Universidad Andrés BelloFacultad de Medicina Departamento de Ciencias biológicas Laboratorio de Biología celular BIO 035 Trabajo Práctico n º 4: Componentes químicos de la célula Alumnos: Vanessa García Camila Gómez Alan Reinoso Valeria Ulloa Sección: 2 Profesores: Verónica Noches Daniel Bustamante Introducción 26-05-2015 Esta es de solo una hebra y transforma la información genética del ADN en una proteína. En estos hidratos de carbono se forma el enlace glucosídico. ácido 3desoxirribonucleico. Los ácidos nucleicos. ambos unidos por enlace fosfodiester y encargadas del flujo de información genética. Las proteínas tienen diversas funciones: permeabilidad. está el ARN. están formados por monómeros llamados aminoácidos que se unen por un enlace peptídico NH 3 +¿ (covalente) que se forma entre el grupo carboxilo (COO-) y el grupo amino ( ) por la eliminación de una molécula de agua. para poder obtener la conformación final [2]. los lípidos y ácidos nucleicos.A simple vista parece difícil aceptar que los seres vivos sean simples sistemas químicos. Tienen la capacidad de almacenar energía y principalmente constituyen a las membranas. azúcar ribosa. Existe el reactivo Somogyi. que hará reaccionar solo a proteínas. también contiene iones inorgánicos (sales minerales) y agua. azúcar desoxirribosa. líquido o gaseoso como describe la química. pero si con otros reactivos tales como el éter. oxígeno. Sabemos que la mayoría de los seres vivos están compuestos por una gran cantidad de carbono (C) [1]. por sus diversas formas. hidrógeno y nitrógeno principalmente. Los lípidos son moléculas insolubles. estos se unen a proteínas o a lípidos para formar glicoproteínas o glicolípidos respectivamente. Los niveles de estructura son determinados por el enlace disulfuro. que se polimerizan formando moléculas más complejas a través de la deshidratación (eliminación de agua) llamados oligosacáridos. por su comportamiento determinado y por la capacidad de crecer y reproducirse que no perteneces a un mundo sólido. reguladoras. Esta es de dos hebras y es la principal molécula de herencia. También están los polisacáridos que son moléculas de almacenamiento de energía y componentes estructurales de la superficie celular. ácido ribonucleico. Los hidratos de carbono. motoras entre otras. almacena información de los genes y ARN. etc. quién reacciona solo con los monosacáridos. se componen de carbono. benceno. Pero la principal es la enzima. reconocedoras. posee dos tipos de macromoléculas que están formadas por nucleótidos. Las proteínas contienen carbono. transportadoras. Estos no reaccionan con el agua. además participan en la señalización celular. regula la velocidad en una reacción química. En estos hidratos de carbono se forma el enlace glucosídico. Los más simples son los monosacáridos.Los compuestos orgánicos son cuatro grandes grupos: los hidratos de carbono o glúcidos (carbohidratos). . y el reactivo Lugol reacciona solo con los polisacáridos. con su capacidad de catabólica. Hay un reactivo llamado Biuret. Por otro lado está el ADN. las proteínas. es decir. o poco solubles al agua. Cada uno de estos contiene carbono en su composición química. hidrógeno y oxígeno. cloroformo. cloruros. Diferenciar cuales sustancias reaccionaron o no reaccionaron a ser sometidos a distintos reactivos. para realizar un sinfín de observaciones en cuanto a los reactivos que harán reaccionar a diversas sustancias. potasio y magnesio. tales como. Saber justificar los resultados obtenidos. diversos reactivos ayudan a identificar específicamente moléculas. . Utilizar de manera efectiva los reactivos.Por otra parte están las sales minerales que son moléculas inorgánicas. etc. A continuación en este informe. fosfatos. el tiempo. regulación. ya sean