo y multiplicación.PENETRACIÓN. entre otros.2. El reconocimiento es un requisito universal de sobrevivencia y se da entre los dos organismos participantes. Las bacterias en el suelo se pueden tener en contacto accidentalmente con las raíces como consecuencia del crecimiento radical... Los fluidos que emanan de aberturas naturales (gutación) de las plantas presentan altos contenidos de aminoácidos (arginina y metonina) y carbohidratos (ribosa. los insectos. por lo que ejercen fuerte atracción hacia las células bacterianas. glucosa). En este caso particular el patógeno reconoce los estímulos o las sustancias y la topografía del hospedante. En casos excepcionales.1. capacitan al patógeno para recibir el estímulo y tomar contacto con su hospedante para causarle infección. la migración no es un movimiento al azar. dichas sustancias son absorbidas por las planta y entonces le pueden provocar toxicidad. arabinosa. 4. Las plantas presentan una variedad de aberturas naturales para realizar algunas de sus funciones esenciales como es la transpiración.. tienen una abertura en forma de lenteja y se localizan en la corteza de las plantas leñosas para reemplazar a los estomas de la desaparecida epidermis. raíces y tubérculos en sustitución de los estomas: axilas de hojas. Penetración por lenticelas. liberación natural de agua por las aberturas naturales de las plantas y por el escape de agua por heridas producidas por agentes extraños. La bacteria Pseudomonas syringae pv. en la superficie de los órganos de las plantas. como lo hacen la mayoría de los hongos. tampoco producen sustancias que lleguen a desdoblar las ceras cuticulares y las cutinas presentes en la cutícula de las plantas. Las bacterias no desarrollan órganos o estructuras especiales para romper las barreras estructurales de las plantas y así penetrar directamente. etc. principalmente cuando se presentan lluvias o rocío que elevan la humedad relativa del ambiente. entre otras. mancha bacteriana del tomate y chile. vesicatoria). phaseolicola (P. X. que están presentes en los bordes o ápices de las hojas o lóbulos. secreción de néctar. citri (X. Las plantas utilizan las lenticelas para el intercambio de gases.Los estomas son diminutas aberturas que se localizan en la epidermis de los órganos verdes de las plantas. 4. tabaci (P. los estomas son orificios que las bacterias utilizan con frecuencia para penetrar a los tejidos vegetales. Penetración por estomas. vesicatoria (X. tallos.2. también el sustrato nutricional adecuado y una temperatura apropiada favorecen la penetración de las bacterias. intercambio de gases. eliminación de exceso de agua o de sustancias nocivas. rocío. y los hidátodos. cáncer bacteriano de los cítricos. pecíolos. Durante el desarrollo de las lenticelas en la corteza 17 .1. campestris pv.PENETRACIÓN POR ABERTURAS NATURALES. Por tales razones las bacterias utilizan las aberturas naturales que tienen las plantas y las heridas que se producen por diversos factores o agentes para introducirse en los tejidos hospedantes.. tizón del halo del Frijol. Estas aberturas son los estomas. las células bacterianas se desecan con facilidad y en poco tiempo. penetra por estomas aunque también puede penetrar por hidátodos y por heridas producidas por insectos y otros agentes. riego. citri). P. campestris pv. phaseoli)..Las lenticelas son protuberancias visibles a simple vista. las plantas superiores parásitas de otras plantas y los nemátodos. Las bacterias tienen que penetrar rápidamente en sus hospedantes por que al no tener capacidad de producir estructuras de resistencia. Además de la humedad.proporciona por lluvia. phaseolicola). tizón común del Frijol. phaseoli (X. o bien en las puntas de prolongaciones piliformes. regulan la transpiración y el intercambio de gases con el ambiente. Al ser las hojas los órganos más expuestos de las plantas. syringae pv. tabaci) que causa la enfermedad conocida como “quemazón” o “fuego silvestre” del tabaco y soya. Otras bacterias que pueden penetrar por estomas son: Xanthomonas campestris pv. que se localizan en las hojas. X. y muchas otras especies más.. Penetración por hidátodos. tormentas de polvo.. cancer bacteriano del tomate. 4. tabaci). P. syringae (P. syringae pv. Se localizan en el ápice de algunas vellosidades o de las nervaduras de las hojas. y P. etc. michiganense. muy frágiles y que pueden secretar algunas sustancias o humedad. amylovora. aprovechan las lenticelas para introducirse a tallo y tubérculos: P. tabaci (P. uni o multicelulares. insectos.. syringae). carotovora). cáncer bacteriano y gomosis de árboles de fruto de hueso respectivamente. Después de que se practica una herida en la planta. descargas eléctricas. peca bacteriana del tomate. pudriciones blandas de órganos carnosos. Penetración por nectarios. pudriciones blandas y pierna negra o pié negro de la papa. también son introducidas a las plantas. para poder penetrar a los tejidos hospedantes. utilizan los nectarios para introducirse a las plantas y causar infección. Erwinia carotovora pv. para así introducirse en los tejidos de las plantas. syringae pv. 18 . y Xanthomonas campestris pv. Por los hidátodos se realiza la gutación.. Clavibacter michiganense pv. carotovora (E. el agua expulsada por gutación puede ser absorbida por los hidátodos y si en estas gotas de agua se han depositado algunas células bacterianas. Xanthomonas campestris pv. esto es normalmente después de ocho horas de que se practica la herida. atroseptica (E. oryzae (X. antes de presentarse la suberización. solo penetran por heridas y después de que se presentan reacciones de acondicionamiento del tejido hospedante que favorecen a la bacteria.Los nectarios son órganos con abertura que secretan néctar y pueden ser florales o extraflorales. son favorecidas por las secreciones de tricomas y probablemente penetran por la base de los mismos. Erwinia carotovora pv. tizón del fuego del peral y manzano. Algunas bacterias como Erwinia amylovora. tomato). Algunas bacterias dependen de heridas practicadas por diferentes agentes como el granizo.. syringae pv. tizón bacteriano del arroz. lluvias. ésta se suberiza con rapidez.2. campestris). Aun cuando las siguientes bacterias y otras muchas pueden penetrar de otra forma. pudrición negra de las crucíferas. se introduce a las plantas por los hidátodos. campestris (X. implementos agrícolas. E.PENETRACIÓN POR HERIDAS. agallas de la corona de muchas plantas. factores que favorecen la sobrevivencia de algunas bacterias durante condiciones secas.Los hidátodos son órganos secretores foliares que segregan soluciones acuosas muy diluidas. desarrollo de raíces secundarias. oryzae). tomato (P. Por la mañana cuando sale el sol. Penetración por la base de los pelos glandulares. las bacterias deben de coincidir con la herida antes de que se realice la suberización para llegar a penetrar.se producen grietas o fisuras que son invadidas por algunas bacterias.2.Los tricomas son proyecciones epidermales de diferente forma y función. atroseptica). Agrobacterium tumefaciens.. 2.1. o sea que comprenden a una sola célula. a unas cuantas células o a una pequeña zona de la planta y se mantienen localizadas durante toda la estación de crecimiento. INFECCIÓN Y PATOGÉNESIS. Patogenicidad es la habilidad de un agente para generar una enfermedad.. y Erwinia stewartii. lo mismo que Clavibacter sepedonicum. mientras que virulencia es el grado de patogenicidad que presenta el mismo agente. La infestación es la introducción del patógeno en el ambiente hospedante. y Clavibacter michiganense pv. La patogénesis es el proceso de inducción de la enfermedad. 4. syringae (P.INVASIÓN. fruto. Otras infecciones se propagan más o menos con cierta rapidez y se pueden extender a todo un órgano de la planta (flor. cáncer bacteriano y gomosis de árboles de fruto de hueso. Los patógenos invaden a sus hospedantes de manera distinta y a diferentes niveles.INFECCIÓN Y PATOGÉNESIS.) o incluso llegar a infectar a la planta completa.Las Erwinias del grupo carotovora. intravascular o intracelularmente. P. Después de que se ha presentado la penetración en el hospedante. campestris)..3. etc. las bacterias que invaden intercelularmente los tejidos.3. pudrición anular de la papa. syringae pv. marchitez bacteriana del maíz.. syringae). penetra a la raíz a través de las heridas que se practican cuando se están desarrollando raíces secundarias. o sea una serie de eventos que van desde la infección hasta el desarrollo del patógeno dentro de la planta y subsecuente producción de síntomas. bioquímicas y estructurales que una planta lleva a cabo en respuesta al daño que le causa un agente extraño. hoja. también se pueden desarrollar intracelularmente al disolver los constituyentes de la pared celular.3. 4. aunque a veces se pueden extender ligeramente y a un ritmo también lento.INVASIÓN. se introducen por las heridas practicadas por los insectos vectores como Acalymma vittata (escarabajo rayado de las cucurbitáceas) y Diabrotica undecimpunctata (diabrótica) para la primer bacteria y Chaetocnema pulicularia (pulga saltona del maíz) para la segunda. campestris (X. Muchas infecciones causadas por bacterias son locales. marchitez bacteriana de las cucurbitáceas. 19 . X. michiganense. pudrición negra de las crucíferas. cancer bacteriano del tomate. penetran por heridas. Rhizobium spp. Erwinia tracheiphila. mientras que las bacterias que ocasionan marchitamiento vascular (invasión del floema) también pueden invadir a los vasos del xilema. a las bacterias se les puede localizar intercelular. pudriciones blandas. campestris pv. La infección se entiende como el establecimiento de la asociación entre el patógeno y las células y tejidos de la planta hospedante. la bacteria vive en simbiosis con las leguminosas.. la patogénesis trata del proceso de la enfermedad donde se estudian los mecanismos que utilizan la bacterias para causar infecciones y las reacciones fisiológicas. 4. . las bacterias aparentemente. para que se desarrolle una infección sistemática y se cause un daño severo en manzano por E. Enzimas pectolíticas o pécticas. El número de células bacterianas que se requieren para que una infección se inicie es variable y depende de la especie de bacteria que se trate. después las cepas virulentas ya no pueden establecerse y por lo tanto la infección tampoco se realiza). Aunque las cepas virulentas como avirulentas de bacterias tienen la capacidad de producir enzimas. reconocen estos sitios específicos para la unión. lo cual induce la producción de enzimas por parte del patógeno. además la pared celular primaria de dichos tejidos también contiene porcentaje alto de estas sustancias.En primeros estadíos de la enfermedad es raro que las bacterias lleguen al interior de las células vivas. tanto in vitro como in vivo y el establecimiento de la infección parece depender de la compatibilidad del hospedante con la bacteria. ya que primero tienen que atravesar las paredes celulares que funcionan como una barrera física. Se ha demostrado que las bacterias fitopatógenas pueden producir enzimas pectolíticas.Enzimas. amylovora. proteolíticas y/o amilolíticas.1. celulolíticas. interfieren en el desarrollo de la raíz y en la absorción de agua y nutrientes.La lámina media de las células de plantas está constituida por pectinas y sustancias relacionadas. como resultado de esta actividad se presenta el aspecto húmedo y la pérdida de turgencia de los órganos atacados. Estas sustancias son las responsables directas de las alteraciones de los procesos fisiológicos del hospedante y que resultan en la manifestación de la enfermedad. se requieren de 150 a 200 células bacterianas. reducen la fotosíntesis..Son sustancias (proteínas) que catalizan las reacciones bioquímicas de las células vivas.3. Influyen en la germinación de las semillas. durante este proceso son producidas enzimas pectolíticas que degradan la lámina media y la pared celular de células colindantes que se destruyen. alteran los procesos de reproducción de las plantas.. 4. Las bacterias producen gran variedad de enzimas. pero si se introducen 100 células el tumor es mucho mayor. Para penetrar las paredes celulares y causar infección las bacterias producen enzimas. Aparentemente existen tipos específicos donde se une la bacteria con la planta. Pseudomonas y Erwinia) que actúan sobre las sustancias pécticas degradándolas. por ejemplo. en el transporte de agua y translocación de alimentos. sales y agua presentes en los espacios intercelulares. 20 . que se localizan en la pared celular (si los sitios específicos de reconocimiento llegaran a ser ocupados por cepas avirulentas de bacterias. destruyen el material de reserva y alteran la integridad estructural de los tejidos. esto ocasiona desintegración de tejidos que se manifiesta como pudrición blanda o acuosa. polisacáridos y sustancias hormonales.2. Existen especies de bacterias fitopatógenas (especies de Xanthomonas. plasmolizan y mueren sirviendo de alimento para las bacterias que así sucesivamente se siguen multiplicando. Las primeras células bacterianas que penetran a los tejidos se alimentan de azúcares. pero si el número es menor sólo se producen daños localizados. se forma un pequeño tumorcito. si se introduce una sola célula de Agrobacterium tumefaciens en una planta. por esta razón las bacterias fitopatógenas primero son intercelulares y después intracelulares. la actividad enzimática de las primeras es mucho mayor. La actividad enzimática está asociada con la patogenicidad de los microorganismos. toxinas. . C. P. E. Las enzimas producidas por microorganismos llegan a hidrolizar la celulosa ocasionando ruptura de la pared celular y muerte de la célula. stewartii. Las fitotoxinas bacterianas son compuestos de bajo peso molecular (aunque no siempre) que afectan adversamente el metabolismo y función de la planta. no son enzimas. Toxinas de hospedantes específicos. Enzimas amilolíticas o amilasas.2. además de que son componentes estructurales de las membranas de organelos celulares. La mayoría de las especies de Xanthomonas tiene capacidad de producir amilasas para desdoblar el almidón y así poderlo utilizar en sus funciones metabólicas. amylovora produce Amilovorina. amylovora. lo cual repercute en la muerte de células (pueden actuar directamente sobre el protoplasma o alterar el metabolismo del citoplasma o del núcleo). Algunas especies de bacterias que producen enzimas pectolíticas son: Erwinia carotovora. Al ser determinantes primarios de patogenicidad.las proteínas celulares son sustancias muy importantes puesto que catalizan todas las reacciones químicas que se llevan a cavo en todas las células vivas...son productos muy tóxicos secretados por organismos.En los marchitamientos vasculares inducidos por bacterias se presentan varios elementos responsables del taponamiento y degradación de los tejidos de conducción. Se ha comprobado que E. solanacearum. Enzimas celulolíticas o celulasas. proteasa que son las responsables de la degradación de proteínas y del mal olor de los órganos carnosos en descomposición. 21 . ni hormonas o ácido nucleico.3.Compuestos tóxicos sólo para el hospedante del patógeno que las produce.La celulosa es el principal componente y la base estructural de la pared celular de las plantas superiores. bloqueando sistemas enzimáticos o siendo antagónico a algunos metabolitos esenciales. Pseudomonas syringae. E.2. y algunas Erwinias y Xanthomonas llegan a producir este tipo de enzimas.. Enzimas proteolíticas o proteasas. Considerando el rango de hospedantes.Toxinas. ni afectan la integridad estructural de la pared celular. carotovora produce. Clavibacter michiganense y Xanthomonas campestris.. además de las enzimas ya mencionadas.El almidón es un polisacárido de reserva presente en algunos órganos vegetales. existen dos tipos de toxinas: las toxinas de hospedantes específicos y las toxinas de amplio rango de hospedantes o de hospedantes no específicos. E. 4. Se ha comprobado que P. la virulencia del patógeno varía de acuerdo a la capacidad que tiene para producir la toxina. ya sea hidrolizando proteínas. solanacearum. El patógeno produce la toxina en el hospedante susceptible y los síntomas inducidos por ésta son los característicos de la enfermedad.. En estos casos las enzimas pectolíticas ocasionan disociación de los tejidos de conducción o de las células que rodean estos tejidos y por lo tanto están íntimamente involucradas con este tipo de enfermedades. la cual al ser inyectada sólo llega a inducir marchitez y plasmólisis. michiganense. son móviles en la planta y activas en concentraciones muy bajas. michiganense. entre otras.3.Reguladores de crecimiento.. también se incluyen en este grupo los polialcoholes relacionados con la glucosa. amylovora produce un polisacárido que por si solo causa marchitamiento y plasmólisis de células del parénquima del xilema. 