UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECANA DE AMÉRICAFACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA ORGÁNICA LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA ASIGNATURA: Laboratorio de Química Orgánica AII PRÁCTICA N°9: Aminoácidos y proteínas SEMESTRE ACADÉMICO: 2016 – I HORARIO: Jueves (13 – 17 horas) PROFESOR: M. Sc. Ramiz Martínez P. FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 09-06-2016 FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 15-06- 2016 INTEGRANTES: Jonathan Eleazar Castro Gutiérrez Narda Velasco Salazar Nelson Espinoza Choqquepura ............................................. 3 2..................................................................... 5 4........................ 13 10...................................................................................................................................................................................................... PRINCIPIOS TEÓRICOS..........................11 8........ 10 7.................... 4 3....................... BIBLIOGRAFÍA........................ RECOMENDACIONES.................................. DETALLES EXPERIMENTALES..................................................... REACCIONES..............6 5......................................... RESUMEN.................................... RESULTADOS.................................................................................... CONCLUSIONES......... DISCUSION DE RESULTADOS...........................................LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y ÍNDICE 1................................................ 14 P á g i n a 2 | 14 .... INTRODUCCION....................... 12 9.... 8 6........................ RESUMEN El objetivo de esta práctica fue el reconocimiento de proteínas y aminoácidos mediante diferentes ensayos. también mediante reacciones de precipitación con sales metálicas de soluciones de sulfato de cobre. con la reacción de xantoproteíca se logró identificar el grupo fenilo de la proteína mediante la coloración naranja. con la reacción de la ninhidrina se logra identificar cadenas de aminoácidos presentes en la albumina de huevo como cisteína y metionina mediante un cambio de coloración purpura. se utilizó como solución problema la solución de albumina de huevo.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 1. cloruro de bario y acetato de plomo todas ellas en exceso. P á g i n a 3 | 14 . las pruebas de identificación fueron la reacción de Biuret con la que se logró identificar el grupo –CONH de la proteína mediante una coloración violeta. con estas reacciones se logra el aislamiento de la proteínas de igual modo con las reacciones de reactivos alcaloides que son reacciones de aislamiento. La función de las proteínas en la dieta es aportar los aminoácidos necesarios para fabricar nuestras propias proteínas. los cuales en seguida son absorbidos en los capilares sanguíneos de las vellosidades del intestino y transportados al hígado. A diferencia de los carbohidratos y los triglicéridos que se almacenan. Así. fabrican las proteínas. los aminoácidos se oxidan para producir energía (ATP) o se emplean para sintetizar nuevas proteínas para el crecimiento y reparación del cuerpo P á g i n a 4 | 14 . entre otras muchas funciones. las proteínas no se guardan para su uso futuro. Los aminoácidos son los elementos químicos que crean las proteínas. durante la digestión se desdoblan en aminoácidos.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 2. Los aminoácidos son los compuestos responsables de la fabricación de proteínas. formación y regeneración de tejidos. todos los cuales realizan diferentes funciones y se adaptan de forma única para tales funciones. que son fundamentales para todos los procesos de crecimiento. los aminoácidos al unirse entre sí. las proteínas que ingerimos. imprescindibles para el funcionamiento de nuestro organismo.INTRODUCCION El cuerpo humano se forma de un número de compuestos orgánicos. éstas están formadas por cadenas de aminoácidos fusionados por enlaces peptídicos. en vez de ello. Es decir. PRINCIPIOS TEÓRICOS P á g i n a 5 | 14 .LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 3. 5% HNO3 (cc) Solución de NH4OH Solución de ninhidrina al 0.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 4.1% Ácido acético Solución de cloroformo Solución de sulfato de cobre al 5% Solución de cloruro de bario al 5% Solución de acetato de plomo al 5% Solución de ácido pícrico Solución de ácido fosfomolíbdico P á g i n a 6 | 14 .DETALLES EXPERIMENTALES MATERIALES Tubos de ensayo 2 Gradillas 2 vasos de precipitado 1 cocinilla eléctrica 1 probeta de 50mL 1 vagueta 1 huevo crudo REACTIVOS Solución del albumina NaOH (ac) al 10% Solución de CuSO4 al 0. De esta solución se tomó como para los siguientes ensayos. Se batió hasta que estuvo algo espumosa. al segundo agregue un exceso de cloruro de bario al 5% y al tercero agregue un ligero exceso de acetato de plomo al 5%.1%.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL PREPARACIÓN DE LA SOLUCION DE ALBÚMINA Se separó la clara de la yema de un huevo. luego se filtró a través de una gasa. En el tubo se evidencia la presencia de un precipitado amarillo por lo que se le sometió una temperatura suave que logra disolverlo al cabo de un cierto tiempo. luego se llevó a un baño maria hasta que se coloreó la solución a un color purpura. Al primer tubo agregue un ligero exceso de sulfato de cobre al 5%. c) Reacción de la ninhidrina Se colocó en un tubo de ensayo 5mL de solución de albumina y 0. 1. 