distintas o iguales dentro de una célula u otro elemento. Principalmente participan en la regulación de la presión osmótica determinado por la concentración de la disolución. que ayuda a que una reacción ocurra efectivamente. y saber su composición y por qué hacen reaccionar a tales sustancias. sodio. Y responder tales preguntas como. aunque están en menor cantidad que otros componentes. ¿Influye la conformación del reactivo para que la sustancia utilizada cambie su color? ¿Por qué hay diferencias de tonos con las sustancias que reaccionaron de forma positiva? También se obtendrán datos que nos ayudarán a entender que hay otros factores como la temperatura. e interpretarlos para una mejor compresión. Todo esto deriva en una hipótesis. Objetivos: Reconocer moléculas orgánicas e inorgánicas de acuerdo a los elementos que la componen. tienen funciones demasiado importantes para realizar las reacciones metabólicas. carbonatos de calcio. se aprovechará toda la información obtenida. parte de los seres vivos. el tipo de reactivo. en todas las actividades. en caso de que si reaccione. para dos tipos de identificaciones: a) Identificación de cloruros: Al tubo 1 añadir 2ml de CaCl2 (Cloruro de Calcio) y 1ml de Nitrato de plata. Un tubo con 1ml de agua destilada. Primero se toman dos tubos de ensayo. se agrega a cada uno de ellos 1ml del reactivo Somogyi y luego agregar 1ml de cada muestra que se pide. específicamente un polisacárido a través de la reacción de Lugol de color marrón rojizo (formado por una mezcla de yoduro de potasio con yodo). Actividad 3: Se procederá a reconocer lípidos. según la solubilidad. y en cada uno agregar 1ml de aceite. Actividad 1: a) Se hace un reconocimiento de hidratos de carbono. luego en el tubo 1 agregar 1ml d agua y en el tubo 2 agregar 1ml de aceite. Primero se preparan 5 tubos de ensayo colocados en una gradilla. Actividad 2: Reconocimiento de proteínas a través de la reacción Biuret (formado por sulfato de cobre. b) Identificación de calcio: Al tubo 2 añadir 2ml de Oxalato de amonio. A todos estos tubos agregar 1ml de Biuret. trato de doble sodio y potasio en medio alcalino). CaCl2 (Cloruro de Calcio) y 1ml de . Agitar para ver la variación de color en los tubos de ensayo. se harán reaccionar sustancias con un respectivo componente. en el tubo 1 agregar 1ml de agua destilada. que hará diferenciar si la sustancia reaccionó o no reaccionó. Se agita fuerte mente para que se logre mezclar. se agita para que se haga reaccionar. el segundo con 1 ml de solución glucosa 1%. en el tubo 3 agregar 1ml de clara de huevo. en el tubo 2 agregar 1ml de solución glicina 1%. Se agitan y luego de estar colocados en la gradilla. otro con 1ml de solución NaCl 1% y el ultimo con 1ml de leche. otro con 1ml de solución glucosa 1%. El procedimiento es igual al anterior. el primero con 1ml de agua destilada. El color de reacción con una sustancia es azul intenso. luego observar las micelas que quedan en uno de los tubos. el tercero con 1 ml de solución almidón 1%. El procedimiento consiste en preparar 5 tubos de ensayo. Actividad 4: Se reconocen sales minerales. el cuarto con 1ml de solución de NaCl 1% y el último con 1ml de leche. El precipitado debe quedar con color rojo ladrillo. se preparan 5 tubos de ensayo. específicamente un monosacárido mediante la reacción de Somogyi de color azul intenso (basada en la oxidación de azúcares y sustancias reductoras por compuestos orgánicos cúpricos en solución alcalina). después de rotular cada tubo. en el tubo 4 agregar 1ml de leche y en el tubo 5 agregar 1ml de solución NaCl 1%. otro con 1ml de solución almidón 1%. se lleva al baño termorregulado a 90°C y se dejan por 3 minutos. A estos 5 tubos se le agregan 10 gotas de Lugol. b) Se hace un reconocimiento de