4.3.. Faseolotoxina producida por P. phaseolicola (halo clorótico). Otras especies que producen polisacáridos asociados con la patogenicidad son: Clavibacter sepedonicum (pudrición anular de la papa)..2. Estos polisacáridos aparentemente juegan un importante papel en la patogenicidad. syringae (cancro en órganos frutales y provoca tiro de munición aún sin estar presente la bacteria). son toxinas que se liberan de la célula bacteriana hasta que esta muere o es dañada. insidiosum (marchitez de ramas de alfalfa). inhibición del desarrollo o crecimiento de yemas. epinastia de hojas. Se dividen en exotoxinas. solanacearum (patógeno de marchitez o vaquita de la papa) encontradas por algunos investigadores. aunque induce algunos síntomas del síndrome total de la enfermedad. tabaci (halo clorótico).Los polisacáridos son sustancias complejas o combinaciones orgánicas del tipo de la glucosa y que por hidrólisis dan glucosas..Los reguladores de crecimiento (RC) son compuestos hormonales comunes que controlan el crecimiento de las plantas. E.Toxinas de hospedantes no específicos.3. Aparentemente los polisacáridos son supresores de los mecanismos de defensa del hospedante. defoliación. C. las giberalinas y las citocininas. Las toxinas de hospedantes no específicos pueden producir manchas cloróticas. Son determinantes secundarios de patogenicidad. C. 22 . Los microorganismos fitopatógenos pueden producir RC. Tagetitoxina producida por P. Siringomicina SR producida por P. los cuales no presentan polisacáridos extracelulares (cápsula) y son completamente avirulentas. son toxinas extracelulares o sea que son liberadas fuera de la pared celular de la bacteria. o sea que la toxina no influye en el establecimiento del patógeno. Los RC actúan a concentraciones muy bajas por lo que también variaciones pequeñas de concentración normal desencadenan anormalidades en el crecimiento de las plantas. y en endotoxinas. sustancias que inhiben o estimulan la producción de RC en la planta y sustancias que actúan de manera similar a los RC. aunque el etileno y los inhibidores de crecimiento también realizan importantes funciones de control durante el desarrollo de una planta.2. 4. P. por lo que no provocan la totalidad de los síntomas que el patógeno llega a inducir en el hospedante. Con esto los patógenos inducen desequilibrios en el sistema hormonal de las plantas produciéndose crecimientos anormales como achaparramiento. etc. X. arrocetado. deformación de tallos. amylovora (patógeno de tizón de fuego del peral y manzano) y de P. aunque en algunos hospedantes la bacteria no produce la toxina. aunque también ocasionan daños físicos al participar en el taponamiento de tejidos de conducción.4. phaseoli.Polisacáridos. tagetis (evita la formación de cloroplastos). Algunos ejemplos de este tipo de toxinas son: Tabtoxina producida por P. solanacearum. crecimiento excesivo. Las células bacterianas producen polisacáridos extracelulares que quedan libres o se acumulan alrededor de su pared formando su cápsula. algunas evidencias claras que respaldan lo anterior son ciertas cepas de E.Son compuestos tóxicos para el hospedante de la bacteria y para otras plantas no hospedantes de la bacteria.. halos cloróticos y marchitez. Los más importantes son las auxinas. de un órgano a otro. la epinastia y la maduración de los frutos. o a distancias mayores. La actividad de las citocininas aumenta en las células de la agalla de la corona y la fascinación o agalla foliar ocasionada por Clavibacter fascinas.. el agua de riego o lluvia. aumentan la respiración de los tejidos y promueven la síntesis de ARN mensajero y así la síntesis de enzimas y proteínas estructurales. B).Citocininas. Xanthomonas y Erwinia producen etileno. realmente la única forma de multiplicación de estos organismos es asexualmente por “fisión binaria” o “bipartición”.Son necesarias para la diferenciación y crecimiento celular. viento. sin embargo la velocidad de reproducción no es constante y con el paso del tiempo se va haciendo más lenta. Se ha comprobado que el contenido de etileno aumenta en plantas de plátano cuando son atacadas por P. La dispersión de las bacterias puede ser a distancias muy cortas.. Los 23 .DISEMINACIÓN.. 4. Agrobacterium tumefaciens (agalla de la corona de muchas plantas) provoca un estímulo conocido como principio de inducción al tumor (PIT) que transforma a las células vegetales normales en tumorales. solanacearum y esto se manifiesta en el amarillamiento prematuro de frutos. el hombre. Bajo condiciones favorables la multiplicación es muy rápida y las divisiones se realizan cada 20 minutos.5. en donde se desplazan por si solas con la ayuda de sus flagelos.Auxinas. aunque algunos los disminuyen. afectan la impermeabilidad de la membrana celular. lluvia. Especies de los géneros de Pseudomonas. 4. o del suelo a los órganos del vegetal con su efecto de salpique. Pseudomonas solanacearum induce el aumento del 100% de AIA en plantas atacadas por lo que se afecta la permeabilidad de las membranas celulares y por consiguiente se aumenta la transpiración y se presenta marchitamiento. Después se produce la pared celular y finalmente se separan dos células hijas. primero se presenta crecimiento de la membrana citoplasmática de las orillas hacia el centro para dividir el citoplasma en dos. Aunque en las bacterias se pueden dar procesos primitivos de reproducción sexual (conjugación e intercambio de material genético entre células). también acarrea bacterias de un área a otra a través del suelo. Lo anterior se presenta porque disminuye el alimento. entre otros. diferenciación celular. Durante el proceso de división de la célula... en muchas plantas se debe parte de una citosina.4.A). hasta que finalmente se detiene. brisa. Los microorganismos patógenos pueden aumentar los niveles de AIA.(Ácido indol acético – AIA-). las células tumorales tienen alta cantidad de AIA y citocininas producidas por ellas mismas y por las células bacterianas. para lo cual requieren la participación de otros agentes como el agua de riego..Actúan en la elongación celular. promueven la inhibición de la senescencia y dirigen el flujo de aminoácidos y otros nutrientes por toda la planta.. rocíos. se acumulan entre las colonias desechos de la actividad metabólica de las mismas células y porque se presentan otros factores limitantes. La lluvia distribuye las bacterias de una planta a otra.REPRODUCCIÓN. Entre los efectos del etileno en las plantas se incluye la abscisión de las hojas. insectos. la primer bacteria y por la pulga saltona del maíz (Chaetocnema pulicularia). chrysanthemi cuando hay daños mecánicos en frutos de piña. El viento arrastra polvo y en ocasiones restos de plantas los cuales pueden transportar células de bacterias fitopatógenas para así dispersarlas en una región. E. El hombre disemina todo tipo de patógenos a distancias variables y de muchas formas. ocasiona pudrición blanda. las dispersa en semillas. Se conocen 77 insectos que pueden transmitir bacterias. las hormigas son agentes importantes en la dispersión de esta bacteria. no están protegidas por una pared tan resistente como las de las esporas. como es el caso de la mosca Dacus oleae. amylovora incrementan su población en sus hospedantes. etc. mientras que en otros puede presentarse multiplicación del patógeno en su interior. Algunos solo las transportan externamente.6. stewartii son diseminadas por el escarabajo rayado de las cucurbitáceas (Acalyma vittata) y diabróticas (Diabrotica undecimpunctata). El suelo les proporciona protección y nutrientes cuando el hospedante está ausente.SUPERVIVENCIA. estacas. Las bacterias que infectan plantas perennes sobreviven en tiempos favorables en el interior de sus hospedantes. o en el interior de insectos. así es que sobreviven en los órganos afectados del vegetal o en forma libre o saprófitas. que transmite a P.insectos pueden llevar bacterias de unas plantas a otras incluso introducirlas en el vegetal. las bacterias dependen de los insectos para sobrevivir y diseminarse. yemas. otros lo hacen internamente. Aunque están cubiertas por la cápsula.. Las bacterias fitopatógenas. o cubiertas con un mucílago natural que las protege de factores adversos. amylovora se dispersa por las abejas que visitan las flores de las plantas enfermas. plántulas de viveros. 4. A las bacterias se les encuentra en una amplia variedad de sitios en la proximidad de sus hospedantes. Las bacterias fitopatógenas en las plantas hospedantes se desarrollan como parásitos y en el suelo sobreviven como saprófitos. en algunos casos. o incluso manifestarse cierta alteración del insecto. herramientas e implementos agrícolas. sin embargo la persistencia de las mismas en ellos depende de la velocidad a la que son descompuestos los rastrojos del cultivo en los que se encuentran. permanecen parte de su vida en la planta como parásitas y parte en el suelo o restos vegetales como saprófitas. tracheiphila y E. con la excepción de las especies de bacterias que atacan plantas perennes. disemina bacterias cuando manipula plantas enfermas y sanas. pero en el suelo disminuye con 24 . E. Otra forma de dispersión de las bacterias puede ser el polen. La mayoría de las bacterias fitopatógenas no producen estructuras de resistencia. sin embargo muchas especies reducen sus poblaciones cuando se encuentran en estas condiciones. savastanoi (agalla del olivo) la cual le induce tumores en el tracto digestivo y vagina. las transporta en tierra que arrastra en sus pies. la segunda. por lo tanto son sensibles a los rayos actínicos (luminosos) del sol y para sobrevivir necesitan encontrar un ambiente propicio que incluya alta humedad (cercana al 100%). tubérculos. El suelo sirve como reservorio de bacterias. nutrición adecuada y temperatura entre 24 a 30 °C. Algunas bacterias como E. Tambien E. solanacearum sobrevive en el suelo en la superficie externa de tubérculos y en semillas de tabaco. las bacterias están clasificadas en un nuevo reino. DESCRIPCIÓN DE LOS PRINCIPALES GÉNEROS DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS Y SUS ESPECIES DE IMPORTANCIA ECONÓMICA. Las Erwinias y Pseudomonas causantes de pudriciones blandas. Sin embargo en la actualidad. dentro de las plantas y en el suelo. fuscans en el suelo su población desaparece en cuatro semanas. pueden incrementar su población en el suelo. primero se clasifican por una combinación de características morfológicas y fisiológicas. La separación inicial de los taxones más altos se basa en la morfología y reacción a la Tinción de Gram. phaseoli var. utilizando de preferencia estos últimos. Otras. Las bacterias en general están clasificadas en 19 GRUPOS O PARTES. syringae pv. que es la Taxa más alta en la DIVISIÓN III (bacterias) del REINO PROKARIOTAE. que incluye a los organismos que carecen de membrana nucleoplásmica. en cambio inverna en el tracto digestivo de las hormigas que la diseminan. De Bergey (Bergey`s Manual of Determinative Bacteriology) aceptado por los especialistas en el ramo para la clasificación de las bacterias. chrysanthemi no llega a sobrevivir por fuera de los tejidos de su hospedante más de 14 días en condiciones tropicales. Los grupos en los que se incluye a los procariontes fitopatógenos conocidos. como A. el PROKARIOTAE (algunos le llaman MONERA). Algunas especies de Clavibacter pueden mantenerse vivas en semillas entre 8 a 24 años. tomato (peca bacteriana del tomate) puede sobrevivir en ambientes calientes y secos como residente de las hojas hasta que se presenta humedad y temperatura que le favorezcan. X. requerimiento de oxígeno y utilización de carbohidratos para el nivel Género. Las bacterias fitopatógenas están incluidas en los grupos 7. vesicatoria sobrevive en el suelo y en la semilla. que también incrementa su población en la planta hospedante.rapidez por que han perdido capacidad de sobrevivencia en el suelo. entonces la población bacteriana se multiplica y la infección se desarrolla. tumefaciens. carecen de diferenciación y existen muy pocos registros fósiles. al llegar al suelo. P. 25 . En las bacterias es difícil utilizar este criterio porque presentan un tamaño reducido. y 19. mientras que la clasificación a taxones más bajos involucra características fisiológicas y bioquímicas adicionales. 17. 8. La taxonomía de las bacterias se basa en datos morfológicos y fisiológicos. La taxonomía de los organismos se basa principalmente en las características morfológicas que presentan. dicha población también disminuye aunque en forma gradual y se ha determinado que llega a permanecer en el suelo hasta 40 años en ausencia de las plantas que sean hospedantes. E. que a su vez incluyen familias. En el pasado las bacterias se clasificaban como plantas debido a que coinciden en algunos caracteres como el requerimiento de alimento en forma soluble y a la presencia de pared celular. con mayor énfasis en morfología. X. V. P. Bacilos Gram positivo que producen endosporas. Actinomycetes y organismos relacionados. habitantes vasculares. No han sido clasificadas las bacterias fastidiosas.Parte 7. 26 . Lista de nombres de las especies de bacterias que se han aprobado y fueron publicadas en 1980 en la octava edición del manual de De Bergey. Bacilos anaerobias facultativas. Los micoplasmas (fitoplasmas) y géneros de afiliación incierta y organismos semejantes a micoplasmas (Spiroplasma). Familia Pseudomonadaceae Género Pseudomonas y Xanthomonas Familia Rhizobiaceae Género Rhizobium y Agrobacterium Parte 8. Streptomyces) Parte 19. Gram negativo Familia Enterobacteriaceae Género Erwinia Parte 15. Bacilos y cocos aerobios. como la enfermedad de Pierce y la bacteria falsa del duraznero. Familia Género Bacillus Parte 17. Gram positivo. Grupo Coryneforme de bacterias (Clavibacter. Gram negativo. carotovora subs atroseptica. aunque muchos patovares son especies legítimas.LISTA APROBADA DE BACTERIAS FITOPATÓGENAS GRUPO Gram negativo.Incluye muchos patovares previamente reconocidos como especies. campestris. rubrifaciens. ilicis. rhizogenes. stewartii. milletiae. michiganense. viridiflava albilineans. vaccinii citri Xanthomonas Agrobacterium Erwinia Gram negativo. betae. viridiflava (Burkholder) Dowson. tolaasii. P. cissicola. avenae. tracheiphila. rubrisubalbicans. fascinas. scabies. caricapapaya. chrysantemi. cypripedii. rubi. b. salicis.. cichorii. flaccumaciens. beticola. tumefaciens amylovora. carotovora subs. varillas y cocos FAMILIA Pseudomonadaceae GÉNERO Pseudomonas ESPECIES agarici. La mencionada lista contiene solo tres especies fitopatogénicas de Pseudomonas fluorescentes. cichorii (Swingle) Stapp y P. oortii. poinsettiae. syringae. 27 . nimipressuralis. dissolvens. syringae. carotovora. rubrilineans. mallotivora. actinopmycetes y organismos relacionados Ninguna Clavibacter Micoplasmas y géneros de afiliación incierta Streptomycetaceae Nocardiaceae Streptomyces Nocardia Spiroplasma a.. marginales. cityrulli. rhaponctici. syringae Van Hall. nebraskense. axonopodis. solanacearum. carnegieana. andropogonis. designación intra específica que no requiere fundamentos de soporte. fragaria. quercina. caryophylli. pseudoalcaligenes subs. herbicola. ampelina. varillas anaeróbicas facultativas Enterobactereaceae Gram positivo. Las otras Pseudomonas que aparecían en la séptima edición del manual de Bergey. nigrifluens. gladioli. sepedonicum. ipomeae. P. insidiosum. Todas las otras especies no están incluidas debido a descripciones inadecuadas. ananas.Streptomyces scabies esta listado como “especies incertae sedis” (especies no reconocidas) La mayoria de las especies de Xanthomonas y Pseudomonas se degradó a patovares (pv). están invalidadas debido a la carencia de fundamentos y se consideran patovares de P. cancerogena. glumae. uredovora. La temperatura para el crecimiento óptimo es de 27 a 30 °C.Comprende a las especies de Erwinia con intensa actividad pectolítica en plantas.1.GÉNERO Erwinia Las especies del género Erwinia en plantas inducen amplio rango de síntomas. ananas pv. ananas E. Los miembros del género Erwinia son varillas rectas de 0. oxidasa negativo y catalasa positivo. herbicola pv.. cancros. muerte regresiva. amarillas o crema blanquecino.atroseptica E. glucosa y sucrosa.0 x 1. manchas foliares. y el máximo está entre 32 a arriba de 40 °C. no forman enzimas pectolíticas ni pigmentos amarillos. nigrifluens 28 . cypripedii E.0 a 3. salisis E. se les encuentra como células simples. E.5 a 1. como son: marchitamientos.Son bacterias sistemáticas que pueden causar marchitamiento y necrosis seca de plantas. aunque el crecimiento anaeróbico en algunas especies es débil. tizones. carotovora pv. ananas py. en pares u ocasionalmente en cadenas cortas. carnegieana E. Son fermentativas. con excepción de E. dissolvens E.Producen un pigmento amarillo insoluble en agua y son patógenos oportunistas de plantas.. rhapontici E: mallotivora E. Las Erwinias fitopatógenas se acomodan en tres grupos: Grupo “HERBÍCOLA”. mótiles (con flagelación perítrica. pudriciones blandas y decoloración de tejidos de conducción. chrysanthemi Grupo “AMYLOVORA”.. E. carotovora E. cancerogena E. stewartii que es átrica) y anaerobias facultativas. producen ácido de fructuosa.0 micras. manchas de frutos. son Gram negativo (-). pulsifaciens E.. uredovora E. amylovora E. herbicola pv. galactosa.GÉNEROS DE BACTERIAS RELACIONADAS CON LAS PLANTAS 5. stewartii Grupo “CAROTOVORA”. Sus colonias son cremosas. tracheiphila E. milletiae E. E. carotovora pv. herbicola E. quercina E. animales u hombre o son epífitos no fitopatógenos. La taxonomía y nomenclatura de especies de este género se ha complicado por la heterogeneidad de la población incluida en el taxón. aeruginosa P. tizones. coronofaciens P. toloasii P. glycinea P. fluorescens P.5 a 4. Gram negativo y presentan uno o más flagelos polares (monótricas. Las células del género Pseudomonas son varillas rectas o curvas que miden 0.2.GÉNERO Pseudomonas Herbicola + + Amylovora - Carotovora + + - Las especies de este grupo ocasionan enfermedades que se manifiestan con síntomas como marchitamiento. putida P. tabaci P. tabaci y P. y lofótricas en su mayoría). oxidativas. savastanoi + ++* + + + *Excepto P. marginales P.5 a 1. morsorunorum P. Son aerobias. viridiflava P. mori P. estriados y manchas foliares. agarici P.1. de Arginina T= Hipersen.. El número de especies de Pseudomonas fitopatógenas que anteriormente se manejaban (100) fueron reducidas a 23. lachrymans P.0 micras. En Tabaco 29 . glycinea L= Levana O= Oxidasa P= Pudrición en Papa A= D. carica papaya P..0 x 1. tomato P.Carácter / Grupo Pigmento amarillo soluble en agua Licuefacción de pectatos (enzimas pécticas) Ácido de lactosa Cuerpos biconvexos Simplasmata (agrupaciones en forma de salchicha) 5.Pseudomonas fluorescentes (a su vez se dividen en dos grupos) Fluorescentes Syringae Fluorescentes P. pudriciones. cichorii Syringae P. syringae P. phaseolicola P. Las especies de Pseudomonas se dividen en dos grupos: Pseudomonas fluorescentes (Stutzeri) Pseudomonas no fluorescentes 5.2. cancros y agallas. la cepa es virulenta. Raza 5. solanacearum* P. Si toda la colonia se observa rojiza. caryophylli P. gladioli P.ataca papa.5. Causa marchitez de plantas y según su hospedante se clasifica en: Raza 1. maniotis –colonias blancas-) insoluble en agua. pero algunos autores tampoco la incluyen en las no fluorescentes y la consideran como un grupo especial.. a veces tomate. Raza 2.. 