PRACTICA DE LABORATORIO I.DATOS GENERALES o Institución: o Asignatura: o Nombre del laboratorio: o Titular: o Clase : o Alumno: o Lugar y fecha: Universidad `Pedagógica Nacional “Francisco Morazán” Bioquímica Identificación de proteínas Lic. Lidis Torres Laboratorio de Ciencias Manuel Dionicio Montes San Pedro Sula 21abril 2008 II. INTRODUCCION Esboce con sus propias palabras ,considere el contenido otras bibliografías y el desarrollo de la practica. III. OBJETIVOS 1. Reconocer la presencia de proteínas en diferentes sustancias utilizando la prueba de Biuret y la reacción xantoproteica. 2. Observar la desnaturalización de la albúmina del huevo. IV. MATERIALES 1. Tubos de ensayo (9) 2. Agua destilada 3. Acido nítrico 4. Acido acético o vinagre 5. Almidón 6. Gradilla 7. Solución de hidróxido de sodio (NaOH) al 20% 8. Solución de sulfato de cobre(II) (Cu SO4) AL 1% 9. Probeta de 5 o 10 ml 10.Queso crema 3. Lávate con abundante agua si te pones en contacto con este acido.Goteros(3) 14. VII. Precaución: el acido nítrico es corrosivo para su piel y telas. especialmente en presencia de tirosina. Seguir estrictamente los procedimientos indicados en su práctica. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas. que sirven por tanto para su identificación.Mechero 18. y el cobre en un medio fuertemente alcalino.11. destaca la reacción de Biuret. PROCEDIMIENTO . La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de cobre (II) y un álcali (hidróxido de sodio). Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira un color anaranjado oscuro.Leche 13. Cualquier accidente comunícalo al encargado de laboratorio. La reacción xantoproteica es debida a la formación de un compuesto aromático nitrato de color amarillo.Algodón 12. 1. 6. 4. cuando las proteínas son tratadas con acido nítrico concentrado.Pelos blancos de perro 17. 2. MEDIDAS DE SEGURIDAD Uso adecuado del equipo de laboratorio Traer puesta su gabacho u uniforme de laboratorio Realizar las medidas con exactitud No contaminar las sustancias( usar equipo indicado para la manipulación de sustancias) 5. pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptidico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. se coordina con los enlaces pepiticos formando un complejo de color violeta(Biuret) cuya intensidad de color depende del numero de enlaces pepiticos presentes en la proteína. Dejar aseado y ordenado el equipo y sala de laboratorio VI.Clara de huevo 15. TEORIA RESUMIDA Entre las reacciones coloreadas especificas de la proteína.Fósforos V.Uñas 16. y el aceite subirá debido a su menor densidad. ALGODÓN ABSORVENTE 4. Agua mas aceite Agua Gasolina Gasolina mas aceite Enumera cinco tubos de ensayo del 1al 5 añade la siguiente sustancia en cada tubo 1. Observa la formación de gotitas o micelas y deja en reposo. Se vera como el aceite se ha disuelto en gasolina y en cambio no lo hace en el agua. ACIDO NITRICO 1. UÑAS 2. PELOS BLANCOS DE .Toma dos tubos de ensayo y deposita en uno de ellos 3cc de agua y en el otro 3cc de gasolina u otro disolvente orgánico (éter). CLARA DE HUEVO 3. Añade a cada tubo 1cc de aceite y agita fuertemente. Añade 5 gotas de acido nítrico concentrado en cada tubo de ensayo. tubo 1 2 3 4 5 sustancia Uñas clara de huevo Algodón pelos blancos de perro queso crema color con el hno3 concentrado presencia de proteínas si no 2. calienta por un minuto. observa y anota los resultados en la siguiente tabla. Tubo n0 1 Tubo no 2 huevo) 4 ml de agua destilada solución de albumina de huevo (4 ml de agua y 2 ml de clara de Tubo no 3 suspensiones de almidón (almidón con agua). Tubo no 4 4ml de leche Agita fuertemente los tubos 2 y 3 .1 2 3 4 5 2. Enumera cuatro tubos de ensayo del uno al cuatro añade las siguientes sustancias a cada tubo de ensayo. ácidos alcohol. Agita para que se mezcle bien. COLOR DE LA PRUEBA DE BIURET PRESENCIA DE PROTEINAS SI NO . Clara de huevo ₊ Na OH gota a gota CuSO4 OBSERVA LOS RESULTADOS Y ANOTALOS EN LA SIGUIEN TE TABLA. SUSTANCIAS AGUA DESTILADA SOLUCION ALBUMINICA SUSPENSIÓN DE ALMIDON Y LECHE ALMIDON Coagulación de proteínas Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria. forman con el agua soluciones coloidales. Al contenido de cada tubo de ensayo añade 5 gotas de solución de sulfato de cobre y 5 gotas de solución de hidróxido de sodio (prueba de Biuret).3. etc. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 grados centígrados o al ser tratadas con soluciones salinas. Calor Clara de huevo Gotas de acido acético Formación de coágulos VIII. Coloca en un tubo de ensayo un apequena cantidad de clara de huevo. Añade 5 gotas de acido acético y calienta el tubo a la llama de un mechero. 2. para conseguir mas volumen puede prepararse para toda la clase una disolución de clara de huevo en agua de forma que quede una mezcla aun espesa. ¿Qué pruebas utilizaste para identificar proteínas? _________________________________________________________________ _______ 2. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN 1. .Para la coagulación de las proteínas se puede utilizar clara de huevo. Señala cuales de los siguientes alimentos contienen proteínas. 1.____________________________________________________________ ________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ ______________ 3. Indica 5 ejemplos de proteínas que contenga tu organismo y menciona las funciones que desempeña cada una de ellas. ¿Qué coloración da la reacción de Biuret? ¿una proteína coagulada podría dar la reacción de Biuret? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ________________________ CONCLUSIONES _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ IX. BIBLIOGRAFIA . Un huevo hervido Carne de res Manzanas Pan de trigo Pescado Banano Frijoles Queso Leche 4. ¿Como se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ________________________ 5.