hidratos de carbono.Materiales y Métodos En general. solución almidón y solución NaCl. tubo 2. se coloca un trozo de hígado de pollo más agua para hervir la muestra. no hubo ningún tipo de reacción. se coloca un trozo de H 2 O2 hígado de pollo más 1ml de Peróxido de Hidrógeno ( ). al reaccionar (+) se denota hacia un color rojo ladrillo. Observar y registrar resultados. y en la identificación de calcio debería dar un precipitado blanco cristalino. Resultados Actividad 1: Reconocimientos de hidratos de carbono. en la identificación de cloruros debería dar un precipitado blanco de aspecto lechoso. se retira el agua sobrante y se le agrega 1ml de Peróxido de H 2 O2 hidrógeno ( ). En la activación de la enzima. Actividad 5: Reconocimiento de enzimas (moléculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones químicas) específicamente la presencia de Catalasa.Agitar cada uno de los tubos para obtener una mezcla. Primero se utilizarán 2 tubos de ensayo. se coloca en el baño termorregulado a 63°C por 47 minutos (ya que el termorregulador se apagó en un momento). Luego de sacar el tubo del baño termorregulado. necesaria para el metabolismo celular. Todo esto ocurrió al calentar los tubos de ensayo 3min a 90°C. uno para la activación de la enzima y otro para la inactivación de la enzima. a) Tabla N°1: Reacción de Somogyi (El color de Somogyi es azul. enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales. TUBO 1 2 3 4 5 MUESTRA Agua destilada Solución glucosa 1% Solución almidón 1% Solución NaCl 1% Leche REACCIÓN + + COLOR Celeste Naranjo oscuro Celeste Celeste Naranjo claro Observación: En el agua destilada. al no reaccionar (-) queda hacia el color azul). por otro lado la glucosa es un monosacárido propiamente tal y la leche también reaccionó. . tubo 1. observar y registrar los resultados. Para la inactivación de la enzima. ya que este reactivo solo era para monosacáridos. Fue el caso de la muestra de Clara de huevo. TUBO 1 2 3 4 5 MUESTRA Agua destilada Solución glicina 1% Clara de huevo Leche Solución NaCl 1% REACCIÓN + + - COLOR Celeste Azul Azul-violeta Azul-violeta claro Azul Observación: Se observa que solo dos tubos de ensayo contenían soluciones reaccionadas. Actividad 2: Reconocimiento de proteínas. Tabla N°4: Solubilidad. Actividad 3: Reconocimiento de lípidos. por su espesor o color inicial. bajaron su intensidad de color. TUBO 1 2 MUESTRA Aceite + Agua Aceite + Éter REACCIÓN + MEZCLA No se logra mezclar Si se logra mezclar Observación: En el tubo 1 ambas sustancias se mantuvieron separadas. TUBO 1 2 3 4 5 MUESTRA Agua destilada Solución glucosa 1% Solución almidón 1% Solución NaCl 1% Leche REACCIÓN + - COLOR Naranjo Naranjo Verde Oscuro (hacia el azul) Naranjo Naranjo Observación: Se logró observar que la única muestra que reaccionó fue la solución de almidón. Tabla N°3: Reacción de Biuret. Los demás tubos con las diferentes muestras mezcladas con Lugol.b) Tabla N°2: Reacción de Lugol (El color del Lugol es marrón rojiza. dando una sustancia espesa de color azulvioleta. al reaccionar (+) se denota hacia un color azul intenso. (La muestra que reacciona (+) debe dar un tono azul-violeta). al no reaccionar (-) queda en el color inicial). dieron un color azul-violeta pero más claro. ya que es un polisacárido efectivamente. La glicina no reaccionó a pesar de ser un aminoácido. siendo posible . al igual que este la muestra de Leche. Reactivo: Peróxido de hidrógeno. pero al dejarlo en reposo un rato. Reactivo: Cloruro de calcio TUBO 1 2 MUESTRA Nitrato de plata + CaCl2 Oxalato de amonio + CaCl2 MEZCLA Color blanco. nuevamente la capa de aceite emergía sobre el agua. Tabla N°5: Reconocimiento de Sal y Sodio. en esta misma solución le logran apreciar unas figuras blancas apelmazadas en el fondo