30 . Raza 4. Las Xanthomonas son de forma de varilla. chile. Raza 3.GÉNERO Xanthomonas La mayoría de las especies de Xanthomonas son patógenas de plantas. cattleyae * Pseudomonas solanacearum no fluorescentes. No produce pudrición en papa. En la especie X. causa marchitez. Gram negativo.. woodsii P. cánceres y tizones.. 5. A veces las Erwinias se comportan igual. marchitamiento. corrugata P. cissicola P.. cacahuate y tabaco.3.ataca mora.2. la cepa es avirulenta. Actualmente se tienen cinco especies válidas que causan diferentes enfermedades cuyos síntomas son: estrías y manchas foliares. mótiles con un flagelo polar simple (tres a cinco veces más largo que la célula bacteriana). cepacia P. andropogonis P. Las dos últimas se han encontrado recientemente en China y no se conoce gran cosa de ellas. Produce poli-beta-hidrolibutirato. campestris se han acomodado 123 patovares. pseudoalcaligenes P.. en medio Kelman (CPG + cloruro de tretrazolio) las colonias pueden tener diferente coloración.ataca hierba de pollo. Causan pudriciones. tomate. usualmente son de hospedantes específicos y muchas crecen lentamente en los medios artificiales. P. producen un pigmento amarillo (excepto X.ataca a papa.ataca plátano. son oxidativas. rubrilineans P. nunca fermentativas. nunca marchitez. produce un polisacárido chicloso extracelular en medios a partir de glucosa. avenae (alvoprecipitans) P.Pseudomonas no fluorescentes.. es sistémica. amygdali P. Las colonias al crecer forman como un desplazamiento. pudrición blanda. la bacteria al atacar el tetrazodio produce farzán (pigmento rojizo). manchas foliares. si la coloración rojiza es en forma de caracol.2. pero no todas oxidasa positivo. nebraskense C. ampelina X.GÉNERO Agrobacterium Este género de bacterias tiene muy pocas especies fitopatógenas. Las especies de Clavibacter son: C. crema oscuro o color rosado.) el resto de las 200 especies X. fascians C.4. flaccumfaciens C. ilicis C. flaccumfaciens subsp. michiganense C. sepedonicum C. iranicum C. oxidativas. el pigmento es muy específico – en análisis espectroscópicos como lo son los polisacáridos producidos por otras bacterias. Normalmente a cada especie se le encuentra asociada con un solo tipo de hospedante. En esta se incluyen como patovares (pv. principalmente en plantas por las especies patógenas de Agrobacterium. Los síntomas que llegan a inducir son marchitamiento.Las especies de Xanthomonas son: X. Algunas especies de este género causan diversas enfermedades en las plantas cultivadas y pueden ser de mucha importancia económica.GÉNERO Clavibacter Fue creado en 1896 para poder acomodar al bacilo de la difteria. Su morfología es muy curiosa ya que en un mismo cultivo se pueden encontrar diversas formas como varillas irregulares que incluyen formas rectas. poinsettia C. poca y lenta producción de ácidos en medios con carbohidratos.. rathayi C.. normalmente son inmóviles aunque algunas especies son móviles con uno o dos flagelos polares. todas hidrolizan gelatina. albilineans Para diferenciar a los cinco grupos (octavo manual de Bergey). manchas de frutos y fasciación. Las colonias pueden ser desde amarillo. flaccumfaciens subsp. tritici C. de crecimiento lento. michiganense subsp. cocos “V” o en empalizada /////.0 micras. fascians es la única que produce fasciación (muchas hojitas se aglomeran produciendo una especie de agalla en la raíz “crece superficialmente”). insidiosum C. triangulares y en forma de mazo. induce proliferación anormal de células (hiperplasia) que 31 . xyli La especie C. aunque algunas infecciones llegan a ser de mucha importancia.7 a 1. Son Gram positivo. michiganense subsp. campestris. pudrición. todas son catalasa positivo. michiganense subsp. fragariae X. son bacterias aeróbicas. curvas. 5. betae C. axonopodis X. En el octavo manual de Bergey se le denomina corineformes.5 x 0.5. 5. fascians subsp. michiganense subsp. Las dimensiones de los bastones rectos son de 0.4 a 0. cánceres. Los miembros de este grupo son aerobias obligadas. tumefaciens produce la agalla de la corona de muchas plantas leñosas. vid. En medios que contienen carbohidratos. mango. S.. En medio artificial producen un tipo de micelio muy fino (el grosor es menor al de una célula bacteriana).0 micras y son mótiles con 1 a 6 flagelos perítricos (cuando tienen uno solo éste es más lateral que polar). radiobacter (saprófito) A. pero sin efectos perceptibles. megaterium y B. De A. cereus se han encontrado en óvulos. circullans se ha encontrado que induce una enfermedad de plántulas de cultivo de tejidos de palma datilera. rubi). producen gran cantidad de polisacáridos extracelulares mucilaginosos. S.GÉNERO Bacillus Aunque normalmente no se reconocen como patógenos de plantas. A.resultan en formación de tumores o en producción excesiva de raíces adventicias. el micelio aéreo es gris cenizo y con ramificaciones monopódicas con cadenas de esporas en espiral. tumefaciens (tumores o agallas) A. roña superficial de tubérculos y otras partes subterráneas de la papa. aguacate.6 a 1. frambuesa (en zarzamora y frambuesa puede causar agalla de tallo y a la especie algunos la llaman A.7. tumuli S. rubi. B. ipomoeae 5. cerealis induce la mancha blanca del arroz y B. principalmente durazno. rhizogenes (raíces secundarias) A. únicamente daña el aspecto (calidad). La literatura dice que es igual a tumefaciens. B. setoii S. intermedius S. tumefaciens se conocen tres biotipos: el primero puede atacar vid y frutales de hueso. de crecimiento lento. tienen forma de varilla y miden de 0. semillas y tubérculos de papa. zarzamora. Las colonias son blancas.5 a 3.. scabies. Gram negativo. Las especies reconocidas de Agrobacterium son: A.0 x 1. aunque tales infecciones no se han reportado que causen pérdidas económicas. como que se enriza por lo que es difícil de levantar. sauce. viridogenes 32 .6. 5. S. La colonia crece hacia abajo. megaterium pv. el segundo se le encuentra en frutales de hueso y el tercero afecta vid. se ha descubierto que algunas especies inducen enfermedades en vegetales. lisas y mucosas. Usualmente son habitantes del suelo y rizósfera.GÉNERO Streptomyces Son Gram positivo. Agalla en frambuesa. cratirefer S. que anteriormente se creían causadas por virus. facultativas.8. raramente cilíndricas. Células hinchadas. se introducen entre la pared celular y la membrana celular. Esporas esféricas. 5. Mótiles (con un flagelo polar). Los bacillus se dividen en tres grupos: Grupo I. Esporas ovales.1... donde crecen para posteriormente pasar al protoplasma. Su forma varía de cocoide a ligeramente ovoide a filamentosa. Desde 1967 a la fecha se ha demostrado que 75 enfermedades de las plantas. sus células son pequeñas. subterminales o terminales. Son aerobias. subterminales o terminales. Los micoplasmas son organismos unicelulares procarióticos que carecen de pared celular. Célula con espora ligeramente hinchada o no hinchada del todo. Éste requiere esterol para su crecimiento y es sensitivo a digitonina. Se les encuentra en la savia de algunos cuantos tubos cribosos del floema. no producen esporas y son Gram negativos. Son problema en almacén. en rebanadas de papa crecen hacia arriba y las colonias son arrugadas. Mycoplasmatales.9. No tienen flagelos.Organismos semejantes a Micoplasmas (Clase Mollicutes).Son Gram positivo o Gram variable y en los últimos años se ha comprobado que hay Gram negativo.. son resistentes a la Penicilina. perítricas. Cloranfenicol y algunos a Eritromicina. Miden de 175 a 200 nanómetros de diámetro durante su reproducción. oxidativas. ribosomas y cordones de material nuclear. centrales. Esporas ovales o cilíndricas. Son Gram negativo. Micoplasma. Grupo III. a veces ultramicroscópicas y tienen citoplasma.Bdellovibrio bacteriovorus Devora bacterias. producen una endospora en la célula y producen una gran cantidad de antibióticos. Se pueden reproducir por gemación y por fisión binaria. subterminales o terminales.MICROORGANISMOS AFINES A BACTERIAS. fulgóridos y posiblemente áfidos y ácaros. Son más pequeñas que las otras bacterias. pero sensibles a Tetraciclina.9. pero que difieren de éstos en que no se han podido cultivar en medios artificiales. periquitos. Son transmitidos por chicharritas. son producidas por microorganismos con características morfológicas semejantes a los micoplasmas. Grupo II. aunque algunos también por otros insectos como Psílidos. Acholeplasmataceae y Spiroplasmataceae. Célula notablemente hinchada. 5. que se divide en tres familias: Mycoplasmataceae. La familia Mycoplasmataceae tiene un solo género. La clase Mollicutes tiene un orden. pudren tejidos. 33 . 5. enverdecimiento de los cítricos y el chamusco foliar del almendro. los espiroplasmas se pueden cultivar en medios nutritivos y dan colonias pequeñas (0. Son resistentes a penicilina y se inhiben con eritromicina. No requiere esterol para su crecimiento y es resistente a la digitonina. Algunas enfermedades causadas por Micoplasmas y Spiroplasma son: amarillamiento del áster que ataca a muchas hortalizas.9. psílidos. Las rickettsias son organismos procarióticos. enfermedad persistente de los cítricos (S.0 micras. Spiroplasma. 5. mientras que otros se limitan a los elementos cribosos del floema. Son sensibles a los tratamientos con calor y tetraciclinas. Acholeplasma. ausencia de flagelos. falta de crecimiento y otros desórdenes de proliferación. Son importantes patógenos responsables de declinación. Requieren de esterol para desarrollarse. espiroplasmas y rickettsias casi no se les ha dado atención. Desde 1972 se han observado algunas plantas con ciertas anormalidades y que en su interior se localizan organismos que se asemejan a rickettsias en la forma. los filamentos helicoidales son móviles. enfermedad X del duraznero.2 a 0. con pared celular normalmente ondulada.La familia Acholeplasmataceae también tiene un solo género..2. aunque carecen de flagelos.Organismos semejantes a Rickettsias. Pocos se han cultivado y su identidad se ha basado en la especialidad del vector. crecimiento intracelular y en la incapacidad de crecer en medios nutritivos artificiales. Algunos se localizan en los vasos xilémicos del hospedante. enfermedad falsa del duraznero. Se desarrollan mejor a 32 y 35 °C. Son pleomórficos o tienen forma de cocos o bacilo. plantas de ornato y malas hierbas. A los micoplasmas.2 mm) de forma de huevo frito. Algunas enfermedades en donde se involucran a estos patógenos son: Pierce de la vid. decaimiento del peral. Son Gram positivo o Gram variable. Gram negativos y se multiplican solo en el interior de las células hospedantes. enanismo de la soca de la caña de azúcar. clorhidrato de tetraciclina u oxitetraciclina. Tienen un tamaño que va de 0.8 a 2. A diferencia de los grupos anteriores. tetraciclina. A estos organismos se les localiza en los tejidos del floema y xilema y se transmiten por chicharritas. y achaparramiento del maíz (espiroplasma). citri). También la familia Spiroplasmataceae tiene un solo género. parásitos intracelulares obligados de células de organismos superiores. rango de hospedantes y síntomas en el hospedante. hasta filamentos helicoidales ramificados que miden de 120 nm x 2 a 4 micras. sin flagelos. aunque algunas llegan a alcanzar hasta 4. Estos organismos tienen como vectores a las chicharritas. posesión de una pared generalmente ondulada. tamaño. neomicina y anfotericina. se desplazan mediante ondulaciones lentas del filamento. con diámetro de 100 a 250 nanómetros o más. 34 .0 micras de longitud poco antes de dividirse. enfermedades del tipo amarillamiento. enanismo de la alfalfa. Los síntomas disminuyen cuando las plantas dañadas se tratan con penicilina. amarillamiento letal del cocotero. virescencias. Los espiroplasmas son células pleomórficas de forma esférica a ligeramente ovoide. necrosis del floema del olmo. injerto y cúscuta. .................................................................1............... 3.......................... IMPORTANCIA DE LOS VIRUS. TRANSLOCACIÓN ... INTRODUCCIÓN.................... 4...................................................................................................................................................ÍNDICE UNIDAD I............................. PENETRACIÓN ........ 3............... TRANSMISIÓN DE VIRUS ................................. 3....... TRIPS ..................................... III 1.............................................1...................................................................................................... IV 1.......................................... NEMÁTODOS .............................................................. RELACIONES VIRUS – PLANTA ....................... INFECCIÓN Y SÍNTESIS VIRAL ..................... 2............... COMPROBAR LA NATURALEZA INFECCIOSA DE LA ENFERMEDAD.....2.....................................................1............................................. SÍNTOMAS CAUSADOS POR VIRUS FITOPATÓGENOS ................... PROPIEDADES FÍSICAS DEL VIRUS ..... 1......3................................................................... 6............... 2..............................................................1 3............... HONGOS ....... 3...........4 3......... 4......................................................... CHICHARRITAS ................... 3...... MECANISMOS DE TRANSMISIÓN……………………………….................................................................... TRANSMISIÓN POR INJERTO....................................................2 3.....1........5 3........ 2.......................................... FORMA Y ESTRUCTURA QUÍMICA VIRAL ............. BIOTRANSMISORES .......................... 3.............3 3................................ INSECTOS ........... II 1.... ASPECTOS GENERALES DE LOS VIRUS............................................ IDENTIFICACIÓN DE VIRUS .... 3........ PAG 1 1 1 2 3 6 6 7 7 7 7 9 10 10 10 11 11 12 12 14 14 14 15 16 16 17 17 17 18 18 35 ..................................................... DETERMINAR TAMAÑO Y FORMA DE LA PARTICULA ........... AFIDOS ........................................................................... 2.. ASPECTOS GENERALES .........1............................................ TRANSMISIÓN MECANICA ....................................... MOSCA BLANCA (MB)......... 5............ 4................................................................................ ÁCAROS ................................ TRANSMISIÓN POR SEMILLA ......................... RANGO DE HOSPEDANTES.. 3..........................1.................4... COLEÓPTEROS ........... ...............4............................... ELIMINACIÓN DE EVASIÓN DE FUENTES DE INÓCULO ............................................................................. CONCEPTOS Y PRINCIPIOS GENERALES .. 3.................................. 3............ EVITAR TRASLAPE DE CULTIVOS ..... 18 19 19 20 20 22 22 23 25 25 26 26 26 26 27 27 27 27 28 2......................................................... 5.............3................................................................................... VARIACIÓN PATOGÉNICA DE LOS VIRUS .............. 8........................................... 3..........3................................... UNIDAD 1FUENTES DE RESISTENCIA ......... 28 29 29 29 29 29 30 30 30 31 31 31 5........... 1.....7....................... 5................ ELISA ..............................5........................1........... 5...... NOMENCLATURA ........ CONTROL FÍSICO ............ 5..................... 1.......... SELECCIÓN DE LA ÉPOCA DE SIEMBRA ..6.............. 1.................. 7....................... 3............ BASES DE LA SEROLOGÍA ............. CONTROL QUÍMICO DE VECTORES ...... 7................1.... RESISTENCIA ......................... HIGIENE DEL CULTIVO ... ÁRBOLES DE VIVEROS SANOS .......................... V CONTROL DE ENFERMEDADES VIRALES ......... REACCIONES SEROLÓGICAS .............2............ 7............. CUBIERTAS DE PLÁSTICO ..........2....... ASPECTOS GENERALES DE LOS VIRUS 36 ........... ACEITES ......................................................... 8........................ 7...................................................3............................................................................ 