INSTITUTO TECNOLÓGICO DEMORELIA DEPARTAMENTO DE INGENIERIA BIOQUIMICA ANÁLISIS INSTRUMENTAL TRABAJO DE UNIDAD REGLAS DE FRAGMENTACIÓN Dra. Elia Pérez Hernández ZAIRA ZYANYA RAMIREZ SOTO 1 INDICE INDRODUCCIÓN………………………………………………………………………………………………… 1. EL ESPECTRÓMETRO DE MASAS 2. REGLAS DE FRAGMENTACIÓN 2.1. Ruptura alquílica 2.2. Ruptura olefínica 2.3. Ruptura alílica 2.4. Ruptura bencílica 2.5. Ruptura en α con formación de ión onio 2.6. Ruptura heterolítica inducida por heteroátomos 2.7. Ruptura de retro-Diels Alder (RDA) 2.8. Reordenamiento de hidrógeno en posición γ inducido por dobles enlaces y heteroátomos (Reordenamiento de McLafferty) 2.9. Transposición radicálica (ciclohexanona) 2.10. Transposición de hidrógeno a través de un estado de transición de 4 miembros. 2.11. Retroadición 1,4 (Efecto orto) 3. FRAGMENTACIONES MÁS USUALES DE LAS DISTINTAS FUNCIONES ORGANICAS 3.1. Hidrocarburos saturados 3.2. Hidrocarburos insaturados 3.3. Hidrocarburos aromáticos 3.4. Alcoholes 3.5. Éteres y acetales 3.6. Aldehídos y cetonas 3.6.1. Aldehídos 3.6.2. Cetonas 3.7. Ácidos Carboxílicos y ésteres 3.7.1. Ácidos Carboxílicos 3.7.2. Ésteres 3.8. Amidas 2 el patrón de fragmentación resultante así como los iones residuales constituyen el espectro de masas. El proceso de ionización más común en análisis en fase gaseosa es el de ionización electrónica (EI). iones de la molécula intacta son producidos al pasar la solución por un campo eléctrico (electrospray ionization) o por bombardeo de partículas (fast atom bombardment) o por interacción con especies fotoexcitadas (matrix-assisted laser desorption). En la técnica clásica de impacto electrónico (electron ionization EI). 3 . electroforesis capilar. La detección de compuestos puede ser llevada a cabo con cantidades realmente pequeñas (algunos pmoles) de muestra y obtener información característica como el peso y algunas veces la estructura del analito. para cuantificar compuestos conocidos. Para compuestos no volátiles. y para elucidar la estructura y propiedades químicas de moléculas. Ya que las moléculas neutras difunden en forma aleatoria por la fuente de ionización. el espectro de masas de cada compuesto es único y puede ser usado como se “huella química” para caracterizar el analito. de cuadrupolo.INTRODUCCIÓN La Espectrometría de Masas es una poderosa técnica micro-analítica usada para identificar compuestos desconocidos. trampa de iones cuadrupolo. los datos pueden ser organizados en forma tabular o en formato de gráfica de barras para dar finalmente el espectro de masas de la muestra analizada. El proceso de análisis por espectrometría de masas comienza en llevar el compuesto a analizar a fase gaseosa. en el cual se transfiere energía a la molécula neutra en estado de vapor. Las muestras pueden ser introducidas al espectrómetro de masas usando una sonda directa o por entrada en lote (batch) para sólidos puros o líquidos volátiles. Los iones son analizados de acuerdo a su abundancia a lo largo de la escala m/z. algunas de las moléculas ionizadas del analito “explotan” en una variedad de fragmentos ionizados. trampa de iones magnética. Este proceso produce un ion con carga positiva y un electrón suelto. Durante el proceso de adquisición de datos provenientes del detector. Después de producir los iones. En principio. En todos los casos.) pueden entrar al espectrómetro de masas tan pronto como vayan saliendo. la muestra debe tener una presión de vapor de que 10-2 mmHg. Existen diferentes tipos de analizadores de masas: magnéticos. alguna forma de energía es transferida a las moléculas a analizar para afectar la ionización. debido a que las moléculas deben migrar por difusión desde el sistema de entrada hacia la cámara de ionización. solo una porción es ionizada. dándole suficiente energía