DETERMINACIÓN DE HIERRO POR ESPECTROFOTOMETRÍAPRECISIÓN Y EXACTITUD AUTORES. María Fernanda López1, María Camila Parra2,Francisco González3 RESUMEN: En el presente artículo se presentarán las observaciones y datos obtenidos a partir de la identificación de Hierro en una muestra de agua del humedal Juan Amarillo, mediante la técnica espectrofotométrica. Se realizará una curva espectral con uno de los patrones de hierro, de concentración conocida, obtenido de la disolución estándar stock, para obtener la longitud de onda máxima a la cual, el metal absorbe la mayor cantidad de luz, utilizando el espectrofotómetro. Después, se procederá a realizar una curva patrón manteniendo la longitud de onda máxima fija y variando la concentración de hierro. Finalmente con los datos leídos, se hará una interpolación matemática para obtener la concentración de hierro en la muestra de agua, previamente midiendo su absorbencia (dada por el espectrofotómetro) y así concluir, según el decreto 1575 de 2007 resolución 2115, si el agua de la muestra es potable (concentración de hierro menor o igual a 0,3 ppm), o residual (concentración de hierro mayor a 0,3 ppm). PALABRAS CLAVE. Espectrofotometría, absorbencia, curva patrón, curva espectral, disolución estándar Stock. ABSTRACT: In this article will be presented the observations and data for the identification of iron in a sample of Juan Amarillo wetland, to know the concentration of this element across the spectrophotometric technique, we will do a spectral curve of iron patterns, with a known concentration of a standard Stock solution, and then we will obtain the iron’s maximum wavelength using the spectrophotometer, later we will realize standard curve with this wavelength fixed and changing the concentration, then with this curve we will do a mathematical interpolation to obtain the sample concentration knowing its absorbance (given by the spectrophotometer) and we conclude, according to decree 1575 of 2007 resolution 2115, if the sample water is potable ( iron concentration less than or equal to 0,3 ppm) or is residual (iron concentration higher than 0,3 ppm). KEYWORDS. Spectrophotometric technique, absorbance, standard curve, spectral curve, standard Stock solution. INTRODUCCIÓN Las sustancias químicas tienen la propiedad, debido a sus características tanto físicas como químicas, de absorber cierta proporción de luz presente, reteniendo parte de la radiación electromagnética, y no permitiendo el libre flujo de la misma. De esta manera, si se supone un haz de luz que pasa por un envase de plástico, que contiene una muestra de alguna sustancia, se podría considerar el hecho de que la intensidad de la luz que entra a la muestra, no es la misma a la que sale, y por tanto se puede llegar a concluir que una parte de la radiación ha sido retenida por algún componente de la mezcla en el recipiente. Un espectrofotómetro es un dispositivo, que permite medir indirectamente que tanta luz 1Estudiante de 3ersemestre de ingeniería química de la Universidad de América. 2Estudiante de 3ersemestre de ingeniería química de la Universidad de América. 3Estudiante de 3ersemestre de ingeniería química de la Universidad de América. 1 la concentración del componente absorbente. Teniendo en cuenta. pero considerando el error que se puede generar de forma proporcional a lo largo del procedimiento de la construcción de la curva de calibración o patrón. sin ser retenida por algún componente. es posible encontrar algebraicamente. esta aplicación puede profundizarse más con el uso de un dispositivo que permita medir la absorbancia de una muestra a una longitud de onda seleccionada. “b” es el ancho de la celda del espectrofotómetro. Análogamente. se les aplica una espectrofotometría. la constante “b” puede ser tomada como un error en la toma y lectura de datos experimental. mediante la ecuación de una recta de la forma: y=mx +b [2] Donde la pendiente “m” es el producto de la constante de extensión y el ancho de la celda. sometida a una espectrofotometría. si se toma una muestra de algún fluido. al cual se le conoce su curva de calibración. y se realiza una curva espectral (grafica que relaciona la absorbancia con la longitud de onda). la concentración aproximada