1............... 3..........................................4.................... SEROLOGÍA ........3............................. 1.............................2. 4................................................. CLASIFICACIÓN .....................................................4......8..........2. 1. USO DE SEMILLA SANA ... PROTECCIÓN CRUZADA .......................................................... SUPERFICIES REFLEJANTES ............. FRANJAS AMARILLAS ................................................................................ NOMENCLATURA Y CLASIFICACIÓN ................ 8.....................................1.....................2...................7......... 1. 3.....................................................1...................... ............................. 3................. 1.............. BARRERAS BIOLÓGICAS ..........4......... TERMOTERAPIA ... TIPOS DE RESISTENCIA..... PRODUCCIÓN DE ANTISUEROS ........... SANEAMIENTO .....................................5.......................6..... SELECCIÓN DEL SITIO DE SIEMBRA .................................................................................. ASPECTOS GENERALES DE LOS VIRUS 1. La palabra virus es de origen latino y significa pus o veneno. Causan enfermedades en el hombre (sida. 3. gripe y hepatitis viral. Los daños no son únicamente 37 . A consecuencia de lo anterior el metabolismo de las células vegetales se altera a tal grado que las plantas se enferman. Causan enfermedades de plantas. micovirus) por lo que contribuyen al equilibrio microbiano de la naturaleza. que pueden variar desde simples cambios de color hasta necrosis severa o muerte súbita de la planta. Los virus son partículas compuestas por ácido nucleico (AN) y proteína. etc). Se han caracterizado más de 1000 virus...Unidad 1. En otros el efecto es casi imperceptible como en el caso de los hospedantes asintomáticos. pero se propagan al obligar a la célula vegetal a que los multiplique utilizando su propia energía y maquinaria biosintética. 2. Los virus son agentes infecciosos causantes de enfermedades de diversos organismos vivos. rabia. son parásitos obligados que solo se multiplican en el interior de las células del hospedante.IMPORTANCIA DE LOS VIRUS. 2. La virología es una ciencia microbiológica que estudia a los virus. animales domésticos y silvestres. de tamaño submicroscópico. de los cuales más de 500 son patógenos de plantas. Los virus son importantes porque: 1. En cambio desvían el metabolismo y se generan substancias extrañas y se alteran diversas funciones vitales que inducen el desarrollo de síntomas. Los virus no matan a las plantas directamente mediante toxinas ni enzimas. Al alterar el funcionamiento normal de la planta llegan a provocar pérdidas hasta de 100%.INTRODUCCIÓN. Afectan a otros microorganismos (bacteriófagos. cáncer. poliomielitis. Los virus no son células ni están constituidos por ellas. Virus Y de la papa (VYP) 3. Prácticamente cualquier planta puede ser atacada por virus y es común encontrar a mas de dos virus afectando al mismo tiempo a la misma planta. etc. El ácido nucleico (ARN en la mayoría de los virus. puede atacar más de 300 especies de plantas herbáceas y leñosas distribuidas en 50 géneros. Virus Mosaico del Tabaco (VMT) 2. Además de estar entre los patógenos mas pequeños.en la cantidad sino en la calidad de la producción. 38 . 3. trampas amarillas. A diferencia de otros patógenos de las plantas. Varilla rígida. cubiertas por una cápsula de proteína. FORMA Y ESTRUCTURA DE LA PARTÍCULA VIRAL. cubiertas de agribón. Tanto el ADN como el ARN pueden ser de cadena simple o de doble cadena. Bacilo. los virus no están constituidos por células. Algunos como el virus Mosaico del Tabaco tiene un rango de hospedantes muy amplio. A consecuencia de las enfermedades virales (o virosis) se derivan también una serie de gastos adicionales para lograr el control: aplicaciones de insecticidas contra vectores. Varilla flexible. están formados por una cadena simple o doble de ARN o ADN. Isométrica (poliédrica). Mediante el microscopio electrónico de transmisión se ha determinando que los virus presentan las siguientes formas: 1. por ejemplo frutos deformes y manchados pierden valor comercial. Virus Mosaico del Pepino (VMP) 4. los virus también se constituyen uno de los grupos mas simples. ADN en los geminivirus y caulimovirus) porta la información genética necesaria para la replicación del virus. Están formados por partículas (solo visibles al microscopio electrónico de transmisión) que miden menos de 2000 nanómetros (nm +). Virus Amarillamiento Necrótico de la Lechuga (VANL) El ácido nucleico (genoma) es responsable de la infección y la cubierta de proteína le sirve de protección y también funciona en el reconocimiento del hospedante. varía según el virus. también contienen agua. dependiendo de la variante del propio virus. SÍNTOMAS CAUSADOS POR VIRUS FITOPATÓGENOS Sin negar la importancia de los síntomas para identificar enfermedades virales. El ácido nucleico se ubica en la parte central de la partícula. Lo anterior se debe a que: - Síntomas similares pueden ser producidos por diferentes virus. El mismo virus puede producir un amplio rango de síntomas.000 001 mm. los de varilla rígida miden 114-215 nm de largos por23 nm de ancho. En el caso de virus de varilla el ARN esta organizado como una hélice larga. las partículas de los isométricos contienen entre 15-45% de ácido.001 micras 4.La cápsula protéica (cápside) esta compuesta por subunidades (CAPSÓMEROS). 39 . que puede alcanzar hasta 50% del peso del virus. - Otros patógenos o factores abióticos también producen síntomas similares. mientras que los de varilla contienen aproximadamente 5%. El tamaño de los virus isométricos varía de 17-70 nanómetros (nm1) de diámetro. las dimensiones de los virus de varilla flexible alcanzan hasta 2000 nm de longitud por 10 nm de ancho. A la partícula completa (ácido mas proteína se le denomina virión. La cantidad relativa de AN y proteína. es con frecuencia de baja precisión.000 000 001 m. Los síntomas son útiles para el diagnóstico preliminar y solo en el caso de enfermedades muy conocidas se puede afirmar con total certeza que el agente causal de tal o cual enfermedad es determinado virus. o 0. del ambiente y genotipo del hospedante. o 0. poliaminas y enzimas. + Un nanómetro (=1 milimicra) = 0. Además de la proteína y del AN algunos virus contienen otros constituyentes químicos tales como algunos cationes. los baciliformes alcanzan 300 nm de longitud x 95 nm de ancho. el diagnóstico de estas en base a los síntomas. A veces hay tonalidades bronceadas (bronceamiento).1. semejantes a las melaninas. Nervaduras translúcidas. En general los síntomas inducidos por virus se pueden agrupar en tres grandes categorías: cambios de coloración. Miden mm. malformaciones y síntomas diversos. Nervaduras de color amarillo o verde pálido. Áreas irregulares de color verde pálido. Estrías. Tejidos de color blanco. Amarillamiento. Obscurecimiento. Áreas decoloradas mas o menos redondeadas.1. Cambios en la coloración. Manchas anulares. flores. 4. con el borde difuso. Debido a la síntesis de color café oscuro. 40 . Puede suceder simplemente que la infección esté latente. Albinismo (bleaching). Se observan en hojas. Aclaramiento de nervaduras. Lesiones locales. Lesiones alargadas. Debido a la formación anormal de antocianinas.1. el límite entre estas dos tonalidades generalmente está determinado por las nervaduras. paralelas a lo largo de las nervaduras (gramíneas). 4. Clorosis. Áreas cloróticas o necróticas de forma variable. frutos y raíces. que presentan patrones de líneas en forma de anillos o huella digital. Pueden ser necróticas. Las células se colapsan y se tornan de color oscuro. alternadas con zonas de amarillentas o cloróticas. Enrojecimiento. Hojas.- La falta de síntomas no necesariamente significa que la planta no esté infectada. Necrosis. Moteado. Mosaico. El color verde se debilita progresivamente. Clorosis y aparecen pigmentos amarillos. Manchas redondeadas o de borde irregular. con el borde bien definido Amarillamiento de nervaduras. 4.2. Todas o solo parte del follaje. (Intensificación. manchas angulares.1.Necrosis de nervaduras. debilitamiento o cambio de pigmentos). Reducción de tamaño. Frutos.3. Curvamiento del ángulo del pecíolo de las hojas hacia abajo "Angostamiento". 4. 4. Cambios de color.2. Reducción en la superficie de la lámina de la hoja. Se observan en hojas. Parte o toda la lámina foliar. resultando en el curvamiento de las hojas hacia el dorso. 41 . de las nervaduras. Enverdecimiento general de los pétalos. Puede haber moteado. Engrosamiento. 4. Pecas. Epinastia. Todo el fruto puede cambiar de tamaño y color.2. Hojas. "Breaking". frutos y raíces.1. Virescencia. Distorsión. Flores. Raíces. 4. flores. rizamientos. Hay encurvamientos. Necrosis por muerte del sistema vascular. estrías o sectores de colores anormales en los pétalos (variegado). Enaciones. 4.1. Puede haber necrosis. las venas permanecen casi normales. Malformación. Crecimiento de la lámina foliar hacia la superficie adaxial de la lamina de la hoja.1. Flores.4.2. 4.3. Frutos desabridos. Partes de la flor se desarrollan con apariencia de hojas.5. Varios tipos de distorsión. Flacidez de parte del follaje o de toda la planta.2. Secreciones anormales.2. Frutos. Fillodia. Tumores Semillas abortivas.2. 4. Marchitez. Alteración en la cantidad de flores Floración prematura o retardada Sabor anormal de frutos.3. Raíces. Caída prematura de las hojas o súbito desprendimiento de estas. Deformación o agallas 4. 4.2.4. Defoliación. Decaimiento y muerte regresiva Tumores. Distorsión Acortamiento de entrenudos. Otros síntomas. Deformación y forma irregular. Gomosis Concavidades en la madera 42 . Tallos. Lo anterior no significa que cada vez que detectemos síntomas presuntamente virales. Los injertos no prenden o no desarrollan 4. es decir. sobre todo para los técnicos no familiarizados con las enfermedades comunes en un cultivo en una región determinada. Aún el especialista debe ser humilde antes de poder afirmar que un virus particular está involucrado en determinada enfermedad. que no se transmiten mediante injerto. Agentes infecciosos también pueden causar síntomas similares a los ya descritos: por ejemplo el tizón tardío llega a ser confundido con el virus de la marchites manchada. Por ejemplo en el caso de geminivirus en tomate. los diagnósticos de campo pueden ser relativamente precisos. los síntomas mas notables son de enchinamiento y reducción en el crecimiento. Factores causantes de síntomas semejantes a los inducidos por los virus - Anormalidades genéticas Deficiencias nutrimentales Daño por herbicidas Daño por insectos o ácaros Daño por poluantes o pesticidas Otros fitopatógenos Los síntomas causados por estos últimos agentes no son de naturaleza infecciosa. Dependiendo de la experiencia del investigador y de los antecedentes del problema. su presencia en la región está relacionada con 43 . se tendrá que acudir a un experto. por productores y técnicos inexpertos. El patrón de dispersión de la enfermedad puede dar indicios del virus o grupo de virus que se trate. El uso de los síntomas para la diagnosis de campo es una guía valiosa pero imprecisa. al paso de los días la recuperación puede ser común. Además.Engrosamiento de yemas Incompatibilidad en el injerto.4. requieren del albergue en tejido vivo. El apoyo del laboratorio puede ser indispensable para determinar con certeza a los patógenos involucrados. ya que puede sobrevivir en restos de tejidos infectados que quedan en el campo después de la cosecha. Unidad 2. Transmisión mecánica. es pasiva y se da mediante los siguientes mecanismos: 1. para poder sobrevivir en cualquier región. ni salen de estas por sus propios medios. tampoco podemos negar que posiblemente haya plantas infectadas por otros virus. solo se puede afirmar que tenemos problemas de virosis. especialmente si hay maleza cercana en los drenes. La dispersión no es activa. ya sea en estado de reposo o de multiplicación activa. El Virus Mosaico del Tabaco (VMT) constituye una de las pocas excepciones. sobre todo cuando se presentan síntomas que antes no se habían observado en el cultivo en la región. TRANSMISIÓN DE VIRUS Dada su condición como parásitos obligados los virus no se pueden desarrollar en materia orgánica muerta.las poblaciones de mosca blanca y generalmente al inicio de las epidemias se aprecia un gradiente en dónde las plantas de las orillas son las primeras en ser infectadas. de tal manera que estos materiales sirven como fuente de inóculo primario en el siguiente ciclo. En base a lo anterior en sentido estricto. 44 . cuyos síntomas coinciden con los descritos para geminivirus. Los virus requieren pasar constantemente de un hospedante infectado a otro sano. Los virus no penetran a las plantas de manera directa. pero en ningún momento podemos decir con precisión de que geminivirus se trata. Este fenómeno sucede comúnmente en el campo o en los invernaderos. Todos los virus se pueden transmitir potencialmente por injerto. El ser vector implica que el virus es ingerido y se halla en contacto íntimo con el transmisor. 2. Biotransmisores. Transmisión por injerto. mediante el rozamiento natural entre plantas (VMT). Se aplica este término a cualquier agente vivo (excluyendo semilla y polen) capaz de portar o transmitir un virus fitopatógeno de una planta enferma a una planta sana. Un ejemplo útil de vector es el del mosco Anopheles. antes de poder ser transmitido. etc. o en aquellos casos en que por necesidad hay que causar heridas (partición de tubérculos en papa o podas en frutales). Afortunadamente la mayoría de los virus no se dispersan eficientemente de esta manera. tales como: podas. que transmite al protozoario causante del paludismo. el patógeno si se multiplica en el insecto pero hay abundantes excepciones en las 45 . En muchos casos de biotransmisores de virus. el microorganismo ingerido se multiplica y sufre transformaciones en el interior del cuerpo del insecto. 3. acomodo de guías. Por otra parte. la transmisión mecánica artificial es uno de los aspectos a estudiar para la identificación de virus. Siendo más común el primer término. El sitio de unión del injerto con el patrón permite el contacto de la savia infectiva con la savia de plantas sanas. pero principalmente a través de las heridas causadas por las prácticas de cultivo. En sentido estricto la palabra vector no es sinónimo de biotransmisor. aunque en el lenguaje común se usan de manera indistinta. desbrotes. cosecha. Este aspecto se verá en el capítulo correspondiente. propiedad que se utiliza a nivel experimental para determinar la naturaleza infecciosa de las enfermedades. Sin embargo hay que valorar la enorme importancia de las prácticas causantes de heridas en cultivos sujetos a manipuleo frecuente (hortalizas). En la práctica agrícola este factor es de gran importancia especialmente en el caso de árboles frutales. que no sucede así. de las 391 especies de animales vectores de virus en plantas. durante la transmisión por insectos se pueden distinguir tres fases: - Período de adquisición. etc. 3. nemátodos y hongos. del total de artrópodos vectores. el 99% son insectos. 3. trips. En general. Afidos. Entre los biotransmisores de virus fitopatógenos se hallan los insectos. una vez que empieza a alimentarse de una planta sana. Insectos Según Harris (1981) los insectos constituyen el grupo más importante. - Período de látencia. 1. Es el tiempo mínimo que requiere el insecto para adquirir el virus. chicharritas y coleópteros. Tiempo mínimo requerido por el insecto para poder trasmitir el virus adquirido. Myzus. La mayoría de los 46 . Tiempo transcurrido desde que el insecto adquiere el virus hasta que es capaz de transmitirlo. Los principales grupos de insectos vectores de virus son: áfidos. Brevicoryne. - Período de inoculación. mosca blanca. que se refiere al tiempo durante el cual el insecto permanece infectivo. Entre los géneros más comunes se encuentran: Aphis. ácaros. Rophalosiphum. Macrosiphum. 1.1. Existen más de 190 especies de áfidos vectores de virus. 