2. b) Precipitación de reactivos alcaloides P á g i n a 7 | 14 . Se midió la clara en una probeta aproximadamente 35mL y se añadió una cantidad igual de agua destilada. REACCIONES DE COLORACIÓN a) Reacción de biuret b) Reacción xantoproteíca En un tubo de ensayo se agregó unos 3 mL de una solución de albumina y 1 mL de ácido nítrico concentrado. y se agitó suavemente.5mL de solución de ninhidrina al 0. Se añadió una gota de ácido acético y 1mL de cloroformo. Finalmente a la solución luego de enfriarlo se le añadió Hidroxido de amonio gota a gota hasta que el color de la solución disuelve cambie a un color amarillo. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN a) Reacciones de precipitación con sales metálicas En 3 tubos de ensayo se agregó 1mL de solución de albumina a cada uno respectivamente. (Ver fig N) Fig.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 5. después de calentar por unos minutos viro a purpura. Fig N° Fig N° Reacción de la solución anterior con hidróxido de amonio c) Reacción de la ninhidrina Al principio presentaba el color amarillo claro característico de la solución de albumina. . este último fue tomando la coloración de la ninhidrina. N() color purpura desps de Preaccionar á g i n acon 8 la | 14 ninhidrina.RESULTADOS 1. REACCIONES DE COLORACIÓN a) Reacción de biuret b) Reacción xantoproteíca Fig N° Reacción de la albumina con el ácido nítrico concentrado Se observa que la solución de albumina al agregar el ácido nítrico concentrado que luego de agitar suavemente se obtiene un precipitado amarillo el cual se procede a calentar en la cocinilla lentamente. Ver Fig N° Luego de calentar suavemente la cocinilla se observa que el precipitado de la solución se disuelve y cuando se le agrega la solución de hidróxido de amonio se observa que la reacción de la solución cambiara de color amarillo a anaranjado. después de añadir 1gota de ácido acético y el cloroformo. Acetato de plomo (c) Fig. N () reacciones de precipitación de la albumina con soluciones a. P á g i n a 9 | 14 . b y c. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN Solución de albumina + Sulfato de cobre (a) OBSERVACIONES Formación de abundante precipitado de celeste muy claro.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 2. No se formó precipitado Cloruro de bario (b) Formación de abundante precipitado de color blanco. REACCIONES DE COLORACION a) Reacción de biuret b) Reacción quimica xantoproteica Compuesto Compuesto c) Reacción de la ninhidrina 2. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN a) REACCIONES CON SALES METALICAS OVOALBUMINA muy claro) (ac) + CuSO4 (ac) -> formación de precipitado (verde P á g i n a 10 | 14 .REACCIONES 1.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 6. enolizándose pasa a una forma coloreada azul violeta denominada purpura de Rhueman. P á g i n a 11 | 14 . se produce la desaminacion oxidativa del grupo αamino y reducción de la molécula ninhidrina. y el. y proteínas. la albumina es una proteína compuesta por cadena de aminoácidos. debido a que la albumina de huevo es rica en cisteína y metionina estos son reconocidos por la ninhidrina. reacciona cn todos los a-aminoácidos a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto purpura.DISCUSION DE RESULTADOS Reacción xantoproteica La reacción xantoproteica en la solución de albumina se logra reconocer mediante la presencia de un precipitado amarillo que se debe a que anillos bencénico que contienen los nutrientes de la solución albumina.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 7. Además debido a que la ninhidrina es un agente oxidante poderoso. La adición de base fuerte como el hidróxido de amonio hace que el color amarillo torne a anaranjado debido a que se da la formación de sales. Reacción de la ninhidrina Este método se basa en la interacción de la ninhidrina con el grupo α-amino de los aminoácidos. El compuesto aminodicetohidrindeno se condensa con una molécula más de ninhidrina. sus grupos activantes pueden reaccionar con el ácido nítrico que nos indica la presencia de los aminoácidos tirosina o triptófano en una proteína. Por calentamiento en presencia de ninhidrina. - Mediante la reacción de la ninhidrina es posible la identificación de cadenas de aminoacidos. P á g i n a 12 | 14 .LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 8. Las manchas amarillas que aparecen en la piel después del contacto con el ácido nítrico se deben precisamente por la reacción xantoproteica del ácido con los aminoácidos de las proteínas de la piel.CONCLUSIONES - La reacción xantoproteica se puede considerar como una sustitución electrofilica aromática de los residuos de tirosina o triptófano de las proteínas por el ácido nítrico dando un compuesto coloreado amarillo a pH acido. estos fueron reconocidos por la ninhidrina por lo tanto de intuye que estos tienen un pH entre 4 y 8 para haber reaccionado positivamente con el buen agente oxidante ninhidrina. en la albumina de huevo es constituida por aminoácidos como la cisteína y metionina. la albumina se sancochara y no podrá observar bien el color anaranjado al agregar el hidróxido de amonio en la solución.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS AMINOÁCIDOS Y 9.RECOMENDACIONES - - Cuando se agrega el hidróxido de amonio en la solución de albumina se debe agitar suavemente la solución para que el precipitado no ocupe en toda la solución pues al momento de calentar suavemente en vez de disolver el precipitado. (mñn traigo mi recomendación) P á g i n a 13 | 14 . AMINOÁCIDOS Y BIBLIOGRAFÍA Eva Vejar Rivera. http://www. Mexico.dogsleep.LABORATORIO DE QUIMICA ORGÁNICA PROTEÍNAS 10. Practicas de Bioquímica Descriptiva UniSon.net/Laboratorio/Plummer/Chp05a.bioquimica.pdf (revisado 14-06-16) Editorial P á g i n a 14 | 14 . 2005. 167-168. pp.