para expulsar uno de sus electrones y de ese modo tener una carga residual positiva. cromatografía de líquidos. son separados por su valor m/z en el analizador de masas. Los iones tienen una carga eléctrica que les permite ser controlados por campos eléctricos. o tiempo de vuelo (time-of-flight). Analitos purificados por diferentes técnicas de separación (cromatografía de gases. La molécula ionizada puede tener energía excesiva que puede ser disipada a través de la fragmentación de ciertos enlaces químicos. etc. El rompimiento de varios enlaces químicos permite la producción de fragmentos de ion cuya masa es igual a la suma de las masas atómicas de un grupo de átomos que retienen la carga positiva durante el proceso de fragmentación. el siguiente paso es su análisis en el analizador de iones de acuerdo a su relación masa/carga (m/z). El sistema de entrada. fuentes de iones. Los espectrómetros de masas tienen siete componentes mayores: un sistema de entrada. Un espectrómetro de masas no mide la masa molecular directamente. un analizador de masas. pero mide la relación masa/carga de los iones formados de las moléculas. Fig. EL ESPECTRÓMETRO DE MASAS Un Espectrómetro de Masas es un instrumento que mide las masas de moléculas individuales que han sido convertidas en iones. un sistema de control y un sistema de datos. un detector. un sistema de vacío.1. 1 Componentes básicos de un espectrómetro de masas Los instrumentos usados están compuestos de una combinación de sistemas de entrada. una fuente de iones. 4 . y analizadores de masas (Tabla 1). junto con la fuente de iones y el tipo de analizador de masas definen el tipo de espectrómetro y las capacidades del sistema. y la medición de las relaciones masa/carga (m/z) de estos iones. La formación de iones de la muestra en fase gaseosa es un pre-requisito esencial en el proceso del espectrómetro de masas en el proceso de verificación de masas moleculares o análisis. además de la complejidad de los instrumentos utilizados en este tipo de experimentos. la muestra puede ya estar en forma de iones en solución. se puede justificar que el costo de la espectrometría de masas es proporcional con los costos asociados con otros componentes en los proyectos de investigación que requieren este tipo de análisis. en general y considerando la sofisticación. 5 . Dependiendo del tipo de entrada y técnica de ionización usada. El desarrollo de la ionización por electrospray y MALDI han aportado dos importantes métodos para la producción de iones de péptidos y proteínas en fase gaseosa. productividad y reproducibilidad de los experimentos desarrollados. nuevos desarrollos han permitido incluir muestras en soluciones líquidas o en una matriz sólida. Aunque los primeros espectrómetros de masas requerían que la muestra estuviera en forma gaseosa. o puede ser ionizada en conjunto con su volatilización por otros métodos en la fuente de iones. Algunas desventajas del uso de iones en fase gaseosa es la dificultad de generación de los iones y colocarlos en la fase gaseosa.Los procesos básicos asociados con la espectrometría de masas abarcan desde la generación de iones en fase gaseosa de un analito. Otra consecuencia de la complejidad de los instrumentos es el alto precio de tales instrumentos en términos su adquisición y costos de mantenimiento. Sin embargo. 2 Fragmentación por ruptura alquílica en el 3. Desde el punto de vista de la estabilización es determinante la formación de una molécula pequeña estable de olefina.1. Así por ejemplo está favorecida la formación de un ión estabilizado por deslocalización de la carga y/o cuando hay pérdida simultánea de un fragmento neutro estable.3-dimetilpentano En cadenas alifáticas se rompen preferentemente los enlaces C-C en especial en los puntos de ramificación. 