94% son artrópodos y 6% son nemátodos. Toxoptera. Se han reportado más de 160 virus trasmitidos por áfidos. el 70% de los insectos capaces de transmitir virus son homópteros. Hay otro término importante denominado período de retención. virus transmitidos por áfidos son de forma poliédrica o de varilla flexible. Cuyo síntomas más notable es el de mosaico, aunque algunos también inducen amarillamientos. Los virus raras veces son transmitidos transovarialmente (a través del huevo); así, los áfidos recién eclosionados casi siempre están libres del virus. La transmisión por áfidos pueden ser de tres tipos; No persistente (circulativa) que es la más común, o persistente (circulativa). Hay una tercera categoría que incluye a virus que presentan características intermedias entre las dos anteriores (cuadro 1). Cuadro 1. Características diferenciales de los virus transmitidos por áfidos. No persistentes El virus se adquiere durante piquetes superficiales de prueba; es portando en el estilete y retenido en el mismo por menos de una hora y usualmente no es ingerido El insecto puede adquirir al virus en segundos a pocos minutos. No hay un período latente y el virus puede ser transmitido de inmediato después de adquirirse Semipersistentes El virus es ingerido, y se ocupan de varios minutos a 1-2 horas de alimentación para que se adquiera Persistentes El virus es ingerido, pasa a los ductos alimenticios y hemolinfa. Invade las glándulas salivales. Tarda en adquirirse de 30 minutos a varias horas. Hay un período de latencia antes de que el áfido pueda transmitirlo. La transmisión es eficiente en función de la cantidad de virus ingerido. El virus persiste en el vector durante toda su vida y a menudo se multiplica en este. Rango estrecho de hospedantes No hay período de latencia en el vector. Para transmitirlo en una planta sana se tarda de varios minutos a pocas horas Los virus generalmente tienen amplio rango de hospedantes Se transmiten mecánicamente mediante frotado de savia Ejemplos: Virus Mosaico común del Frijol, “Y” de la papa, jaspeado del Tabaco, Mosaico del pepino y, Mosaico de la Sandía. Se transmiten difícilmente No se transmiten por frotis por frotis de savia de savia Ejemplos: Virus Tristeza de los Cítricos, Amarillamiento de la Remolacha y Amarillamiento del Trébol. Ejemplo: Virus Mosaico del Maíz, Enrollamiento de la papa, Amarillamiento Necrótico de la Lechuga y Enanismo estriado del Trigo. Los áfidos presentan formas ápteras y aladas; estas últimas son las más importantes como vectores dada su alta movilidad. Son insectos partenogenéticos y vivíparos que pasan 47 por cinco estadios ninfales. Algunos son específicos a uno o pocos hospedantes, pero muchas especies son polífagas, En ausencia del hospedantes cultivable los áfidos sobreviven en maleza ubicada dentro del lote (arvenses) o en los montes o drenes cercanos (maleza ruderal) Con frecuencia la maleza que alberga a los áfidos, es también susceptibles y funcionan como fuentes de inóculo primario; a veces estas plantas infectadas son asintomáticas. Otra posibilidad común es que el áfido adquiera al virus durante el trayecto hacia el cultivo, a partir de plantas infectadas de las que se alimente. Al llegar a los lotes de cultivo los áfidos se alimentan de los brotes más tiernos. Hay que distinguir dos cosas importantes relacionadas con la transmisión no persistente. Por un lado señalar que no todos los áfidos colonizan al hospedante, pero esto no es obstáculo para que los virus no persistentes sean transmitidos. Es común que antes de fijar su estilete de manera definitiva, realice piquetes de prueba ("tientas"), que le permitirán decidir si la planta escogida le conviene como hospedante. Este comportamiento es de mucha importancia epidemiológica ya que bastan estas tientas realizadas en segundos, para que pueda adquirir el virus o para depositarlo en las plantas sanas. El otro factor se refiere a que no se debe visualizar a los áfidos vectores de virus bajo la misma óptica de los insectos plaga. Teóricamente basta con que una planta sea picada con un solo áfido infectivo para transmitir al virus; por lo anterior no podemos hablar de umbrales de control para el control químico de áfidos vectores. Este tipo de transmisión no persistente se facilita porque algunos virus se hallan muy concentrados en las células del parénquima, y durante la tienta se adhieren fácilmente al estilete. Una vez que la planta es infectada los síntomas aparecen pocos días después, estas se presentan inicialmente en forma aislada, pero después se generaliza la epidemia. El control de enfermedades virales de transmisión no persistente es difícil de lograr mediante aplicaciones de insecticidas. Antes de que el insecto alado muera por el efecto del 48 insecticida, puede potencialmente (bajo la excitación nerviosa derivada del tóxico) picar otras plantas sanas cercanas, de tal manera que la transmisión no se evita. 3. 1. 2. Mosca blanca (MB) Transmiten virus cuyos síntomas generalmente son de amarillamiento, enrollamiento ("enchinamiento") y a veces mosaicos. Estas enfermedades se presentan generalmente en zonas tropicales y subtropicales. Las especies mas importantes son: Bemisia tabaci, Trialeurodes vaporariorum. Transmiten principalmente geminivirus (partícula formada por dos virus poliédricos unidos). La transmisión es de tipo persistente (excepto en el Virus de la Vena Amarillo del Pepino). El virus alcanza la hemolinfa. El período de adquisición es de 1-2 días y el de latencia de 4-20 horas. La mosca permanece infectiva hasta por 35 días o más. El virus puede ser adquirido por las ninfas, persiste durante la "pupación" y es inmediatamente transmisible por el adulto recién emergido. No hay evidencia de que el virus pase al huevo. Las moscas se alimentan del floema, prefieren tejidos jóvenes o en el envés de las hojas. Al ser arrastradas por el viento llegan a diseminar virus a grandes distancias. Son atraídas por la luz azul y colores amarillos. La mayoría de los virus transmitidos por mosca no se transmiten por frotis. Ejemplos de virus transmitidos por MB son: Virus Mosaico Dorado del Fríjol, Virus del Enrollamiento de la Hoja de la Calabaza y el Virus del Enchinamiento del Tomate. 3. 1. 3. Chicharritas 49 1. Las especies más comunes como vectores de virus pertenecen a géneros como: Empoasca, Dalbulus, Circullifer, Macrosteles, Agallia y otros. Son insectos de hábitos picador-chupador. 2. Transmisten virus asociados al floema, tejido del cual se alimentan. 3. Estos virus no se transmisten mecánicamente por frótis (excepto El Virus Enanismo Amarillo de la Papa) 4. La transmisión es generalmente del tipo persistente (circulativa). El período de adquisición es de 30 minutos o más. Hay un período de latencia en el vector. El período de inoculación es de varias horas. 5. El virus es retenido por el insecto durante toda su vida (excepto en el Virus tungro del arroz). El virus pasa del intestino a la hemolinfa y se multiplican en el vector (excepto el Virus curly top de la remolacha). En algunos casos hay transmisión transovarial del virus, es decir que los huevecillos quedan infectados y la progenie puede ser infectiva. 6. Hay una alta especificidad virus-vector y los virus tienen un limitado rango de hospedante. 7. Los síntomas mas comunes son amarillamiento síntomas de distorsión y proliferación anormal de hojas y yemas ("escoba de bruja"). 8. Ejemplos de virus transmitidos por chicharras son: Curly Top del Tomate, Rayado Fino del Maíz, Mosaico Estriado de la Cebada, y Estriado del Maíz. 3. 1. 4. Coleópteros 1. Las especies más comunes de estos vectores en México son Acalymma spp.y Diabrotica spp. 2. Período de adquisición de aproximadamente 5 minutos. 3. El insecto permanece infectivo por al menos un día después de que se alimenta de una planta enferma 4. Los virus se transmiten fácilmente mecánicamente. 50 Las especies reportadas como vectores son Frankiniella occidentalis. T. ya que depositan el virus en células que pueden sobrevivir al daño físico del insecto. 2. 1. Virus Mosaico Rugoso del Frijol. ubicados en mas de 50 familias. 3.5. él más importante es el Virus de la Marchitez Manchada del Tomate (VMMT o TSWV. Trips 1. 5. fusca. Entre mayor sea el período de adquisición. los adultos infectados lo pueden transmitir durante toda su vida. permitiendo la multiplicación del mismo. Aparentemente bastan pocos minutos para que el virus pueda ser inoculado por los insectos en las plantas susceptibles. F.Thrips tabaci. Transmiten a virus pertenecientes al grupo de los ToSpoVirus (témino derivado de Tomato Spotted Wilt Virus. efectuando la transmisión. El virus alcanza las glándulas salivales y es depositado junto con la saliva cuando el insecto se alimenta de plantas sanas. y alcanzan la hemolinfa. Bastan 15 minutos de alimentación para que el trips adquiera el virus. Ejemplos de virus transmitidos por coleópteros son: Virus Mosaico de la Calabaza. Los' insectos adquieren el virus solamente durante los estados ninfales. Las larvas infectadas pueden transmitir al virus.) 4. La savia ingerida pasa al intestino y los virus atraviesa la pared intestinal. Los trips son insectos de hábito raspador-chupador que usualmente se alimentan de tejido joven. F. palmi y Scirtothrips dorsalis. Evidencias recientes indican que los trips también realizan "piquetes de prueba" de manera similar a los áfidos y que durante estos puede ocurrir una transmisión exitosa. que incluyen hortalizas de gran importancia. 5. 51 . Virus Mosaico de la Berenjena y el Virus del Mosaico del Rábano. Este grupo se distribuye en casi todo el mundo y ataca mas de 500 hospedantes. schultzei. habrá mayor eficiencia en la transmisión. T. setosus. 3. Del grupo de los Tospovirus. En cierta manera el mecanismo de transmisión es similar al tipo no persistente de los áfidos. Existen evidencias que el virus se logra multiplicar en el cuerpo del vector y que el ciclo de vida de este se puede acortar considerablemente por el efecto del virus. el virus persiste también durante la muda. No existe transmisión transovárica. Eriohystulipae. lo cual es típico del patrón de dispersión del vector. El patrón de dispersión de estas enfermedades es en manchones. 3. que transmite al Virus Estriado del Trigo y E. La transmisión de virus por nemátodos no es de tipo persistente. Nemátodos. En nepovirus la transmisión por semilla es más importante 52 . ya que entra por el estilete junto con el alimento y se adhiere a la pared del esófago. Cuando el nemátodo se aleja y pica otra planta el virus es inyectado junto con la saliva. 2.6. ficus. pero algunos tetranichidos también los pueden transmitir. Los ácaros son artrópodos de hábito chupador. 3. Longidorus y Trichodorus. El período de adquisición es de 48 hrs. Ácaros De la clase arácnida. los eriófidos son los vectores de virus más importantes. La mayoría de los virus transmitidos por nemátodos se transmiten también mecánicamente. vector del Virus del Mosaico del Higo. Algunos vectores son. la cual despega al virus del estilete y este es inyectado en la planta sana. ni existe evidencia de que estos se multipliquen en el vector. son específicos al hospedante y el virus es desechado durante la muda del nemátodo vector. Se conocen al menos seis virus transmitidos por ácaros y en todos los caos la transmisión es de tipo persistente. Se conocen al menos 12 virus transmitidos por nemátodos y todos los vectores se ubican en el Orden Dorylaimida y cuyos géneros son: Xiphinema. 3. los patógenos se clasifican en: Nepovirus. Se conocen cinco especies de hongos vectores. Transmisión por Semilla En 1982 se conocían 230 virus fitopatógenos. Ejemplos son: Cuadro 2. Transmite al Virus del Anillo Negro del Tomate. Hongos vectores de virus y virus transmitidos. Un ejemplo es Trichodorus sp que transmite al Virus Sonajero del Tabaco. Las zoosporas se desplazan por el agua. respectivamente. de los cuales al menos 62 pueden ser transmitidos por semilla en cuando menos uno de sus hospedantes. Ejemplos de vectores son: Xiphinema index y X. 4. Incluyen virus en forma de varilla. Son virus poliédricos que también se transmiten por semilla y polen. El hongo adquiere al virus al atacar a una planta enferma por este último. Forman zoosporas en esporangios.a largas distancias. Las zoosporas tienen cierta autonomía de movimiento gracias a los flagelos. El porcentaje de semilla Virus transmitido Vistus Várice de la Lechuga Virus x de la Papa Virus Mop Top de la Papa Virus Mosaico del Trigo Virus Falso Enrollamiento del Chícharo 53 . Hongos. En base al tipo de partícula viral transmitida. Netuvirus. Longidorus sp. todos ellos son ficomycetes. americana que transmiten al Virus de la Hoja de Abanico de la Vid y el Virus de la Mancha Anular del Tabaco. La reproducción del hongo da origen a esporangios y zoosporas infectadas por partículas de virus. También llamados Tobravirus. Éste nemátodo es muy longevo en ausencia de hospedante y el virus dura hasta 8 meses en el nemátodo. 3. al infectar raíces de plantas sanas también inoculan al virus. Hongo fitopatógeno Olpidium brassicae Synchytrium endobioticum Spongospera subterranea Polymixa graminis Pythium ultimum 4. Por ejemplo en California se determinó que basta con que 0. En otros casos el aborto de flores podría evitar 54 . estos sean inactivados por substancias inhibidoras de la propia planta. Las semillas infectadas dan origen a plántulas que representan una fuente de inóculo inicial temprana. no así del interior de la semilla.infectada depende del virus y de la variante del mismo. una de las excepciones quizá sea el Virus Mosaico Común del Fríjol. La transmisión por semilla tiene también mucha importancia de la dispersión de virus de un país o continente a otro. Sin embargo bastan incidencias muy bajas de semilla infectada para que se inicien epidemias severas. la proporción de plantas con semillas infectadas generalmente es baja en la mayoría de los virus. La mayoría de los virus que se transmiten por semilla se ubican en su interior. así como de la variedad del hospedante y de la etapa de su desarrollo al momento de la infección viral. En el campo es raro que ocurran incidencias del 100% de plantas infectadas y además no todas las semillas de una planta resultan infectadas. El papel del inóculo portado en la semilla es mayor cuando el virus no tiene muchos hospedantes alternativos. lo cual sucede por transmisión mecánica o mediante vectores. en este caso puede ser el medio mediante el cual se introduce al patógeno por vez primera a una nueva región. Se supone que aunque algunos virus alcancen la semilla en desarrollo. Hay varias hipótesis que intentan explicar la ausencia de la transmisión por semilla. La infección de la semilla va precedida de infecciones en la planta antes de la floración. generalmente en el embrión. En consecuencia.1% de la semilla tenga al virus del Mosaico de la Lechuga para que las pérdidas sean cuantiosas. Las plántulas infectadas constituyen reservorios a partir de los cuales ocurre la dispersión secundaria del virus. ya que el virus puede ir en el embrión y en la testa de la semilla. La transmisión por semilla constituye uno de los factores más importantes en el desarrollo epidémico de algunos virus. que además se halla uniformemente distribuido. Virus tales como el VMT constituyen casos especiales. Debe también visualizarse su papel como sitio de supervivencia de los virus. El VMT puede ser eliminado fácilmente de la testa con substancias químicas. Las diferencias en la proporción de semilla infectadas también se expresan según el cultivar. En este caso todos los virus de determinado cultivo pueden ser transmitidos de manera vegetativa. Esta variación también es distinta según la planta individual de la misma variedad. pues por ejemplo. por ejemplo en lechuga de misma variedad. En algunos casos ciertos virus se transmiten por semilla solo en algunos hospedantes. aunque no todas las partes vegetativas de la misma planta puedan estar contaminadas. La temperatura es determinante.2% plantas. cuya transmisión por semilla varió del 0-53%. En otros casos algunos virus se transmiten por semilla solo en algunos hospedantes. contribuyen a que el virus alcance el embrión. la transmisión varió desde 1-75%. Es obvio que la propia extirpe o variante del virus también difiere en su capacidad de transmisión. en el Virus Mosaico Sureño del Fríjol. la transmisión de semillas contaminadas varió de 0. Este fenómeno aumenta también la proporción de semillas infectadas. al estudiar la transmisión del VMCF en 51 cultivares de fríjol.la transmisión. el cual al fertilizar flores de plantas sanas transmite también el virus.2-14. En cultivos ornamentales y comestibles como la papa y el camote. es de enorme importancia la utilización de semilla libre de virus. Las plantas infectadas pueden también producir polen infectado. Así. Son diversos los factores que determinan la proporción de semillas infectadas o inclusive el éxito de la propia transmisión. En otros casos el virus induce esterilidad en el polen. tal es el caso del Virus Mosaico Estriado de la Cebada. sin embargo la transmisión es de solo 55% a 2830ºC. la eficiencia de transmisión (% de semilla afectada) es también variable según la especie y variedad. Un caso aparte es el de la transmisión de virus mediante partes vegetativas. pero no en fríjol. infecciones antes de la floración o durante floración. 55 . Así. hay una transmisión de 95% cuando la temperatura es de 16-20ºC. Así por ejemplo el Virus Mosaico Amarillo del Fríjol se transmite por semilla en lupino. Los vectores también causan heridas con su aparato bucal (artrópodos o nemátodos) durante su alimentación en la que se adquiere o se inocula el virus. El fenómeno de la replicación y de la inducción de la enfermedad es complejo. durante la germinación de este grano y la formación posterior del tubo polínico. 2. Esta relación parasítica inicia cuando el virus ingresa a tejido sano. Una vez que las partículas han penetrado (inmersas en la savia infectiva) y hacen Contacto estrecho con el citoplasma de la planta sana. El ácido nucleico (AN) libre es el responsable de la infección y de los síntomas. Infección y síntesis viral. Puede suceder que el virus ya esté en la semilla. pero en plantas sanas las partículas iniciales son inoculadas mecánicamente mediante prácticas de cultivo. La infección viral en función de la síntesis de nuevas partículas. En el caso de la transmisión por polen. al interferir con el metabolismo normal de la planta.Unidad 3. la partícula viral pierde la cápside protéica. RELACIONES VIRUS-PLANTA Las plantas mantienen una relación íntima con sus parásitos virales y salvo pocas excepciones los virus generalmente están en el interior de las células vivas. La síntesis de nuevas partículas se da a costa de las substancias del propio hospedante. también ocurren heridas mecánicas. 