PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS.Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición 1. OBJETIVO PRT-711.02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 1 de 6 Cuantificación de hierro en harinas y alimentos sólidos por espectrofotometría de absorción atómica y vía seca. 2. CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE Aplicar este procedimiento a muestras de harinas o alimentos sólidos con bajo contenido graso recepcionadas en la Sección Química de Alimentos y Nutrición. 3. FUNDAMENTO La determinación del contenido de iones metálicos totales, tales como hierro, calcio, cobre, magnesio y zinc se realiza por espectrofotometría de absorción atómica con aspiración en llama aire/ acetileno, tratando previamente la muestra para reducir la materia orgánica vía seca y convertir el metal unido orgánica o inorgánicamente, así como disuelto o particulado a su forma de metal libre. 4. REFERENCIAS 4.1. Official methods of analysis AOAC 15 th edition, vol 2, pág 1106,1107, año 1990 5. TERMINOLOGÍA Vía seca: Tratamiento de muestras a altas temperaturas en una mufla para destrucción de materia orgánica. Tapar la cápsula con vidrio reloj. desionizada 6.3 7. 6. PRT-711.1.14 Estándar de Hierro.02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 2 de 6 MATERIALES.13 Ácido nítrico 65% p.1.1.9 Homogeneizador de muestras 6. 6. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición 6.4 Espátula.15 Lámpara de hierro 6.7 Campana de extracción de gases 6.1.1.1 Cápsulas de porcelana para digestión de 25cm de diámetro 6.1.1.8 Espectrofotómetro de absorción atómica con llama 6.1.1.11 Agua para análisis.1.1.1. Colocar y precalcinar en la placa calefactora a una temperatura inicial de + 100°C Luego incrementar la T° a 250°C.1.1 mg 6. hasta que la muestra se encuentre carbonizada.a.1. plumón permanente 6.5 Preparación de la Muestra Homogeneizar la muestra y pesar + 3 g de la muestra en cápsula de porcelana. 7.3 Piseta 6. Técnico del laboratorio efectúa el resto del procedimiento. INSUMOS Y EQUIPOS 6.PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS.12 Ácido clorhídrico 37 % p. Llevar la cápsula con la muestra precalcinada a la mufla y someterla por 8 horas a T° 550°C hasta cenizas blancas.2 Matraces aforados de 50 mL 6.1.4 7. realiza los cálculos e informa resultados.1 7.2 7.6 Balanza analítica sensibilidad 0. Profesional del laboratorio es el encargado de realizar el análisis HPLC.1.1.a 6.1.1.5 Elementos de seguridad como guantes y anteojos 6. Materiales 6.1.1. 7.16 Micropipeta de 100ul a 1000 ul 7.1.1. .10 Plancha calefactora 6. DESARROLLO El ingreso de la muestra para su análisis debe cumplir con el Instructivo de Aceptación o Rechazo de muestras IT 711-02-065. toalla absorbente. 1. 7. 7.8 La solución de la muestra esta lista para medir.1 Leer en triplicado cada muestra y cada punto de los estándares y promediar las lecturas.3 Determinación por espectrofotómetro de llama Condiciones espectrofotométricas 7.3.4 T° de ignición 800°C 7. Curva de calibración de estándares 7.1 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.2.2 nm 7.4 Cuantificación de Hierro en muestras Ingresar al equipo de Absorción Atómica en método Hierro en harinas que contiene la curva de calibración obtenida de concentración (C) en ug/mL.4 Estándar de 1 mg/L: tomar 0.2.3.2 Estándar de 5 mg/L: tomar 0. calcular el coeficiente de correlación lineal e intercepto e interpolar la muestra para cuantificar el resultado de la absorbancia vs concentración.2 Longitud de onda 248.7 Luego redisolver el residuo con 5mL de ácido clorhídrico 1+1 y dejar 5 min..6 Retirar de la mufla. 7.3.5 T° de atomización 2300 °C 7. enfriar y aforar a 50 mL.1 Estándares de hierro solución concentrada de 1000 mg/L.02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 3 de 6 7. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición PRT-711. 