de la especie en la muestra. es posible determinar a que longitud de onda. también se puede presentar el concepto de transmitancia. por la ley de Beer Lambert. En este caso. y por tanto. De esta manera. De esta forma. a partir de la regresión lineal realizada. la especie absorbe mayor cantidad de luz. 2 . dicha longitud de onda encontrada. si se obtuviese la absorbancia a diferentes longitudes de onda de una sustancia. y las proporciones dimensionales del medio en que se lleva a cabo la medición (ancho de la celda del espectrofotómetro). que contenga el componente. es posible determinar su concentración. El espectrofotómetro es un instrumento de análisis químico que determina la cantidad de luz que puede retener un componente. Si se conoce el mayor nivel de absorbancia de una sustancia. si se llegase a obtener la absorbancia de una sustancia. y “C” es la concentración de la especie absorbente (en ppm o ppb). y se le aplica una espectrofotometría para tomar la lectura de su absorbancia.puede absorber una sustancia. en función de la absorción. encontrar una relación entre la concentración del componente y la magnitud evaluada en el dispositivo. Por tanto. que es el porcentaje de luz que logra traspasar. de la ecuación de la regresión lineal realizada. la muestra. Sin embargo. MARCO TEÓRICO La absorbancia viene dada. para evaluar la absorbancia en cada muestra. es posible determinar la concentración de la misma en cualquier muestra. Aclárese que “y” es la absorbancia. como: A=a ×b ×C [1] Donde “a” es la constante de absortividad o extensión. de la siguiente manera: x= ( y−b) m [3] Despejando la concentración. Para un desarrollo mas optimo. Donde a diferentes soluciones que contienen diferentes cantidades de la especie a analizar. puede trabajarse para la realización de una curva patrón. Aplicando los conceptos de regresión lineal. se puede definir a la absorbancia como la propiedad que tiene una especie química de absorber cierta cantidad de intensidad de luz de algún haz electromagnético. Expresada de otra forma: A=a ×b ×C +error relativo Que es la misma Ley de Beer Lambert. puede analizarse el comportamiento de la absorbancia del analito en función de la concentración del mismo. 1 L de agua. . cualquier procedimiento espectrofotométrico. . Agregar 2.2. . puede encontrarse la cantidad aproximada de un componente en una mezcla. acetato de sodio e hidroxilamina. Posteriormente se utiliza la solución de hidroxilamina para: +3 2 Fe +2 N H 2 OH → 2 Fe +2 La formación del complejo de hierro (II) con fenaltrolina se da en un intervalo de pH de 2 a 9. Y diluir disoluciones hasta el aforo. 6.5x10-3 L de la solución estándar stock.-1x10-3 L de la solución estándar stock. Con una longitud de onda constante. y 3 . bajo el criterio de coloración de la muestra. por medio de interpolación matemática. (DISOLUCION ESTANDAR STOCK) 5. METODOLOGÍA 4. .1 L de agua. (DISOLUCION DE ACETATO DE SODIO) (II) (III) Empleando el blanco analítico y una de las soluciones de patrón de hierro. Si es necesario calentar. Elegir una de las disoluciones estándares de trabajo de patrones de hierro. se procede a operar con el espectrofotómetro de la siguiente manera: (I) Antes de realizar. Disolver 0. . y medir su absorbancia en más de 10 ocasiones.De esta forma.10 fenaltrolina)Fe 3 El hierro debe estar en estado de oxidación +2. .5x10-2 L de la solución estándar stock. En otro matraz colocar 5x10-2 L de agua destilada. disolver en agua y transferir a un balón aforado de 1 L.8x10-3 L de solución de acetato de sodio.10 – fenaltrolina monohidratada en 0. puede esperarse que dicha mezcla contenga alguna cantidad de hierro. realizar una curva espectral.1x10-3 L de solución de hidroxilamina. medir la absorbancia a diferentes longitudes de onda.10 DE FENALTROLINA) 2. agregar: .01 Kg de Acetato de Sodio en 0.01 Kg de Cloruro de hidroxilamina en 0. para asegurarse de la formación del complejo se adiciona acetato de sodio en medio acuoso.10 fenaltrolina. (DISOLUCION DE 1. en intervalos de 20 nm. (DISOLUCION DE HIDROXILAMINA) 3. Para la función que tiene las disoluciones de orto-fenaltrolina. en la siguiente reacción: 1 +2 +3 Fe + fenaltrolina →(1.5x10-2 L de la disolución estándar stock. Si en la