1. Penetración. pero haciendo una simplificación se puede escribir de la siguiente manera: 1. ya sea en etapa de multiplicación o en reposo. Los fragmentos 56 . injerto y mediante el roce entre plantas. Los virus son “parásitos de heridas” frescas y requieren de estas para introducirse a la planta mecánicamente ya que son capaces de introducirse en el hospedante por sí solos. El proceso anterior se completa en aproximadamente 10 hrs. El virus utiliza los ribosomas y el ARN de la planta. Al final los nuevos virus quedan formados a imagen y semejanza de las partículas originales y se comportaran de manera similar al padre original. incluyendo la de algunas hormonas. se sintetizan nuevas partículas virales. 2.de la cápside quedan libres en la célula y aparentemente son incorporados en las reacciones metabólicas de la célula infectada. a menos que ocurra alguna alteración (mutación) durante la síntesis y ensamblaje de las moléculas del AN o de la cápside. 5. La planta deja de sintetizar algunas substancias y las sintetiza en mayor o menor grado. cuya forma y tamaño es variable. En plantas susceptibles es posible hallar hasta 10 millones de virus por cada célula. a partir de las propias células del hospedante (bajo las ordenes del ARN viral) se sintetizan también cada una de las cápsides correspondientes. La concentraciones de algunas substancias son también alteradas. La partícula de AN viaja al núcleo y logra inducir a la célula para que sintetice enzimas ARN-polimeras y ARN-sintetazas. 57 . 3. así como su localización en el interior de la célula. Cabe agregar que una vez formadas las nuevas partículas en algunos virus se ha observado que forman agregados de partículas virales conocidos como inclusiones. El ARN original que sirve de molde para producir una copia que actúa como una especie de "negativo"I que sirve para que se produzcan múltiples copias exactamente iguales al molde original. Tan pronto como se sintetizan las nuevas partículas virales. 4. El proceso antes descrito ha sido determinado en el VMT. Todas estas anomalías en el funcionamiento de la planta constituyen el proceso de enfermedad (patogénesis). uno de los virus más estudiados. Otro evento común es la síntesis de proteínas extrañas y de nuevas substancias. Hay que enfatizar que los virus no poseen un sistema metabólico propio y que todas las actividades se efectúan a costa de consumir las substancias de la planta y de alterar las funciones de la planta. que desemboca en la el desarrollo de los síntomas en cada hospedante. En presencia del ARN viral que sirve como molde. 3. se menciona que pueden desplazarse hasta 15 cm en tan solo 6 minutos. Se ha estimado que este mecanismo de transporte es demasiado lento ya que los virus se desplazan 8-10 células por día. La identificación completa de enfermedades virales en base a síntomas conlleva un alto riesgo de equivocación. que no conoce ni siquiera el desarrollo normal de un cultivo particular en una región. en este último caso la confusión se puede dar principalmente con enfermedades causadas por fitoplasmas (mycoplasmas). Translocación. IDENTIFICACION DE VIRUS 1. El transporte por el floema ocurre en sentido descendente y por lo tanto los virus se desplazan inicialmente a la raíz y posteriormente invaden otros órganos de las plantas Unidad 4. 58 . lo que también permite el flujo de los virus en suspensión acuosa. Del floema los virus pueden invadir nuevas células también vía plasmodesmos. Aspectos generales. y más en el caso de personal no entrenado. El desplazamiento entre 15 células vecinas se da vía de los plasmodesmos. También se mencionó que las virosis pueden ser confundidas fácilmente con problemas de tipo nutrimental. Los plasmodesmos son proyecciones del citoplasma que conectan una célula con otra y que permiten el transporte intercelular. El desplazamiento más rápido y a grandes distancias (entre órganos) a través de los tubos cribosos del floema. fitotoxicidad por plaguicidas u otros patógenos. Los virus tienen que desplazarse de las células inicialmente infectadas a las células sanas vecinas o aún desplazarse a distancias de varios cm o metros (árboles) para poder generalizar la infección en la planta atacada. Este aspecto se prueba haciendo injertos de brotes de plantas enfermas en 59 . inclusive ese diagnóstico llega incluso a nivel de especie con cierta precisión. la confusión con enfermedades fungosas puede inducir al productor a aplicar infructuosamente en fungicidas. sobre todo cuando se trata de síntomas no observados con anterioridad en una región. Sin embargo hay que reconocer que los fitopatólogos experimentados en determinados cultivos. ya que solo las enfermedades de naturaleza biótica son infecciosas. las fases a seguir para identificar a el o los agentes causales de una virosis desconocida son los siguientes: 2. Es común que algunos técnicos bajo el supuesto de que hay que prevenir contra mycoplasmas. con certeza relativa diagnostican enfermedades virales en base a los síntomas y revisión de literatura. Desde el punto de vista práctico no siempre es posible acudir a un laboratorio para que se determinen los virus presentes en una plantación. Por ejemplo al confundir a una virosis con un problema nutrimental puede conducir a gastar en fertilizantes innecesarios. De hecho una vez. Diagnósticos erróneos conducen invariablemente a la toma de decisiones equivocadas en cuanto al manejo de la enfermedad. no hay necesidad de acudir a técnicos mas experimentados. La identificación puede ser con fines de diagnóstico ante problemas prácticos concretos y en este caso los resultados deben ser rápidos y oportunos. En una investigación formal. con todas las limitaciones que este método tiene.Sin embargo. la observación de síntomas a nivel de campo nos da una idea de la posible causa y diseminación de las enfermedades virales. Sin embargo en estos casos hay que contar con información sobre los virus previamente detectados en la región. La sintomatología sigue siendo la herramienta más importante en el campo para identificar virosis. Antes que nada debe de determinarse que la enfermedad se puede transmitir de una planta enferma a una sana. aplican antibióticos en cultivos que solamente son afectados por virosis. Sin embargo no hay que despreciar la utilidad del trabajo de laboratorio. Comprobar la naturaleza infecciosa de la enfermedad. familiarizados con la sintomatología. De hecho este proceso es realizado por especialistas. 4. pues no cualquier persona lo puede hacer eficientemente. que solo se encuentran en los centros de investigación más importantes del país. Determinar tamaño y forma de la partícula. para lo cual se hacen preparaciones de tiras epidermales sobre un portaobjetos. Cabe aclarar que estas técnicas requieren de mucho entrenamiento. existen inclusiones amorfas. Son varias las propiedades que se han utilizado y entre las más importantes se hallan: Punto de inactivación térmica (PIT). que se colocan en baño María por períodos de exposición de 10 minutos. con el auxilio de una solución amortiguadora. de varilla flexible y varilla recta. especialmente la de microscopía electrónica. Propiedades físicas del virus. se evalúan temperaturas que varían de 30 a 1000 C. Las inclusiones son agregados de partículas y su presencia sirve solamente como indicador de la presencia de algunos virus. Se refiere a la temperatura requerida para identificar virus en la savia cruda recién extraída del tejido infectado. Se requiere previamente purificar al virus al menos parcialmente. Para purificar virus se requiere de centrífugas y ultracentrífugas. pues el uso de solventes u otras substancias pueden destruir al virus. Este factor se determina realizando observaciones en el microscopio electrónico de transmisión. Se observa la forma de la partícula y se miden sus dimensiones. Esta savia se coloca en tubos. Es obvio que el invernadero deberá estar protegido para evitar el acceso de vectores.plantas sanas cultivadas en invernadero. 60 . Muchos virus forman inclusiones y estas se pueden observar al microscopio biológico compuesto. piramidales. 3. etc. lo cual a veces no es sencillo. Recuerde que las formas de los virus son en su mayoría de tipo poliedro (esféricas o isométricas). se repite el ensayo evaluando períodos intermedios entre 6 y nueve días. se debe probar la transmisión por insectos y de ser necesario. pero no a los 9. con diluciones de 10-1 a 10-9 El punto final de dilución será aquel que corresponda a la más alta dilución en la que aún fue posible reproducir síntomas en las indicadoras inoculadas. Mecanismos de transmisión. Independientemente de que se transmita o no de manera mecánica el agente infeccioso. 60. 3. 15. 6. Longevidad "in vitro". 90 y 150 días (según sea necesario).Los tubos se retiran de inmediato del agua caliente y se pasan a agua con hielo. nemátodos y otros agentes sospechosos de actuar como vector. 9. El PIT será aquella temperatura más baja en la cual los síntomas ya no se produzcan después de inocular las plantas indicadoras. Si por ejemplo se tuvieron síntomas a los 6 días. 30. 61 . que den origen a lesiones locales. la posible transmisión por hongos.01% de estreptomycina (para evitar contaminación bacteriana). Se refiere al tiempo durante el cual el virus permanece infectivo en la savia cruda expuesta al ambiente de laboratorio (20-22°C). La longevidad in vitro se determina considerando la última fecha de extracción en la cual se obtiene aún desarrollo de síntomas en las plantas inoculadas. que se usa para inocular a plantas diferenciales que den lesiones locales. 5. Punto final de dilución (PFD). Se maceran 10 g de tejido en solución buffer y a partir de esta se inoculan plantas indicadoras que den reacción local. Es la más alta dilución de la savia en la cual el virus aún es capaz de causar infección. Enseguida se inocula savia de cada tubo por separado en plantas indicadoras. 12. Se extrae savia a los 1. Desde un principio debe intentarse la transmisión mecánica ya que este aspecto permite hacer diversos estudios y da una idea del posible grupo de virus al que pertenece el patógeno en estudio. Se extrae la savia y se en tubos de ensayo (como en el PIT) y se le agrega 0. en este caso el virus). Bases de la serología. ya que otras técnicas mas rápidas y eficaces. el virus se inocula mediante frotis. Todas las técnicas anteriores forman parte del protocolo formal para identificar virus desconocidos en una región. La serología constituye una de las herramientas más importantes en estudios tales como: -Diagnósticos rápidos y precisos -Estudios epidemiológicos -Relaciones entre virus y entre sus variantes 8. se procede a evaluar la transmisión por insecto. si no se transmite de esta manera.6. La técnica se fundamenta en el conocimiento que se tiene sobre la reacción (producción de anticuerpos) que ocurre en los animales de sangre caliente cuando son invadidos por un agente extraño (antígeno. Esta fase del estudio requiere de un amplio conocimiento de la biología de los vectores y de las técnicas de cría. 62 . Rango de hospedantes Se prueba la susceptibilidad de hospedantes de distintas especies pertenecientes a la misma familia y a otras distintas a las que pertenece el hospedante principal. o a hacer transmisión por injerto. Serología. En el caso de virus que se transmiten mecánicamente. ya que se requiere tener colonias limpias de virus y de un manejo cuidadoso para evitar contaminaciones. en los diagnósticos de rutina su uso es cada día menor. Sin embargo. 7. como la serología presentan amplias ventajas (y algunas desventajas). con el fin de aprovechar los anticuerpos producidos en estudios de identificación y diagnóstico de virus. D. En contraparte los anticuerpos son macromoléculas producidas por el animal inoculado natural o artificial mente. la cápside (cubierta de proteína) determina el tipo de antígeno. pero ni "A" dará origen a "B" y viceversa. ajenas al animal inoculado. para lograr una alta calidad si se requiere de personal altamente capacitado. Producción de antisueros. tales como los virus. tampoco "A" ni "B" producirán anticuerpos C.. Los anticuerpos funcionan como un sistema de defensa específica contra el antígeno que indujo su formación.ni N. Los anticuerpos son proteínas del tipo de las gamaglobulinas específicas.. 9. La producción controlada de antisueros (anticuerpos presentes en SL suero sanguíneo) se lleva al cabo en algunos centros de investigación y en los últimos años constituye un próspero negocio de algunos laboratorios que se encargan de producir los a nivel comercial. Ejemplos de estas compañías internacionales son Agdia y Sanofi. Las reacciones antígeno anticuerpo se caracterizan por ser relativamente específicas. funcionan como antígenos. Este fenómeno que ocurre de manera natural también puede ser inducido inoculando animales con virus conocidos. agentes de 63 . Partículas de nucleoproteínas.Los antígenos son moléculas o partículas constituidas por polisacáridos y/o proteínas de elevado peso molecular. en este caso. De hecho un proceso similar ocurre diariamente en la naturaleza cuando los animales señalados se defienden del ataque de microorganismos potencialmente patógenos. Así un antígeno "A" dará origen a un anticuerpo "A" y un antígeno "B" inducirá la síntesis de un anticuerpo "B". Aunque en si la producción de antisueros no es una taréa complicada. Posteriormente el tejido infectado se macera y se somete a proceso de extracción con solventes. En términos generales el proceso consiste en inocular plantas susceptibles con el virus específico. (según el arreglo de sus aminoácidos) que será producido. Después de cierto número de inyecciones y 5-10 días después de la última. 10. Este antisuero esta listo para su uso. podemos utilizar nuestro banco de antisueros para tratar de identificar al patógeno en estudio. Se deja la sangre en reposo y una vez que esta se coagula. Reacciones serológicas. previa dilución del mismo a las concentraciones adecuadas. el animal se puede sangrar parcialmente o se sacrifica (aplicando antes un anticoagulante). previa incorporación de un microbicida. el cual se guarda congelado (-15 a .precipitación y otras substancias. se separa el suero que contendrá los anticuerpos (antisuero). 64 . habrá un reconocimiento y una reacción entre antígeno "X" y los antisueros conteniendo al anticuerpo "X" . tratando de obtener la mayor cantidad de sangre posible. auxiliándose también con el uso de centrífugas y ultracentrífugas hasta obtener al virus con la mayor pureza posible. Una vez determinada la concentración óptima. estos últimos darían reacción positiva solo en el caso de que en la muestra hubiera los antígenos (virus) específicos correspondientes. se puede hacer un sangrado previo para checar la concentración de los anticuerpos en la sangre del animal. y entre nuestros antisueros está un antígeno "X".25° C) en pequeñas ampolletas cerradas herméticamente. caballos. borregos u otros. El virus purificado se inyecta mediante un programa calendarizado en algún animal de sangre caliente. pero no con los antisueros "Y". El virus tiene que combinarse con substancias coadyuvantes antes de inyectarse. o "Z". tales como conejos de Nueva Zelanda. Si al hacer reaccionar por separado cada antisuero disponible. para que el virus sea liberado lentamente y no cause un shock en el animal. Es posible aprovechar la capacidad de los anticuerpos para reconocer y acoplarse con el antígeno específico que indujo su formación con fines de identificación de virus. Es decir si tenemos una muestra de una planta infectada con un virus "X" desconocido. Las técnicas serológicas convencionales (aglutinación. Aquí se explicará solamente la técnica ELlSA. la cual revolucionó la serología. También se pueden detectar hongos y bacterias con ELlSA.mmuno-SorbentAssay" que puede traducirse como "Ensayo de inmunoabsorbencia con enzimas conjugadas". 11. presencia de inhibidores de la reacción presentes en la savia. cada una con ventajas y desventajas. A). Se agrega un extracto de la planta infestada. B). que fueron desarrolladas poster. o el efecto de la forma la forma de la partícula. Desde entonces ha sido una de las técnicas más utilizadas. tales como una baja sensibilidad. la cual es la más usada en la mayoría de los laboratorios. Dot Blot. La adsorción de un antisuero específico a la pared de un pozo de plástico (fig. También permite detectar virus en semillas e incluso en insectos vectores. 2. Las partículas virales se adhieren a los anticuerpos portadas en el antisuero. Latex. 