del tubo de ensayo. Actividad 4: Reconocimiento de sales minerales. Actividad 5: Reconocimiento de Enzimas. . logrando una solución homogénea. Observación: El tubo 1 contiene una solución espesa de color blanco. aspecto espeso Solución homogénea color blanco translucido.apreciar una capa de aceite sobre el agua. En el tubo 2. En el tubo 2 se aprecia cómo el aceite y el éter se logran mezclar fácilmente. la capa de aceite se deshizo pero solo para formar pequeñas micelas que flotaban entre el agua sin lograr mezclarse. Al dejar en reposo. Tabla N°6: Activación/Desactivación de enzima Catalasa. En el tubo de ensayo 2 con el trozo de hígado (ya cocido) de un color rojo pálido produce una pequeña cantidad de espuma. después de agitarlo se ve inmediatamente una solución homogénea blanca translucida. TUBO 1 MUESTRA Hígado de pollo (crudo) + H 2 02 MEZCLA Gran cantidad de espuma 2 Hígado de pollo (cocido) + H 2 02 Pequeña cantidad de espuma Observación: En el tubo de ensayo 1 se produjo inmediatamente una gran cantidad de espuma que rebalso el tubo de ensayo en pocos segundos. Al agitar el tubo. ya . ya que si se calienta el tubo. y el yodo se libera. el reactivo produce un precipitado de óxido cuproso e hidrato cuproso. para el reconocimiento de hidratos de carbono. se obtuvo una reacción positiva con la muestra de almidón. esto se debe a que las espiras del almidón se "desarman". El color que dan los polisacáridos con el Lugol I I (solución de 2 y de IK) se debe a que el 2 ocupa espacios vacíos en las hélices de la cadena de unidades de glucosa. Las azúcares con un grupo aldehído libre reducen. tuvimos como fin el reconocimiento de hidratos de carbono. que contienen un grupo amino y un grupo carboxilo. Durante la actividad 2 se reconocieron proteínas. En la actividad 1. ya que estos no contienen hidrocarburos en su composición. ya que tiene una gran afinidad con el reactivo. por decirlo de una manera. Durante la discusión se podrá responder a todas las inquietudes. Así los resultados fueron. formado por un enlace covalente. nos cuestionamos el cómo influyó Influye la conformación del reactivo en el cambio de color de la sustancia o porqué hay diferencias de tonos en las sustancias que reaccionaron. específicamente un polisacárido. formado principalmente por sulfato de cobre e hidróxido de sodio (Cu(OH)2)[3]. respondiendo a una de las preguntas de esta actividad con respecto a su capacidad reductora. se utilizó reactivo de Lugol. Los monosacáridos son los monómeros de azúcar que contienen grupos hidroxilo. El medio alcalino de la solución lo entrega el hidróxido de sodio. El almidón aunque es un hidrocarburo no presentó reacción positiva ya que es un polisacárido. Las muestras pudieron ser identificadas por dos reactivos. como el reactivo de Somogyi. quienes están conformadas por aminoácidos. puesto que ceden electrones a las moléculas que la oxidan aceptando estos electrones. [5] Volviendo a los resultados. las espiras se reorganizan y se vuelve a ver el color. Por otro lado. por lo tanto no hay grupos libres para reaccionar con este. Es este el enlace que se detecta por medio del reactivo de Biuret.Discusión Al comienzo de este trabajo. Una vez frío. Somogyi para los monosacáridos y Lugol para los polisacáridos. ya que solo poseen monosacáridos y con el agua y NaCl tampoco reaccionan. Está formado por enlace peptídico. En presencia de un monosacárido y actuando con calor. reacción positiva para la glucosa y la leche quien posee la lactosa. Este complejo es sensible a la temperatura. Esta reacción se puede ver gracias a tinciones alcalinocuproso. formando un compuesto de inclusión que altera las propiedades físicas [4]. se le agrega además tartrato doble de potasio y sodio para evitar la precipitación del