6 . como hemos visto anteriormente. Esta estabilidad puede racionalizarse. sobre la base de los conceptos de la Química Orgánica.2. HBr. dando lugar a iones fragmentos de mayor estabilidad (iones carbonio terciarios más estables que los secundarios y éstos más que los primarios). Ruptura olefínica Fig. NH3. También debemos tener en cuenta la estabilidad relativa de los radicales: 2.2. Es frecuente la pérdida de CO. A tales efectos ya se ha destacado la abundancia de fragmentaciones con pérdida de pequeñas moléculas neutras estables en los espectros de masas-EI. C2H4. H2S y las moléculas radicales NO y NO2. cetena (CH2=C=O). HCl. Este tipo de ruptura corresponde a una fragmentación secundaria a partir de un carbocatión. 2. C2H2. 3 Fragmentación por ruptura oleofínica en hidrocarburos alquílicos. REGLAS DE FRAGMENTACIÓN Las reglas de fragmentación están basadas en la estabilidad de iones y fragmentos neutros. . HCN. CO2. H2O. Ruptura alquílica Fig. Ruptura alílica Fig.3. El ión molecular se formula como debido a la pérdida de un electrón de un par libre del heteroátomo X. 4 Fragmentación por ruptura alílica en hidrocarburos alquílicos insaturados . estabilizados por deslocalización de la carga. Se ha encontrado que este ión se isomeriza rápidamente a ión tropilio. La tendencia a formar los iones onio depende de la capacidad de X para actuar como donor.2.5. La presencia de un anillo aromático induce la ruptura de los enlaces simples en posición α que conducen a la formación de un ión bencílico. 2. estabilizado por deslocalización de la carga. estabilizado por deslocalización de la carga. Este tipo de fragmentación predomina en las aminas y es muy débil en los haluros de alquilo. creándose un centro inductor de fragmentaciones.4. Ruptura en α con formación de ión onio Los heteroátomos con capacidad de actuar como donores electrónicos favorecen la ruptura de los enlaces en posición α con formación de iones con nuevos enlaces: Fig. 6 Fragmentación por ruptura α. 2. Ruptura bencílica Fig. Se ha encontrado que este ión se isomeriza rápidamente a ión tropilio. La presencia de un anillo aromático induce la ruptura de los enlaces simples en posición α que conducen a la formación de un ión bencílico. Cuando los heteroátomos se encuentran formando enlaces dobles la ruptura hemolítica en posición α es también prominente: 7 . 5 Fragmentación por ruptura bencílica. Los enlaces dobles favorecen la escisión homolítica de los enlaces en posición α para formar iones arílicos. Los heteroátomos con pares electrónicos libres poco básicos y débil tendencia a compartirlos presentan la ruptura heterolítica directa (típica de los derivados halogenados). Ruptura heterolítica inducida por heteroátomos. 5 en los residuos etilénicos pudiéndose diferenciar los mismos por EM. 6 se observan en los residuos butadiénicos y aquellos en 4. Fig. Esta retrorreacción de Diels-Alder es típica de dobles enlaces en ciclos (ciclohexenos y tetralinas).7. Resulta significativa por originar fragmentos iónicos pares a partir del ión molecular. 2. La tendencia a esta ruptura heterolítica es inversamente proporcional a la de la ruptura homolítica: X = Hal > X = OR > X = SR > X =NR2 2. 8 Fragmentación por ruptura heterolítica. 7 Fragmentación por ruptura α.6. Los sustituyentes en 1.Fig. Ruptura de retro-Diels Alder (RDA) Fig. 2. 8 . Esta fragmentación equivale a la ruptura de dos enlaces sencillos alicíclicos. 3. 9 Fragmentación por ruptura retro Diels Alder. El proceso que usualmente predomina es el primero con pérdida de una molécula neutra de olefina. el más característico en EM mediante un doble enlace como centro inductor actuando a través de un estado de transición cíclico de 6 miembros. Transposición radicálica (ciclohexanona) Fig. Reordenamiento de hidrógeno en posición γ inducido por dobles enlaces y heteroátomos (Reordenamiento de McLafferty) Este reordenamiento específico.8. Es típico de las ciclohexanonas.9. 