65 . La ELlSA es ampliamente usada en investigación por su alta sensibilidad y especificidad. Elisa. Estas desventajas quedaron superadas con la técnica ELlSA. por su carácter práctico y versátil en su metodología.Existen diversidad de técnicas disponibles. Es posible detectar virus aún en plantas con síntomas muy tenues o asintomáticas y permite cuantificar concentraciones del virus. lo que permite trabajar gran cantidad de muestras con pequeñas cantidades de tejido vegetal. ELlSA. El método ELlSA consiste básicamente de cuatro fases principales: 1. La técnica doble difusión ya se explicó con anterioridad. El término ELlSA se deriva de "Enzyme-Lynked-I. Esta técnica desarrollada inicialmente en patología clínica e inmunología. fue adaptada en 1976 para utilizarse en la detección de virus fitopatógenos. que previamente se adhirió a las paredes del pozo (fig. entre las más usuales: Doble Difusión en Agar. etc. junto con las técnicas moleculares como PCR. doble difusión en agar) tenían numerosos inconvenientes. para cuantificar la concentración del virus. en el primer lavado (después del punto 1) los anticuerpos no atraparán ninguna partícula viral (dada su especificidad). Existen variantes de ELlSA. Es claro que la técnica es fácil de llevar al cabo. Al combinarse la enzima con el substrato se registra un cambio de coloración a simple vista. De nuevo se agrega el antisuero usado inicialmente. de tal forma que este queda atrapado entre el conjugado y el anticuerpo agregado inicialmente (se forma un "sandwich" con el virus en medio). D). pero conjugado previamente con una enzima (por ejemplo la fosfatasa alcalina).3. En consecuencia no habrá cambio de coloración. ya que pequeños detalles a veces son la diferencia entre un diagnóstico adecuado y uno errático. Cabe señalar que entre cada paso el pozo se lava con una solución especial que contiene detergente y se desecha el lavado. cuya intensidad será proporcional a la concentración. las cuales hoy en día han alcanzado un alto desarrollo y su avance es vertiginoso. Algunas compañías como Agdia y Sanofi son proveedores de equipo. Técnicas como la de Reacción de la Polimerasa en Cadena (Polymerase Chain 66 . Este conjugado se adhiere al virus (fig. que se usan en situaciones especiales. 4. La técnica se facilita con el uso de equipo apropiado y en algunos laboratorios bien equipados el procedimiento es semiautomático. pero para que su utilización sea confiable se requiere de experiencia. Cabe mencionar que desde la década pasada inició el desarrollo de las técnicas moleculares. Un aspecto muy importante es la cantidad de antisueros que se tengan disponibles y la calidad de los mismos. este no será afectado porque la enzima ya fue eliminada. Después al agregar el substrato. reactivos y antisueros de alta calidad. C). Las placas con los pozos se pueden "leer" en un espectrofotómetro especial. Si esto ocurre el conjugado (enzima-anticuerpo) tampoco se pegará y será eliminado por el segundo lavado. de tal manera que si la muestra de savia no tenía al virus correspondiente al antisuero utilizado. Se agrega un substrato sobre la cual pueda actuar la enzima conjugada (Fig. Esta técnica descrita es la que se usa con mayor frecuencia y se conoce como "ELlSA Sandwich doble anticuerpo". Nomenclatura y clasificación 7. el cual se encuentra solamente en la literatura antigua. Sin embargo. En este caso se usan técnicas mas sofisticadas. tienen una sensibilidad mucho mayor que ELlSA. Se caracterizan porque son muy sensibles y más precisas que otras técnicas. en casos especiales de diagnóstico o con fines más específicos. etc. o la Hibridación de Ácidos Nucléicos. el Virus Mosaico del Pepino lleva este nombre porque fue descubierto en pepino y uno de los síntomas principales es el mosaico. en la medida que los reactivos y el equipo utilizado sea mas barato y cuando exista personas mas capacitado. que requieren de equipo especial. estas técnicas aparentemente se volverán tan rutinarias como ELISA. Regularmente estas pruebas se ejecutan. Estas nuevas técnicas tienen una gran importancia en la detección de virus en frutales. 1. entre ellas el análisis del genoma vira!. Ejemplos de estas son la Reacción de la Polimerasa en Cadena también llamada PCR. 7. Las técnicas moleculares incluyen diversos aspectos del análisis bioquímico de los virus. en hospedante en el que se observó por vez primera al virus. de tal manera que muestras registradas como sanas mediante EllSA (porque el virus está poco concentrado) en realidad si están infectadas. etc.Reaction = PCR). 67 . Así por ejemplo. Técnicas moleculares. material propagativo. Su utilidad práctica es grande en diversos casos: por ejemplo en la certificación de sanidad de semilla. Nomenclatura. que por su alto costo solo se tiene en aquellos laboratorios mas avanzados en la investigación en virológica. Actualmente el nombre particular de cada virus se adopta en base a los síntomas los mas característicos de la enfermedad (a juicio del descubridor del patógeno). A través del tiempo se han seguido varios sistemas de nomenclatura de virus incluyendo el uso de sistemas binomiales. semillas. el número 1 indica que la cadena del ARN es de una sola banda. aunque estas no sean las mismas que en español. en lugar de VMMT para referirse al Virus de la Marchitez Manchada del Tomate. con el fin de facilitar la comunicación oral o escrita. Es necesario aclarar que estas abreviaturas se usan de manera uniforme por la mayoría de los investigadores. Es pertinente señalar que en el idioma inglés también se usan abreviaturas. por ejemplo todo mundo habla de TSWV (Tomato Spotted Wilt Virus). en lugar del VMP se usa CMV(Cucumber Mosaic Virus) y en lugar del VMT la abreviatura es TMV (Tobaco Mosaic Virus). En esta época de globalización es muy común el uso de las siglas en inglés para referirse a los virus y algunos investigadores latinos hasta se olvidaron de las siglas en español. pero que a veces facilita la comunicación. entre otras razones porque no se acepta que los virus son seres vivos. no es aceptado por los virólogos. para referirse a talo cual virus. 68 . en sentido estricto.En virología es común el uso de siglas para designar de manera abreviada a los virus. un sistema de criptogramas que no es muy utilizado por los fitopatólogos en la práctica. Los síntomas también pueden ser diferentes de acuerdo a la variante del virus y por el efecto del ambiente. Resulta evidente que el sistema de nomenclatura en uso resulta inapropiado. Así se utiliza VMP para el Virus Mosaico del Pepino. ya que los síntomas pueden variar incluso en el mismo hospedante y con el mismo virus. lo cual resulta práctico. Sin embargo el uso del sistema binmial. tan útil en hongos y bacterias. A finales de los años 60 algunos virologo desarrollaron. además del nombre común. VMT para el Virus Mosaico del Tabaco o VMAT para el Virus Mancha Anular del Tabaco. Con fines ilustrativos a continuación se anota el criptograma específico que corresponde al VMT: R/1: 2/5: E/E: S/O En el criptograma anterior el significado de cada componente es: R/1= La R significa que el virus está compuesto por ARM. Este fenómeno no es deseable desde el punto de vista idiomático o nacionalista. Transmisión Tamaño de partícula Grupo ARN 1 Cadena 1.2/5= El 2 representa el peso molecular del ácido nucleico. 1985) los virus de las plantas se hallaban clasificados en 27 grupos de los cuales se estructuraron en base a las propiedades físicas. así como el mecanismo de transmisión conocido. Chicharo Mosaico de la Alfalfa Bromovirus Cucumovirus Llarvirus Rango de hospedantes Semilla Mecánica Vector 25 30 28 26-28 30 28-30 24 31-34 28 30 18-58x28 26 28 26-35 A. tipo de ácido nucleico (ARN o ADN). es decir según la forma de la partícula.2. Poliédricos Luteovirus Enanismo clorótico Maíz Sobemovirus Necrosis del Tabaco Tombushvirus Tymovirus Comovirus Dianthovirus Nepovirus Mosaico Ena.E E E A A E E A E A E A A + + + + + + + + + + + + + A –p CH –sp Co Ho Co Co –p Ne A –p A –np Co. E/E= Se representa aquí la forma de la partícula que recubre al ARN (envoltura / elohagada o varilla). expresado en millones. El 5 representa la proporción (%) de ARN que posee la partícula. Características principales de los grupos de virus fitopatógenos. número de cadenas o bandas de ácido (1 o 2 bandas) en las partículas de cada virus. Hasta 1985 (Walkey. Clasificación. S/O= Describe el tipo de hospedante (en este caso plantas de semilla o angiosperma). químicas y biológicas. El 0 (cero) indica el tipo de vector que en este caso no existe). 7. Ne A –np T + + + + 69 . np A. 1985. Ho = hongos. Varillas 114x22 Tobravirus 300x18 Tobamovirus 100-150x13 Potexvirus 470-580x13 Carlabirus 620-7200x13 Potyvirus 680-900x11 Closterovirus 600-2000x10 3. *Los Rhabdovirus son de forma baliforme y los tospovirus de forma poliédrica. Mancha anular de la 70 . Algunos ejemplos de virus importantes en México. Vectores: A= afidos. A E A. Ne = Nemátodos. Tipo de transmisión: p = persistente. Ch = Chicharras. *Geminivirus están compuestos por dos partículas unidas.np A. Mb = Mosca Blanca. y sp = semipersistente. np = no persistente. E - - E *Cuadro elaborado en base a información de Wakley. Co A. Mosaico Común del Frijol.sp –p A .Moteado “Velvet del 30 Tabaco” 180-215 y 162. ambos están recubiertos por una capa de lípidos * Espacios en blanco significa que no se tuvo información disponible. Cuadro. Ch –p T –p Ch –p Ch –p Ch –p Ch –p. Mb–p A –np A + - E - A. Rango amplio (A) o estrecho (E) de hospedantes. Envueltos Rhadovirus 160-380x5095 Tospovirusa 85 ARN 2 cadenas Phytoreovirus 70 (poliédricos) Fijivirus 70 (poliédricos) ADN 1 cadena Geminivirus 18-20 (poliédricos) ADN 2 cadenas Caulimovirus 50 (poliédricos) E + A A E E. E A + + + Co + + + + + + Ne. Grupo Luteovirus Nepovirus Sobemovirus Mosaico de la alfalfa Cucumovirus Tobamovirus Potexvirus Potyvirus Virus Enrollamiento de la Hoja de la Papa Mancha Anular del Tabaco Mosaico Sureño del Frijol Mosaico de la Alfalfa Mosaico del Pepino Mosaico del Tabaco. Mosaico del Tomate “X” de la papa “Y” de la papa. Co = Coleópteros. T = Trips. La fuente de inóculo primario se refiere a aquellos lugares u organismos en los que se albergan los virus que causan las primeras infecciones de la temporada en el cultivo. El inóculo (partículas de virus) se puede hallar en diversos lugares (fuentes de inóculo). Jaspeado del Tabaco Closterovirus Tospovirus Geminivirus Tristeza de los Cítricos Marchitez Manchada del Tomate Chino del Tomate. permiten lograr un manejo de la enfermedad. y por semilla. El virus puede estar activo o latente. los virus no pueden ser controlados con substancias químicas específicas. Entre las medidas más importantes se hallan: 1. A diferencia de hongos y bacterias.Papaya. Eliminación o evasión de fuentes de inóculo. Para lograr lo anterior es necesario: a) La identificación de los agentes involucrados b) Tener conocimientos básicos sobre la epidemiología del patógeno: fuentes de inóculo primario y secundario. Mosaico de la Sandía. Enrrollamiento de la Hoja de la Calabaza. semillas y en insectos vectores. Una vez que el virus ha infectado a una planta resulta sumamente difícil su eliminación. tales como plantas de maleza o de cultivo. vectores y tipo de transmisión. Unidad 5 CONTROL DE ENFERMEDADES VIRALES Desde el punto de vista práctico el principal objetivob de la virología es obtener control de las enfermedades causadas por estos agentes. transmisión mecánica. Generalmente se requiere de mas de una medida de control. Sin embargo existen diversas medidas preventivas que permiten evitar disminuir la incidencia de plantas enfermas. Las plantas infectadas con el inóculo primario multiplican al 71 . Mosaico dorado del Fríjol. etc. que aplicada de manera integrada con otras prácticas. tales como maleza o plantas silvestres que desarrollan dentro o fuera del terreno de cultivo.Saneamiento. ya que la detección oportuna de plantas enfermas asintomáticas permitiría su erradicación oportuna y/o al menos evitar su uso de los materiales a usa en propagación se puede hacer uso de las técnicas serológicas como ELISA o de métodos moleculares como la Reacción de la Polimerasa en Cadena (PCR). La eliminación del inóculo primario se puede lograr mediante: 1. aumentando la gravedad del problema. la dispersión del virus de estas fuentes de inóculo se da principalmente mediante insectos vectores. Con este fin se pueden usar herbicidas o medios mecánicos y manuales. es decir cuando existan pocas plantas enfermas. la influencia puede ser mayor del cultivo. 1. Este factor es de especial interés en árboles frutales. 72 . La mayoría de los virus atacan a otros hospedantes distintos al principal. Por lo anterior la eliminación de maleza dentro y por las orillas del lote. Comprende el arranque o destrucción en su sirio.1 Eliminación de hospedantes alternativos. ya que los síntomas podrían estar enmascarados.virus y así se constituyen en fuentes de inóculo secundario. ya que si no se hace. Es una práctica útil en las primeras etapas de desarrollo del cultivo y/o de las epidemias. los insectos presentes en las plantas enfermas volarán a las sanas.2. En ocasiones resulta difícil confirmar visualmente (en base a síntomas) la ausencia de virus en una planta. Es importante que antes de hacer el saneamiento se efectúe una aplicación “fuerte” (de productos de acción rápida) contra los insectos. El saneamiento también debe incluir a las plantas mostrencas (“voluntarias”) que crecen fuera del ciclo de cultivo. de las primeras plantas que resulten infectadas. mas cerca se hallen. así como en drenes o canales cercanos deberá hacerse varios días antes de establecer el cultivo. Estos pueden actuar como reservóreos de inóculo y entre. en maleza o en cultivos vecinos. Al destruir las plantas viejas. Se pretende romper el ciclo. 73 . evitar la continuidad de la enfermedad en el espacio y en el tiempo. con éxito relativo. sobre todo se va a establecer una plantación de la misma especie a la del lote abandonado de vecinos. Higiene del cultivo. se pueden tomar diversa medidas tales como evitar el manipuleo excesivo de las plántulas por los obreros. Para evitar la introducción y dispersión del inóculo a un lote o invernadero. Evitar traslape de cultivos. es común que en suelos con acolchado se arranquen plantas viejas de calabaza (a veces con incidencias superiores a 50% de virósis) y se siembra de nuevo sin arar el terreno. Por ejemplo la semilla de papa es producida por algunos productores en regiones aisladas de Chihuahua y Jalisco. evitar en lo posible entrada de fumadores en los invernaderos de tomate y chile. Los vectores prefieren generalmente las plantas nuevas. Se debe evitar el establecimiento de cultivos nuevos en lotes cercanos o colindantes a plantaciones viejas. Selección del sitio de siembra. los insectos se albergan en el suelo. 1. es decir. La selección del sitio de siembra es también de gran importancia en la producción de semilla certificada.1. Este principio se puede aplicar evitando siembras secuenciadas de especies de ciclo corto en el mismo terreno. epidemia desarrolla en forma temprana a partir de abundantes fuentes de inóculo primario. por lo que tienden a emigrar de los plantíos en senescencia. e inclusive de debe valorar una posible aplicación previa de insecticidas "fuertes" antes del rastreo. 1. ya que se debe evitar esta práctica en valles altamente contaminados con virus. Se debe rastrear dichos lotes abandonados antes d establecer un nuevo cultivo. Por ejemplo. Una vez establecido el nuevo cultivo.5.4.3. Este factor esta muy ligado a la fluctuación poblacional de vectores en cualquier región. Se ha demostrado que estas prácticas incrementan significativamente la dispersión mecánica de virus. e uso de semilla sana es uno de los aspectos más importantes. prefieren sembrar hasta en noviembre con la idea de evadir en lo posible las poblaciones de mosca blanca (como plaga y como vectores de geminivirus) y de trips (únicos vectores del Virus de la Marchitez Manchada del Tomate). aunque el tomate se puede establecer en el Valle del Fuerte. ya que los desbrotes o las podas. Un ejemplo común es el del Virus del Mosaico Común del Frijol (VMCF). Así es posible escoger la época de siembra más favorable o al menos estar prevenido si se escoge una época más riesgosa. 1. de manera mecánica. y el descole. conllevan a la transmisión de virus y bacterias. Una situación similar se da en los cultivos de tomate bajo estacado. El conocimiento del comportamiento de las poblaciones de vectores más importante permite tomar algunas decisiones tendientes a disminuir los riesgos de epidemias devastadoras. sobre todo cuando no existen otras fuentes importantes de inóculo primario. con la idea de prevenir la dispersión de virus como el VMT.7. Por ejemplo. En algunas enfermedades virales. Uso de semilla sana. Entre los productores de sandía es muy común el acomodo de guías. Conviene valorar este factor de riesgo antes de iniciar esta práctica y hacer lo posible por disminuir al máximo el problema mediante la desinfección de herramientas (cuchillas y tijeras). Aunque el VMCF puede albergarse en algunas leguminosas silvestres. Se recomienda la desinfección de manos y herramientas con agua con cloro. Selección de la época de siembra. Los productores que siembran muy temprano tienen el riesgo de pérdidas totales por lo que tienen que gastar mas en insecticidas y a veces estas son infructuosas.6. a partir de septiembre. la transmisión por semilla llega 74 .También se recomienda la desinfección de herramientas y de las manos de los obreros. las compañías que siembran tomate para uso industrial. 1. Por lo anterior el uso de nuevos productos eficientes contra mosca blanca. de tal manera que la muerte del insecto en alguna de estas fases. Control químico de vectores. Se han obtenido resultados satisfactorios en el control de vectores aéreos transmisores de virus en la forma persistente. Árboles de vivero sanos. tanto la adquisición como la inoculación del virus se pueden efectuar en cuestión de 75 . Otro ejemplo ilustrativo es el del Virus Mosaico de la Lechuga. insecto que adquirió resistencia a prácticamente todos los insecticidas comúnmente empleados. deberá ser muy cuidadoso. rompe la transmisión. Recuérdese que en estos casos tanto el período de adquisición como el de inoculación es relativamente lento y que además se requiere de un período de incubación en el vector. El uso de semilla vegetativa libre de virus es de especial interés en papa (tubérculos) y en ornamentales (esquejes.a ser la fuente de inóculo más importante. bulbos). chicharritas y trips. el uso de insecticidas contra virus transmitidos de manera no persistente ha tenido resultados erráticos e infructuosos. En cultivos como cítricos es conveniente analizar la sanidad de las plantas de vivero antes de su establecimiento en el campo. En estos casos los insecticidas matan al insecto 27 antes de que logre transmitir al virus. Sin embargo cuando las poblaciones de estos insectos son demasiado altas y las fuentes de inóculo muy abundantes. el control de estas virosis no es eficiente. 