hidróxido. el color se pierde. en donde interactúa el grupo amino de un aminoácido con el grupo carboxilo del aminoácido que sigue. cuyos colores se encuentran entre el rojo ladrillo y el amarillo. El enlace formado en esta reacción se conoce como enlace glucosídico y se establece entre el carbono del grupo hidroxilo de una unidad y el carbono del grupo aldehído. Estos azúcares simples se polimerizan a través de reacciones de deshidratación para formar oligosacáridos o polisacáridos. no ocurrió así mismo con la glucosa y la leche. y existe un azúcar presente en esta. cuál es. El hidróxido de potasio no participa en la reacción. debido a que esto nos permitirá comprender de mejor manera por qué de las distintas reacciones obtenidas en los experimentos. que este al entrar en contando con el calcio. aparte del enlace covalente que se genera entre los mismos carbonos del lípido. ya que no se logra una solución homogénea. que al mezclarse con el reactivo le baja su intensidad de color. Esto se explica ya que los lípidos son insolubles. que como se dijo anteriormente son biomoléculas inorgánicas. En esta actividad 4. quien solo es un aminoácido y no forma ningún enlace. el cual se intentó disolver en agua ( ). Por su parte el agua tiene moléculas que son polares. ya que la clara de huevo tiene una falta de coloración y toma más rápido el color del reactivo. pero son fundamentales para la célula tanto en su conformación de sal o como un ion disuelto. dando un resultado negativo. Además podemos responder la pregunta de intensidad del color. En la actividad 3. la función de la enzima catalasa de la actividad 5 encontrada en la muestra de hígado de pollo. en el primero observamos al nitrato de plata el cual al entrar en contacto con el ion cloruro forma un compuesto insoluble detectando al cloro. tornándose azul-violeta. en este caso el H2O aceite. ya que no se componen de una cadena de carbono. cambia el color cuando entra en contacto con la sustancia. péptidos que presenten enlaces pepiticos (2 o más) en una muestra. Por otro lado nos dimos cuenta que los lípidos son solubles en disolventes orgánicos. La enzima catalasa es una enzima antioxidante. pero proporciona el medio alcalino necesario. como en este caso el éter.que el este identifica proteínas. En el tubo . quienes son polímeros de aminoácidos formando enlaces peptídicos. También en estas muestras hubo una intensidad entre la clara de huevo más clara que la leche. mientras más enlaces haya. por otra parte observamos al oxalato de amonio. Con respecto a la posición de las sustancias en reposo. se buscaba la identificación de sales minerales. mayor es la intensidad del color en la preparación. es que según estos comportamientos de las sustancias. lo cual hace que estas moléculas estén unidas unas a otras por una fuerza de atracción muy fuerte. que es una sustancia apolar al igual que el aceite. por otro lado la leche ya viene con un color blanco. el éter tampoco es soluble en agua. Las reacciones de esta enzima ayudan a descomponer el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. debido a que el peróxido de hidrogeno actúa como agente oxidante (nocivo para nuestro organismo) [8]. Luego de reaccionar con los enlaces peptídicos. que es explicada por la cantidad de enlaces presentes en la muestra. Un detalle que también se debe aclarar. al contrario de la glicina. por lo tanto ambas sustancias si pueden mezclarse sin problemas. estaba el propósito de identificar la solubilidad de lípidos. Antes de analizar los resultados de los experimentos debemos entender. el aceite se posa en la superficie de la mezcla porque tiene menor densidad que el agua. [7] Estos tienen una mínima por no decir nula interacción con el agua. [6] Así pudimos ver en la muestra