7.2 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.3 Estándar de 2 mg/L: tomar 0.6 Corrector de background on Realizar la curva de calibración utilizando el método de cálculo con estándar externo integrado en el equipo. enfriar y agregar 5 mL de ácido clorhídrico 1+1 a la cápsula con cenizas blancas y poner en baño Maria hasta casi sequedad.1 Tipo de llama aire/acetileno 7.PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS. 7.3. 7. 7.3.2. . 7.1.3.4. enseguida adicionar agua desionizada. Valor C (ug/mL). 7.3 Ancho de slite 0.5 mL del estándar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.3 nm 7.2.2.1. Cálculo e informe de resultados PRT-711.Lectura del estándar como control por cada diez muestras inyectadas . utilización de materiales de referencia certificados y patrones de referencia certificados.Control de blanco al inicio de las lecturas .02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 4 de 6 cxv Hierro mg /Kg = -------------a Donde: c = concentración en ug/mL obtenidos por la interpolación en la curva de calibración de la muestra.Ajuste del cero del equipo . según disponibilidad.11 ug/mL Limite de cuantificación: 0. a) Nivel I: Ensayos de intercomparación. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición 7.38 ug/mL Informar mg/Kg de Hierro sin decimal. b) Nivel III.Control de estándar de concentración conocida . Durante el desarrollo de la serie de trabajo se incluye: .PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS. v = volumen de la muestra final a = masa de la muestra en gramos Limite de detección: 0. Control de Calidad Se efectuarán controles sistemáticos y periódicos para comprobar la validez de los ensayos realizados con el método analítico recogido en este procedimiento. 02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 5 de 6 Identificación del registro Recuperación Tiempo retención y disposición Libro de Registro de En estante del Acceso Restringido Papel 5 años análisis Vitaminas Laboratorio Técnico y Profesional RG-711. Aditivos Harinas Aditivos y y Contaminantes Contaminantes Registro de En Estante del Acceso a Técnico y temperaturas Laboratorio de Profesional Laboratorio refrigeradores RG.Nutrientes. de Laboratorio Aditivos y Nutrientes.00-037 Nutrientes.00-001 Aditivos y y Contaminantes Contaminantes Registro preparación En estante del Acceso a Técnico y de soluciones de Laboratorio de Profesional Laboratorio estándares puros Nutrientes.PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS. termorregulados Aditivos y Aditivos y RG-711. de Nutrientes.00-034 Aditivos y y Contaminantes Contaminantes Papel 5 años Papel 5 años Papel 5 años . Aditivos RGG-700.00-045 Contaminantes Contaminantes Base datos En computador Acceso a Técnico y computacional del Laboratorio Profesional Laboratorio Programa Ministerial de Nutrientes. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición 8. Aditivos y Contaminantes. Aditivos y Aditivos y Contaminantes Contaminantes Laboratorio Nutriente Registro de En estante Acceso Restringido Papel 5 años temperatura Laboratorio Técnico y Profesional estufas/baños Nutrientes. Aditivos 711. de Nutrientes. Laboratorio Nutrientes. Contaminantes Archivador de En estante Acceso Restringido Papel 5 años Registro análisis de Laboratorio Técnico y Profesional hierro Nutrientes. de Nutrientes. Laboratorio Nutrientes. REGISTROS Almacenamiento Protección PRT-711. 00-035 Contaminantes y Jefatura de sección 9. de Nutrientes. Aditivos estándares RGG. Modificada Motivo del cambio Fecha Aprobación Almacenamiento Protección Revisión Nº 10.PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS. TABLA DE MODIFICACIONES Pág.02-159 Fecha emisión: 09/01/ 2008 Revisión: 0 Fecha revisión: 09/01/ 2008 Página 6 de 6 Recuperación Tiempo retención y disposición Registro preparación En estante del Acceso a Técnico y Papel 5 años de mezclas de Laboratorio de Profesional Laboratorio soluciones Nutrientes. ANEXOS No Aplica .Aditivos y y Contaminantes 700. Método Espectrofotometría de Absorción Atómica/Llama Sección Química de Alimentos y Nutrición Identificación del registro PRT-711.