adición de las sustancias se presenta un cambio de color de la muestra a rojo. Una vez preparadas las soluciones. (BLANCO ANALITICO) 7.5x10 -3 L de acido sulfúrico concentrado y diluir la solución hasta el aforo. Disolver 0. Extraer con pipeta y pipeteador en seis matraces aforados de 0. De las lecturas tomadas. con el fin de hacer un estudio de precisión de reproducibilidad de los datos. medir la absorbancia de cada solución patrón de hierro. Pesar en una balanza analítica 7x10 -5 Kg de FAS (Sulfato Ferroso de Amonio).7. iniciando en 400 y terminando en 560 nm. se requiere preparar las siguientes soluciones: 1.5x10-2 L de la solución estándar stock.1x10-2 L de solución de 1.1 L de agua destilada.1x10-2 L de la disolución estándar stock. Disolver 1x10-4 Kg de 1. .1 L: (PATRONES DE HIERRO) . A cada matraz preparado de los patrones de hierro. estas realizan un aporte en la identificación de hierro de alguna muestra. y el agente reductor se adiciona antes de desarrollar el color. 426 0.5 34. Curva patrón del hierro sin la concentración de hierro de la muestra Volumen (ml) 0 1 5 10 15 20 25 50 MUESTRA Concentrac ión (ppm) 0.1 7.324 0. para obtener la absorbancia de la muestra.548 0.158 0. Barrido espectral del hierro λ(nm) 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 Absorbancia (A) 0.457 0. y después realizar los debidos cálculos e interpolaciones matemáticas que permitan determinar la concentración de hierro en la mezcla.026 0. se realiza un proceso espectrofotométrico a la muestra.570 5.9 4 . Si no hay algún desarrollo de color filtrar la muestra. en la cual.000 0.3 27.467 0.6 34. con la cual se trabajo la curva de calibración.539 0.460 0. tambien se construyo una curva de transmitancia contra longitud de onda: Posteriormente. diluir hasta el aforo.100 0.008 2. con la misma longitud de onda.004 1. se agrega a un matraz volumétrico una cantidad de la muestra problema a analizar. el metal hierro absorbe la mayor cantidad de luz: y por tanto.00 82.391 0.020 - Absorbanc ia (A) 0.562 0.9 47. inferir la longitud de onda.116 0.4 43. previamente calculada.1 26.506 2.2 27.8 Tomando la longitud de onda máxima se procedió a realizar la curva patrón en los patrones de hierro para calcular la concentración de la muestra y los datos resultantes fueron: Tabla 2.202 Tranmitancia (%T) 63.511 0. RESULTADOS Como se muestra en la metodología. construir una curva de calibración.3 40. aplicando los conceptos de regresión lineal de los datos. del metal en cada solución.7 30.200 0.360 0.311 0. se realiza la curva espectral con una muestra cuyos datos fueron los siguientes: Tabla 1.3 76.1 55.364 0. la gráfica que permita.6 37.155 0.561 0. Si hay un cambio de color.4 62. Y verificar si se desarrolla un color en la solución que indique alguna presencia de hierro.9 28.083 (%T) 100 94.250 0.8 28.502 1. A partir de los datos.4 34.con los datos leídos del espectrofotómetro y la concentración. se realizó con la ayuda de algún software. Finalmente. y agregar el filtrado al matraz hasta el aforo.5 26.9 43. y agregar cada solución y cantidad enunciada en el inciso 7.4 48.5 69.582 0.583 1.000 0. 363 0. A partir de la interpolación matemática.365 0.621 1.6 34.612 1.5 69.366 Concent ración (C) 1.40 ppm Por lo que finalmente se puede presentar la siguiente tabla de forma completa: Tabla 2.4 43.008 2.1 7. así como el criterio de normatividad a tener en cuenta con los resultados obtenidos de la muestra. C= A partir de los datos leídos.5 ppm) Grup o 1 2 3 4 Absorbanci a (A) 0.2 x10-3 (%) error relativo 7. gracias a los procesos de regresión lineal se tiene que la relación entre absorbancia y concentración de hierro viene dada por: y=0. se obtuvo que la concentración de hierro en la muestra es: Y =0.083 C= (%T) 100 94.2317 C=0.Como se puede notar.55x10-3 3.3 1) Decreto 1575 de 2007 resolución 2115 Finalmente.617 Precisión -1.000 0.004 1.9 A+ 0.2317 0.158 0.020 0.69x10-3 7.583 1.2317 X−0.01 Parámetro Unidad de medida Método de determin a-cion Dato obteni do (ppm) Normativid ad Potabilidad (ppm) Conce ntració n ppm Espectrofotometrí a 0.400 Absorbanci a (A) 0.116 0.000 0.5 ppm de hierro.502 1.1 Curva patrón del hierro con la concentración de hierro de la muestra Se realizó la siguiente tabla que