de clara de huevo y leche. forma un compuesto insoluble precipitando a este último. que es producida naturalmente en los organismos vivos. por su conformación que lleva un enlace covalente. Esta identificación de sales minerales fue con dos compuestos diferentes pero manteniendo al cloruro de calcio como constante. esto significa que tienen un polo positivo y uno negativo. reaccionando con el peróxido de hidrogeno. este práctico de componentes químicos de la célula. o puede ser con otras sustancias. color. el que haya muestras que reaccionan mejor que otras. que influyen en el resultado de una solución compuesta por una muestra y un reactivo. etc. [9] Conclusión A modo de síntesis. entre otros. es factible por reactivos específicos. proteínas. la activación o desactivación de una encima. que hacen posible esta identificación gracias a su composición química. tiempo. densidad. cumplió con todos los objetivos esperados por parte de los participantes. se le agregó peróxido de hidrogeno. . activación/desactivación de enzimas. no con la misma intensidad que en el tubo 1. y respondidas nuestras preguntas del inicio del informe. ya que la identificación ya sea de hidrocarburos. y que influye en una mayor reacción la temperatura. La espuma presente corresponde al desprendimiento de oxígeno que provoca el reactivo. En el tubo 2. Junto con toda esta información damos por afirmada nuestra tesis. ¿Por qué ocurrió esto? Esto se debe a que el hígado de pollo no hirvió en su totalidad lo que provoco que la enzima catalasa no se desnaturalizara completamente. con un trozo de hígado cocido (en un baño termorregulador a una temperatura de 63°C por 47 min). debido a que la enzima catalasa hallada en el tejido del hígado reacciona con el peróxido de hidrogeno. se observa una elevada producción de espuma además de un leve calentamiento en el tubo de ensayo. al momento de agregarle el peróxido de hidrogeno a la muestra de hígado esta reacciono. al someter el trozo de hígado de pollo a un cambio físico como es agregar peróxido de hidrogeno.uno. como lo hicimos en este practico. pero igual produjo un poco de espuma. etc. A través de todas las actividades pudimos comprender que hay factores como la temperatura. solubilidad de lípidos. lo que sirve para poder distinguir diferentes estructuras químicas de muestras. También que existen diversos reactivos que reaccionan con muestras orgánicas e inorgánicas específicamente. hidrógenos. por ejemplo la cantidad de proteínas que posee. La reacción obtenida al realizar esta fase del experimento no fue 100% satisfactoria pues. pretendiendo que la enzima catalasa fuera desnaturalizada con el fin de no producir reacción al agregarle el reactivo. tiempo. (pág 3) [4] http://www.academia. (pág 2) [3] Universidad Andrés Bello.slideshare.pdf Fecha ingreso: 25/05/2015 [9] http://www.edu/6918162/Bioqu%C3%ADmica Fecha ingreso: 25/05/2015 . [8] http://www2.com/Ciencia/Fundamentos-De-La-Biuret/1385362. editorial Paramericana. pág (175). Laboratorio de biología celular bio035.com/sample_labs/CMV-03-enigma. ELIZCOM S.net/sextobtres/informe-de-extraccion-e-identificacin-decarbohidratos Fecha ingreso: 22/05/2015 [6] http://clubensayos. Introducción a la biología celular. [2] Universidad Andrés Bello. 2015. 2015. pág (39). Guía N°4 Componentes químicos de la célula. 2006.academia. Experimentos de Química Orgánica.A.edu/6347596/Identificaci %C3%B3n_de_Carbohidratos_a_trav%C3%A9s_de_reactivos Fecha ingreso: 20/05/2015 [5] http://es. Guía N°4 Componentes químicos de la célula. Laboratorio de biología celular bio035.S.html Fecha ingreso: 25/05/2015 [7] Anderson Guarnizo Franco y Pedro Nel Martínez Yepes.vernier.Bibliografía [1] Bruce Alberts y Dennis Bray.
Report "Informe 4 (Componentes Qcos de La Celula)"