1. sobre todo cuando se quiere depender de este único método para abatir las virósis.8. aún con los insecticidas más potentes. Este fenómeno se puede ilustrar en varias regiones de México con el problema de la mosca blanca. En contraste. ya que en California se determinó que mediante el uso de semilla sana se pueden incrementar los rendimientos hasta en 30%. tales como los transmitidos por mosca blanca. La sanidad de los arboles de vivero no solamente debe de efectuarse en base a la apariencia libre de síntomas de la planta. Esto se puede hacer mediante ELlSA o PCR. En el caso de la mayoría de los virus transmitidos por áfidos. (como el Confidor). 2. El control de virus transmitidos por nemátodos y hongos es también factible mediante la oportuna aplicación de nematicidas o fungicidas. es limpiado al efectuar estos piquetes. Barreras biológicas. Se señala que los áfidos tienen la costumbre de picar cualquier especie sobre la que aterricen. cebada y papa. buscando romper el mecanismo de transmisión. El control de vectores es técnicamente posible mediante la aplicación de insecticidas granulados de lenta liberación. En consecuencia el número de plantas visitadas puede aumentar y la incidencia se llega a incrementar substancialmente. En cultivos de bajo valor económico no puede ni pensarse en este método. posteriormente al emigrar el insecto al cultivo. tornándose temporalmente más activos de tal forma que tienden a hacer mas "piquetes de prueba". que solamente ocurre en ciertos cultivos y en condiciones muy específicas. En países como Inglaterra. en cultivos de remolacha. Sin embargo en México no existe experiencia con estos patosistemas. Control Físico. Tal es el caso del Témik. Se pretende que el áfido visite las plantas de la barrera antes de alimentarse de las plantas cultivables.segundos y no se requiere de un período de incubación. 3. La excitación nerviosa inducida por el tóxico altera su comportamiento. ya va libre de virus no persistentes.1. A lo anterior hay que agregar que muchas de las especies de áfidos también han desarrollado resistencia a numerosos insecticidas. Se supone que en estos ensayos de alimentación el estilete presuntamente contaminado con partículas virales. mediante un esquema de manejo integrado. 76 . El uso de insecticidas (aún los mas fulminantes) no maten al insecto de inmediato. sobre todo en el caso de virus no persistentes. se cuenta con sistemas de pronóstico de enfermedades virales. Consisten generalmente del establecimiento de hileras de plantas no susceptibles en las orillas o alrededor de las plantaciones. 3. con el fin de probar (tientas) una posible fuente de alimento. según se ha reportado en otros países. que quedan atrapados en el pegamento depositado previamente sobre estas trampas. Algunos materiales que reflejan la luz solar se han usado también para ahuyentar insectos vectores. En estas se atrapan altas cantidades de insectos vectores ya que este color atrae a diversos insectos. 3. En Veracruz se han evaluado las barreras de plantas de jamaica para limpiar estiletes de áfidos. Existe la opción de aplicar insecticidas residuales en las plantas de la barrera. con éxito limitado. botes y franjas de plástico de color amarillo. Superficies reflejantes. Cubiertas de plástico. 3. especialmente áfidos y moscas blancas. y 77 .4. Franjas amarillas.En la región se usan principalmente barreras de maíz o de zacate Sudán. Por ejemplo se ha observado que los plásticos (usados en acolchado) de color gris o plateado son repelentes de trips y de áfidos. especialmente estas últimas. En la región se generalizó el uso de pancartas. En esta región se utilizan generalmente en tomate. alrededor de lotes de hortalizas. Algunos productores usan también tiras de papel aluminio con este propósito. Una variante es el uso de franjas de color azul. la capacidad reflejante disminuye considerablemente.3. en este caso las tiras se cuelgan de las estacas de las espalderas. La eficiencia de esta técnica es limitada bajo una alta presión de vectores. Estas barreras se deben establecer con suficiente anticipación para que lograr una mayor efectividad. Se obtiene protección durante las primeras etapas del cultivo. el cual es preferido por los trips. pero una vez que el follaje cubre la cama. en un intento de controlar al Virus de la Mancha Anular de la Papaya. Incluye el uso de láminas de polietileno transparente con perforaciones ("plásticos multiperforados") y el agribón.2. 3. para que los vectores mueran ahí. esquejes. ya que se requiere de una buena cobertura de la superficie de la planta. La termoterapia se puede utilizar en combinación con técnicas de cultivo de tejidos. siendo mas común esto último. lo cual no es siempre fácil de lograr con los equipos convencionales de aspersión. Aceites. cuando un áfido se alimenta de una planta enferma las partículas virales son atrapadas por el aceite al extraer el estilete. Otro inconveniente es el riesgo potencial de fitotoxicidad de los aceites.6.cucurbitáceas. El uso de derivados del petróleo para el control de virosis transmitidas por áfidos o mosca blanca. bulbos . semillas. por lo que estas láminas de deben de colocar antes de la emergencia o inmediatamente después del trasplante. 3. La idea es evitar el acceso de los insectos a las plantas en etapas tempranas de desarrollo. Entre los virus más fáciles de eliminar se encuentran los Virus X. Se reporta que en Israel se ha logrado una buena eficiencia mediante el uso de aceites aplicados a alta presión. así como la de la planta u órgano a tratar. El material vegetativo (generalmente en estado de reposo. La eficiencia de esta técnica ha sido de moderada a baja. o cuando un áfido con el estilete contaminado llaga a alimentarse de una planta sana tratada. Generalmente se usa en material vegetativo de alto valor económico o biológico. con el fin de que la planta complete su desarrollo normalmente. antes de que el estilete ingrese en el tejido sano. el virus es desprendido por el aceite. fue común en años pasados. Se pretende que la fina película de aceite depositada sobre el follaje sirva como "filtro limpiador" del estilete contaminado por el virus.5. 3. Termoterapia. En otras palabras. Para lograr el éxito es necesario conocer la susceptibilidad del virus al calor. Y y del enrollamiento de 78 . tubérculos) se puede tratar con aire o agua caliente. Las cubiertas se retiran generalmente 30-45 días después. Desafortunadamente. una vez que se obtuvieron variedades resistentes al VMT. contra el VMT en tomate. La protección cruzada es un método riesgoso. Conceptos y principios generales. En Brasil también se obtuvieron buenos resultados con esta técnica. Resistencia genética. 5. Esta técnica se utilizó en los años 70.débiles o atenuadas artificialmente. Se pretende estimular los mecanismos de defensa de la plantas (proceso análogo a la inducción de anticuerpos en humanos) de tal forma que al llegar el patógeno silvestre se encuentra con los posibles sitios de infección ocupados. que posteriormente se inoculaban en tomate. Protección cruzada. Cepas silvestres del virus se trataron con ácido nitroso para obtener mutantes debilitados. Este método de control se basa en un principio análogo al de inmunización de animales de sangre caliente mediante el uso de vacunas. Es una opción conveniente en ausencia de otros métodos de control. 79 . pero contra el Virus Tristeza de los Cítricos. antes de que estas resulten infectadas por el patógeno en el campo. ya que a partir de las cepas virales alteradas se pueden originar nuevas variantes aún más agresivos que el virus silvestre. pero no se obtuvo control de la virosis del papayo. 5.1. en México se evaluaron algunas de estas cepas debilitadas procedentes de EUA. En Hawaii se utiliza exitosamente la protección cruzada contra el Virus de la Mancha Anular de la Papaya.la Papa. Ya no se utilizó esta técnica. 4. Con esta técnica se logró incrementar la producción en 15% en algunos invernaderos de Europa. por el contrario uno de los más difíciles es el VMT que es termoestable aún a 900 C. Las plantas de interés se inoculan deliberadamente con cepas . Es lo opuesto a susceptible. lo cual posiblemente se deba a la acción de ciertas proteínas involucradas en la translocación de virus. En cambio algunos materiales resistentes al Virus Y de la Papa. Algunos materiales resistentes limitan la multiplicación de virus a pesar de ser infectados. Una planta susceptible es aquella que permite fácilmente la infección y la multiplicación del virus. o de retardar el desarrollo de los síntomas de la enfermedad. Algunos de ellos es la presencia de cutícula gruesa y setas o pilosidad abundante que interfiera con la alimentación de los vectores. Inmunidad. Resulta obvio suponer que algunas substancias de las plantas tienen propiedades inhibidoras de la multiplicación. La planta es susceptible al virus. igualmente habrá individuos altamente susceptibles o medianamente susceptibles. Susceptibilidad. La inmunidad es la regla. es decir que en el caso particular de un determinado virus una especie de plantas puede tener variedades o clones que son resistentes o inmunes al patógeno. La concentración del virus y su movimiento en la planta es similar al de las plantas susceptibles. Resistencia. Este método se basa en el hecho de que en cualquier población de plantas existe variabilidad genética. Son plantas que no llegan a ser infectadas. c) resistencia al movimiento del virus en la planta. Tolerancia. b) resistencia a la multiplicación.El control genético consiste en la utilización de variedades resistentes o tolerantes a virus. Alta susceptibilidad y baja resistencia son sinónimos. la susceptibilidad es la excepción. Tolerancia no es sinónimo de resistencia. En el caso de la resistencia a la infección se ignoran muchas cosas. Es lo opuesto a resistente. Es aquella que es capaz de retardar o suprimir la multiplicación de un virus. Se consideran aquí a las plantas que no son hospedantes de determinado virus. 80 . pero los síntomas desarrollan lentamente o son moderados. pero se puede deber a diversos factores. que pueden agruparse en: a) resistencia a la infección. De hecho la mayoría de las plantas son inmunes a la mayoría de los virus. tal y como ocurre en algunos cultivares de tabaco con VMT o de pepino con VMP. Se han reconocido varios tipos de mecanismos de resistencia a virus. el movimiento del virus se retarda significativamente. El nivel de resistencia es variable y puede ser afectado por las condiciones ambientales. 5. La primer gran taréa en cualquier programa de mejoramiento clásico es identificar germoplasma que posea un alto nivel de resistencia al patógeno. Resistencia horizontal.Hipersensibilidad. Es un caso extremo de alta resistencia. La ventaja es que este tipo de resistencia es más fácil de incorporar en las plantas y de manejar durante el proceso de mejoramiento. el tejido inoculado muere y el virus generalmente no se dispersa en la planta. ya que no es generalmente afectada por las variantes. El resultado puede ser una lesión local necrótica o la muerte completa por un shock de la planta. En el primer caso se puede usar este mecanismo para obtener variedades resistentes. Esta resistencia 81 . El nivel de resistencia puede ser del 100% Y el ambiente no determina generalmente a este tipo de resistencia. Tipo de resistencia que se debe generalmente a uno o pocos pares de genes. 3. Es más difícil de incorporar y de manejar durante el proceso de obtención de variedades. Resistencia vertical. Tipos de resistencia. La ventaja es que esta resistencia es más estable. 2. También se le denomina resistencia monogénica. A veces este factor se encuentra en variedades comerciales en uso ya usadas con anterioridad. Tiene la desventaja de que con frecuencia la resistencia es rota por alguna nueva variante del virus. Es controlada generalmente por muchos pares de genes que trabajan de manera coordinada. Una vez que el virus se introduce a la planta. 5. Fuentes de resistencia. Una vez obtenida la variedad resistente puede suceder que presente características agronómicas indeseables. Este tipo de técnicas empieza a utilizarse con éxito. Mediante procedimientos de biología molecular de pueden extraer genes de una especie resistente e insertarse en otra especie. 82 . Con frecuencia los materiales resistentes no presentan buenas características agronómicas y hay necesidad de cruzarlos con materiales susceptibles que si los posean. Es una taréa laboriosa que requiere de una alta preparación teórica y práctica. A veces sucede que en una variedad susceptible de buenas características agronómicas se detectan una o pocas plantas que pueden seleccionarse o mejorarse para lograr un material resistente. Siempre es deseable incorporar resistencia a otros patógenos importantes. ya que una variedad resistente a determinado virus puede ser de poco valor si es susceptible a otro virus o patógeno importante. Lo más deseable es contar con genotipos resistentes con diferentes características agronómicas aceptables. La cruza de materiales silvestres con cultivados puede dar origen individuos no fértiles. pero aún se sabe poco de los riesgos de estas plantas transgénicas. por la incompatibilidad entre especies. El proceso de obtención de variedades resistentes no es fácil. Puede suceder que no se detecta resistencia en ninguna variedad comercial y entonces se tienen que buscar fuentes de resistencia en materiales silvestres de la misma especie o de especies del mismo género. pero con el auxilio de técnicas de cultivo de tejidos se pueden lograr resultados satisfactorios. para poder obtener la variedad deseada. Cuando la resistencia es conferida por un par de genes el proceso se hace más simple. por lo que es necesario hacer retrocruzas para incorporar los factores deseados. A veces hay que probar muchas variedades conocidas y líneas en desarrollo para poder detectar alguna resistencia. lo que en condiciones normales sería imposible. que se ajusten a las necesidades de los productores.también se puede aprovechar para integrarla a un material que tiene resistencia a otros patógenos. Una variedad resistente en una región puede no serio en otras en las que se presentes diferentes variantes del mismo virus (en variedades con resistencia vertical) o en donde las condiciones ambientales sean distintas (en variedades con resistencia horizontal). tiempo que se puede acortar notablemente mediante el uso de los nuevos métodos de mejoramiento. en los virus también ocurre. 4. Puede suceder que la resistencia a un virus en una región es rota en un tiempo más corto que el requerido para desarrollar la propia variedad. ya que pequeños cambios en las cadenas de ácido nucleico pueden bastar para que surja una nueva variante que sea capaz de vencer la resistencia de las variedades. mismas que además deberán poseer características agronómicas aceptables. pues resulta antieconómico el uso de otros métodos.El control de patógenos y plagas mediante variedades resistentes tiene la ventaja de que es él más económico. Entre los inconvenientes se mencionan el largo tiempo requerido para desarrollar las variedades resistentes. es que con frecuencia la resistencia de las variedades es "rota" por el desarrollo de cepas llamadas variantes del virus. en los que se hace uso de la biología molecular y del cultivo de tejidos. El costo de las variedades resistentes es alto durante el proceso de obtención. El desarrollo de variedades resistentes es aún más importante cuando no existen otros métodos eficientes y económicos de control. pero en el caso de productos de grano básico. Sin embargo el principal inconveniente de este método. es siempre la mejor opción. La existencia de variantes virales complica el proceso de mejoramiento y la durabilidad misma de la resistencia. contribuye a disminuir la contaminación y es fácil de utilizar. característica que resulta especialmente importante en el caso de productos hortícolas. 5. Variación patogénica de los virus. Una de las grandes desventajas de la agricultura moderna ha sido que en muchos casos los programas de mejoramiento genético se enfocaron a la obtención de variedades de 83 . Esto se debe a que así como entre las plantas existe variabilidad genética. que llegan a afectar severamente a genotipos de plantas que normalmente no eran atacadas por las variantes comunes conocidas. Para obtener una variedad resistente mediante los métodos tradicionales se puede tardar 8 o más años. alto rendimiento y calidad alimenticia o de aspecto agradable al consumidor. Esto provocó el descuido en lo relativo a la resistencia a plagas y patógenos. ya que la mayoría de estos genotipos rendidores o de alta calidad comercial. 84 . con frecuencia son demasiado susceptibles a diversos patógenos. En cursos posteriores se profundizará más sobre este tema.