muestra las características del proceso.467 0. Entonces.026 0.01 [4] Aclárese que la función es de la absorbancia en términos de la concentración.506 2.360 0. el estudio de precisión se hizo sobre el patrón de 1.2317 x−0. aun no se ha encontrado.01 A=0.1 26.570 5. Tabla 4.2317C−0.79 CÁLCULO DE LA PRECISIÓN DEL MÉTODO - Concentración promedio 5 .083+ 0. Estadística del Mét (Patrón de 1.00 82.92 8.3 76.155 0. se realizo la siguiente curva de calibración: Volumen (ml) 0 1 5 10 15 20 25 50 MUESTRA Concentració n (ppm) 0.40 ≤ 0. Análisis de la concentración de hierro en la muestra.604 1.07x10-3 -9. Tabla 3.100 0.01 0. la concentración de la muestra en ppm de hierro. por lo que no sobra decir que “y” es la absorbancia y “x” la concentración de hierro en ppm.01 0.367 0.07 7. en un punto como este.50 6. de varias muestras donde la concentración de hierro es variable. para el buen desarrollo de la práctica.6136 A partir de los datos que se obtuvieron del procedimiento espectrofotométrico de la solución patrón de aproximadamente 2.6136 d 3=7.55 x 10−3 d 4=1. respecto al procedimiento experimental y los cálculos y resultados que se realicen y obtengan. se interpreta que a medida que la concentración de 6 . A partir de la tabla 2.6039+1. vuelve a decrecer.62115−1.6136 d 4=3.35 x 10 CÁLCULO DE LA EXACTITUD DEL MÉTODO Para proceder a realizar el estudio espectrofotométrico. respectivamente.62115+1.4 x 10 −3 P=1. ya que en esta es donde el hierro absorbe la mayor cantidad de luz.Cp= 1.6136 ± 5.57 Desviación d=C−Cp d 1=1. el metal hierro.617−1.6136 - Dato real−datoteórico x 100 datoteórico error =7. de la curva espectral (grafica 1).61253+1. se infiere que la longitud de onda a la cual. Por otro lado. Donde alcanza un máximo de absorbancia y posteriormente en longitudes de ondas mayores.4 x 10 - Precisión: −3 P=Cp ±5.4 x 10 - Desviación estándar: √ ( d 1 ) +( d 2 ) + ( d 3 ) +( d 4) 2 S= 2 2 2 3 −3 S=7. es conveniente usar la longitud de onda constante. con respecto a su absorbancia en cada muestra.07 x 10 ANALISIS DE RESULTADOS d 2=1.61253−1. −3 d 2=−9.6136 −3 d 1=−1. es a 510 nm. al construir la curva de transmitancia contra longitud de onda.5 ppm.69 x 10 d 3=1. y por tanto donde se alcanza un mínimo en la gráfica 2.617 4 - (%) Error relativo: error = C=1. era de esperarse que en la longitud de onda que absorbe más luz. para interpretar la importancia que tiene la concentración del metal. absorbe la mayor cantidad de luz. haya menor porcentaje de transmitancia.60391−1.2 x 10−3 - Desviación promedio: d 1+d 2+d 3+d 4 4 dp= −3 dp=5. En el procedimiento se utilizó una longitud de onda de 510 nm. ya que es el punto donde menos intensidad de luz logra atravesar la muestra. habrá más masa del mismo que pueda obstaculizar con mayor eficacia. En el último procedimiento experimental de estudio de precisión de la reproducibilidad de las absorbancias medidas de una misma solución patrón de hierro. y en consecuencia. despejando “C” o “x”. Como del ajuste se obtiene una relación de la absorbancia en términos de la concentración. fue de 0. mientras que la transmitancia disminuirá. fue de 0. debido a la imprecisión a la hora manejar instrumentos como pipetas y pipeteadores y en consecuencia a la falta de experiencia 7 . con sus respectivos desarrollos de color. A partir de los datos obtenidos en la tabla 2. no es más que la aproximación más adecuada del comportamiento de los datos. donde alguna de las magnitudes disminuirá y por tanto la otra también. realizando los cálculos pertinente (hechos en la sección de análisis de resultados [4]). Teniendo en cuenta la normatividad del decreto 1575 de 2007. Por tanto. y que la precisión de dicho procedimiento fue buena. resolución 2115.400. acetato de sodio e hidroxilamina. si una de los dos aumenta. así como se puede obtener la absorbancia aproximada de cualquier concentración hierro que se disponga a calcular a partir de la ecuación lineal. que como ya se había mencionado que el resultado calculado no es realmente exacto. donde se hace un esbozo del comportamiento de la absorbancia dependiendo de la concentración del metal. Aclárese que también se aplica en el caso contrario. aunque su contaminación de Fe no es tan alta. se obtuvo que la