9 . 11 Fragmentación por transposición radicálica Esta transposición es un proceso secundario posterior a la ruptura en alfa. Fig.2. 10 Fragmentación por reordenamiento de McLafferty 2. La masa de los iones formados y las olefinas eliminadas permiten determinar la presencia de sustituyentes y el tamaño de las cadenas laterales. Cuando existen HBγB respecto al centro inductor en ambas cadenas laterales se pueden presentar transposiciones sucesivas (doble reordenamiento). La migración de HBγB es más fácil cuando está unido a un carbono secundario. 2.4 (Efecto orto. tioéteres. Transposición de hidrógeno a través de un estado de transición de 4 miembros. Es importante como fragmentación secundaria en éteres. 12 Fragmentación por transposición de hidrógeno.1.11. aminas secundarias y terciarias. 13 Fragmentación por efecto orto 10 . La procedencia del hidrógeno de la cadena lateral no es exclusivamente de la posición. Retroadición 1. RB4B) Este reordenamiento se presenta en moléculas con heteroátomos en enlaces sencillos.10. Fig. Fig. 15 Hidrocarburo saturado alicíclico.3. Fig. aumentando las intensidades de los iones secundarios formados en dichas roturas. Los hidrocarburos saturados alicíclicos suelen presentar un pico molecular intenso. 3. 14 Ejemplo fragmentación de un hidrocarburo saturado. Siendo normalmente los picos más intensos los correspondientes a C3 y C4 (m/e 43 y 57 respectivamente). Hidrocarburos saturados En ellos el pico molecular suele aparecer aunque a veces con una intensidad baja.1. 11 . FRAGMENTACIONES MÁS USUALES DE LAS DISTINTAS FUNCIONES ORGÁNICAS. Fig. Suelen ser espectros complejos en los que suelen predominar las perdidas de etileno (M-28) y la perdida de la cadena lateral (caso de existir). Su espectro presenta un conjunto de picos separados en 14 unidades de masa. La presencia de ramificaciones da lugar a la rotura por los puntos de ramificación. aunque hay que tener en cuenta la posibilidad de transposiciones o reagrupamientos y también la posibilidad de transposición de McLafferty.2 Hidrocarburos insaturados Suelen presentar el pico del ión molecular. 16 Hidrocarburo insaturado En los cíclicos suele observarse la formación de los iones correspondientes a la Retro-Diels-Alder. Fig.3. 12 . Fig. aparentemente formado por la perdida de un electrón pi.17 Hidrocarburos insaturado cíclico. Los picos más representativos suelen corresponder a la formación de cationes alílicos como consecuencia de la rotura de los enlaces en posición alílica respecto al doble enlace (2ª Regla de la fragmentación). 3. Fig. m/e 91) o iones tropillo sustituidos. Si son ramificados (alquilbencenos) la rotura mas característica suele corresponder a la formación de ion tropilio (C7H7.4.18 Hidrocarburo aromático. Los alcoholes bencílicos suelen dan un intenso pico de ión molecular. 13 . pudiendo dar el M-1 (hidroxitropilio) y/o el M-18 por efecto orto. normalmente acompañados de un pico a m/e 65 debido a la perdida de acetileno del mismo. Hidrocarburos aromáticos Los hidrocarburos aromáticos suelen presentar un intenso pico del ión molecular. Fig. 19 EM de n-butanol. los terciarios no lo suelen presentar. Si la cadena es lo suficientemente larga también se observan los picos de la transposición de McLafferty (m/e 92). Alcoholes Los alcoholes primarios y secundarios suelen presentar un débil pico del ión molecular.3. En cuanto a los procesos de fragmentación mas frecuentes suelen ser: la deshidratación (M-18) y la rotura de un enlace en el carbono que soporta al grupo -OH (dando lugar a iones del tipo: R2C+--OH estabilizados por resonancia por el oxigeno: CH2OH de (m/e 31) en el caso de los alcoholes primarios). 