LABORATORIO N8. IDENTIFICACIÓN DE CROMATINA SEXUAL

LABORATORIO Nº.8 IDENTIFICACIÓN DE LA CROMATINA SEXUAL INTRODUCCIÓN Pasaron muchos años antes de que pudiera establecerse una diferencia entre las células masculinas y las femeninas durante la interfase. Pero gracias a los trabajos experimentales en neurofisiología, de Barr y Bertram (1949), se observó por primera vez una diferencia morfológica entre las células de las gatas y los gatos. Las primeras, presentan un pequeño corpúsculo de una a dos micras de diámetro, adherido a la membrana nuclear, que no aparece en las células masculinas normales y que durante mucho tiempo se denominó corpúsculo de Barr. Por las relaciones que guarda con la presencia de los cromosomas X, a este cromocentro se le llama actualmente cromatina X. Muy rápidamente, las observaciones realizadas por Barr se replicaron en otros tejidos por diferentes investigadores, lo que condujo al mejoramiento de los métodos de estudio de esta cromatina en individuos sanos y enfermos. De estos últimos, se realizaron estudios en individuos que presentaban alteraciones o fallas en la diferenciación sexual con síndromes como el Turner y klinelfelter (Ve a galería de imágenes). El desarrollo de estos métodos permitió además, estudiar una gran diversidad de células para la observación de la ahora llamada cromatina sexual, tal es el caso de los neutrófilos, las neuronas, la mucosa vaginal y como en el caso de esta práctica células de la mucosa bucal. 8.1.2 OBEJTIVOS ESPECIFICOS • Reconocer el cuerpo de Barr en células de la mucosa bucal. • Comprender la importancia de la cromatina sexual en aquellos síndromes que cursan con problemas de diferenciación sexual. 8.2 MATERIALES • Espátula metálica o de madera con extremo redondeado • Solución fijadora: 3 partes de etanol al 95% + 1 parte de ácido acético glacial. • Cubetas de coloración • Aceto-orceína • Papel filtro • Láminas y laminillas. • Gasa 8.3 PROCEDIMIENTO 1. Limpie la mucosa de la cavidad oral con un pedazo de gasa. El paciente debe mantener la boca abierta y disponer la lengua en el lado opuesto al que va a ser frotado. 2. Para el frotis de la mucosa se utiliza la espátula. Este debe hacerse con presión moderada, asegurándose de obtener una capa de material blanquecino. 3. El material de la espátula se extiende delgada y suavemente sobre una lámina y ésta se sumerge inmediatamente en la solución fijadora. Pueden obtenerse tres láminas de cada lado de la boca. 4. Las láminas pueden permanecer en el fijador entre un minuto y una semana. 5. Las láminas se colocan en una cubeta de coloración y el colorante aceto-orceína se aplica por 10 minutos. 8.1 OBJETIVOS 8.1.1 OBJETIVO GENERAL • Observar la cromatina sexual en células humanas masculinas y femeninas. 48 • http://www.4 CUESTIONARIO Consulta. para buscar áreas donde las células estén bien extendidas. Observe inmediatamente con el objetivo de menor aumento. 8. Observe con el objetivo de mayor aumento (o inmersión) e identifique las estructuras ligeramente alargadas o plano-convexas. 6.5 ENLACES: • http://turner-syndrome-us. se pueden utilizar para identificar cromatina sexual?. ¿Cual es el patrón de herencia de las patologías consultadas?.htm l Conoce la secuencia de genes presentes en el cromosoma X leyendo el artículo publicado en NATURE | VOL 434 | 17 MARCH 2005 | © 2005 Nature Publishing Group ¿Que otros métodos diferentes al utilizado en esta práctica. identificación y análisis de los cromosomas.org/ página de la organización síndrome de Turner • http://gslc. 8. • http://www.arizona.utah.Sí solo cuenta con orceína en el laboratorio. deje enfriar y filtre para obtener la aceto-orceína.nature. 8. que otras patologías diferentes a los síndromes de Turner y klinelfelter. caliente hasta ebullición. Investiga acerca de genes holándricos y importancia Biomédica. cariotipo. 7.edu/e s/ Página de la universidad de Utah que habla sobre anormalidades cromosomicas. etc. adyacentes a membrana nuclear de coloración oscura en comparación con el resto del núcleo.ed u/: Aprenda sobre el método de Polimorfismo en la Longitud de los Fragmentos de Restricción (RFLP) para caracterizar muestras de ADN humano. Figura No.biologia. entonces adicione a 1gramo de esta 45 mL de ácido acético concentrado. están relacionados con la cromatina sexual.1 El cromosoma X es más grande que el Y • Retornar a tabla de contenido 49 . los su 8.genetics.com/natur e/journal/v437/n7060/index. tal como se aplica en el análisis de paternidad y en las investigaciones de delitos sexuales. Investiga sobre las aplicaciones que en medicina legal tiene la determinación de cromatina sexual. Se dispone una laminilla sobre la lámina y el colorante en exceso se remueve aplicando papel de filtro y ejerciendo firme presión. Representación Esquemática de las regiones homologas de los cromosomas sexuales humanos 3. Síndrome de Turner y su cariotipo 2. Síndrome de Klinefelter y su cariotipo VOLVER 50 .GALERIA DE IMÁGENES 1.