concentración en partes por millón de hierro en la muestra agua. Este resultado puede explicarse. Entre estos. Por lo que. que menciona las características que deben tener ciertas muestras de agua para ser clasificadas como agua potable o residual. y viceversa. Cabe destacar. también se puede determinar la concentración de un componente de una mezcla. la otra también lo hará. que la gráfica resultante (grafica 3). también lo hará su absorbancia. es considerada como corriente de aguas residuales. Si se tiene en cuenta la ley de Beer Lambert [1].083 A. se obtiene que el error experimental es relativamente bajo. el paso de la luz. en forma de la ecuación [2]. como se muestra en la ecuación [3]. En cuanto a los factores que afectaron el desarrollo de la práctica. donde la absorbancia y la concentración de la especie absorbente son directamente proporcionales. se pueden considerar los diferentes errores sistemáticos determinados que se presentaron en el desarrollo. Se aclara. dicha concentración es una aproximación al valor real. puede notarse que se cumple satisfactoriamente el postulado.hierro aumenta. se concluye con que la muestra analizada. además de la disolución estándar stock de hierro. y en consecuencia existirá cierta incertidumbre en los valores que se puedan calcular del ajuste lineal. puede que existiesen errores personales en la preparación de las soluciones de fenaltrolina. y los patrones de hierro. por ningún motivo debe ser consumida por algún ser vivo. como se ejemplificara a continuación. debido al contenido de hierro superior al esperado. se hace un ajuste por regresión lineal. si se conoce la absorbancia de la muestra (en la longitud de onda con la cual se construyó la curva de calibración). como la absorbancia medida en el espectrofotómetro a 510 nm de la muestra de agua del humedal. desde el hecho de que a medida que aumente la cantidad de Fe. La pureza de los reactivos no era la indicada o esperada.Diferencias: . Se utiliza para saber la máxima longitud de onda en donde una sustancia absorbe más luz. Determine conceptualmente cual es la acción química de los reactivos comprometidos en la determinación de hierro por espectrofotometría. 3. cálculos realizados y resultados obtenidos. Fue obligatorio el uso de espectrofotómetro para realizar las dos curvas. su desviación. Errores a la hora de preparar las soluciones estándar. Se tiene que realizar el promedio de los datos. En ambas se presentó la transmitancia. Todos estos errores afectaron de forma proporcional el desarrollo de la práctica en los datos leídos.de las personas (estudiantes) de manejar cantidades de sustancias. La baja concentración del componente en la muestra. La representación gráfica es parabólica. - La turbiedad de la muestra. Se halla el porcentaje de error relativo con el dato real menos el teórico dividido el teórico y multiplicado por 100. - Semejanzas Curva espectral Curva de calibración 1.10 Fenantrolina: reacciona con el hierro para formar un compuesto denominado ferrina y da el color rojizo a la solución. . CUESTIONARIO Mencionar y explicar por lo menos cinco interferencias en el análisis de hierro por espectrofotometría en muestras aguas. Precisión Es la toma de varios datos en los cuales su valor se acerca entre sí. Se utiliza para determinar la concentración desconocida a partir de patrones con concentración conocida. La representación gráfica es lineal. Las variables usadas son absorbancia contra longitud de onda. al igual que la calibración de todos los instrumentos utilizados. - - Establecer por lo menos tres diferencias y tres semejanzas entre precisión y exactitud. cabe considerar que quizá algunos reactivos no estaban en el estado de pureza especificado. En la exactitud el porcentaje de error va a ser 8 . En ambas curvas la absorbancia tiene un papel principal para determinar otras variables. También. - Hidroxilamina: se utiliza como agente reductor para que el Fe+3 se reduzca a Fe+2 1. la desviación promedio y al final la precisión La precisión suelen dar valor demasiados Exactitud Es la toma de un solo dato en el cual su valor es parecido al valor real. Quizá lo equipos no estaban del todo calibrados. Acetato de sodio: encargado de la formación del complejo. 2.Diferencias: Curva espectral Curva de calibración Las variables usadas son absorbancia contra concentración. - Establecer por lo menos tres diferencias y tres semejanzas experimentales entre la curva espectral y la curva de calibración. Es recomendable utilizar guantes. bata y botas para evitar infecciones al no conocer los factores de riesgo. D.015 y 1. los límites mínimos y máximo de detección son: 0. podría aplicar la determinación de hierro por espectrofotometría. lo ideal es que se encuentre limpio y esterilizado. Como procedería para el cálculo de la concentración de las dos muestras objeto de la evaluación. A. 2) Se puede usar varias muestras para ambos cálculos. Los frascos más adecuados son los de vidrio por lo que algunos materiales pueden alterar la muestra. gafas. En la muestra con mayor absorbancia se podría deducir que la presencia de hierro es muy concentrada por lo cual se diluirá en agua destilada o puede haber presencia de sólidos y materia orgánica que desvían la luz Mencione y explique en que otro campo de aplicación. Lo mejor es tomar la muestra lo más lejos posible de la orilla. mucho mayor a la precisión. anemia por ausencia de hierro y hemocromatosis por acumulación de hierro en el organismo. CONCLUSIONES Se realizó exitosamente la medición de concentración de hierro en una muestra del humedal Juan Amarrillo. Precisión Exactitud 1) Sus resultados se pueden colocar en porcentaje. caudal. el frasco debe mantenerse estable para que el agua no se contamine con lo residuos del fondo. Se realizaría un filtrado para retirar la materia orgánica y partículas sólidas que entorpecen la medición y paso de la luz en la técnica espectrofotométrica. tapabocas.251. procurando no remover el fondo y evitando los remansos o zonas de estancamiento.989. Colocar el frasco con un angulo de 45o a la dirección contraria hacia la que corre el agua. E. En la determinación de hierro en la sangre para conocer su concentración y determinar enfermedades como la Mencione y explique 5 aspectos que deben tenerse en cuenta para llevar a cabo un muestreo representativo y selectivo en la determinación de hierro por espectrofotometría. C. en la precisión solamente restamos a 100 la desviación estándar.pequeños - Semejanzas De qué manera procedería usted si una muestra de agua en la determinación de hierro por espectrofotometría contiene altos contenidos de materia orgánica y presenta un color oscuro. además de aguas. distancia a la orilla. por consiguiente se podría diluir la muestra en agua destilada para que se pueda aclarar y al hacer la medición pueda pasar la luz. etc. B. En la muestra con menor absorbancia seguramente el nivel de hierro es casi nulo y la muestra no presentaría sustancias que absorban la luz y se podría agregar más muestra para aumentar la concentración. 3) Entre más exacto sea el resultado al valor verdadero más exacto son los resultados Dos muestras de agua a las cuales se les pretende evaluar hierro por espectrofotometría manifiestan valores de absorbencia de 0.005 y 2. Tener en cuenta factores como: profundidad. 9 . 10 . Departamento de química. Se concluye que al finalizar la práctica se pudo calcular la concentración de hierro mediante la técnica espectrofotométrica en una muestra real. BIBLIOGRAFÍA Universidad de América. Facultad de ciencias y humanidades. Al terminar este laboratorio se aprendió a manejar el equipo de espectrofotometría teniendo en cuenta la calibración adecuada que se debía hacer para las mediciones necesarias. reconociendo la importancia de esta para el procesamiento de muestras. Se aprendió a desarrollar la preparación de estándares “Stock” como una solución madre para la aplicación en el laboratorio. Manual de laboratorio de química inorgánica experimental industrial. teniendo en cuenta los reactivos necesario para esta y que aporte químico realizan a la solución.aplicando apropiadamente las técnicas y protocolos de muestreo. HIDROXILAMINA Y ACETATO DE SODIO. Fuente: Camila parra. 11 . FOTOGRAFÍA 2. FOTOGRAFÍA 1. FOTOGRAFIA 3.10 FENANTROLINA. PREPARACION DE MUESTRA PARA LA TECNICA ESPECTROFOTOMETRICA.ANEXOS Fuente: Camila parra. Fuente: Camila parra. MEDICION A 400 nm EN EL ESPECTROFOTÓMETRO. PATRONES DE HIERRO CON 1.