3. aunque usualmente puede ser observado. el pico del ión molecular de los éteres es débil. para la cual existen dos posibilidades si el éter es asimétrico: Fig. es una de las fragmentaciones más importantes en estos compuestos. 14 .3. Éteres y acetales El ión molecular de los éteres se forma cuando se remueve uno de los electrones no enlazantes del átomo de oxígeno. 21 Transposición de hidrógeno En los éteres puede ocurrir la ruptura heterolítica del enlace C –O. 20 Ruptura de un éter asimétrico Normalmente ocurren los dos mecanismos de fragmentación. En el caso del éter sec-butílico. para dar lugar al pico base del espectro de masas: Fig.5. el fragmento de masa 73 Th sufre transposición de hidrógeno. es inestable. si bien está favorecida la eliminación del grupo de mayor dimensión. Este tipo de ruptura constituye una diferencia notable respecto a los espectros de masas de los alcoholes y es consecuencia de la mayor estabilidad de los radicales (RO+) respecto a los radicales (OH+). reteniéndose la carga en el fragmento alquílico: Fig. 22 Ruptura heterolítica. La ruptura homolítica en alfa. y al igual que en los alcoholes. Por lo tanto. Los éteres aromáticos originan picos moleculares fuertes. 27 Ruptura Homolítica en alfa. Aldehídos y Cetonas Los aldehídos y las cetonas sufren la pérdida de un electrón perteneciente a uno de los pares libres del átomo de oxígeno del grupo carbonilo y el ión molecular que se origina de esa forma puede fragmentarse bien a través de la ruptura homolítica en alfa: Fig. Así: Fig.23 Espectro de masas de un n-dibutiléter. Fig.6. 26 EM del ortobromo-anisol 3. 15 . Algunas fragmentaciones son similares a las que ocurren en los éteres alifáticos.Fig. Los característicos picos aromáticos en m/z = 78 y 77 en el espectro de masas del anisol pueden surgir de acuerdo con el mecanismo siguiente: Fig. 24 Fragmentación de un éter aromático. 25 Mecanismo por el que pueden surgir los picos aromáticos. ocurre un reordenamiento de McLafferty que da origen a los picos en m/z = 44 o 58 o 72 en dependencia del sustituyente en el átomo de carbono α de la cadena: Fig. en el caso de aldehídos de cadena larga la intensidad de este pico es aproximadamente el 40% de la correspondiente al pico base. 3. En el caso de aldehídos con cuatro o más átomos de carbono en una cadena recta.o bien por la vía de un reordenamiento del tipo McLafferty cuando existe un hidrógeno en posición γ que pueda migrar: Fig. 29 Ruptura homolítica Los aldehídos generalmente dan lugar a un pico intenso en m/z = 29 (H. También es usualmente intenso el pico en M . No obstante. Este tipo de ruptura heterolítica también es común en algunos compuestos aromáticos en los cuales la estabilización por resonancia del ión resultante hace que muchas veces el pico en M . 31 Resonancia del ión. 28 Ruptura por reordenaiento Estos mecanismos se encuentran entre los más importantes en los compuestos que poseen grupos carbonilos.29 sea el base en el espectro de masas.1 . que se debe a la ruptura homolítica: Fig. 30 Ruptura heterolítica. mientras que esa intensidad decrece rápidamente en los aldehídos alifáticos con más de cuatro átomos de carbono en sus estructuras. que se encuentra en M-29 y que tiene su origen en la ruptura heterolítica siguiente : Fig.C ≡ OP+ P) debido a la ruptura homolítica en alfa del enlace C-C (FB5B) . 16 .1 Aldehídos El pico correspondiente al ion molecular es intenso en los aldehídos aromáticos debido a la estabilización por resonancia del ion molecular.6. Con mucha menor probabilidad puede ocurrir una ruptura heterolítica que da lugar a un pico en uno de los valores de m/z siguientes: 15. que da picos principales en m/z = 58. ocurre el reordenamiento de McLafferty. 29. 33 Ruptura homolítica. dependiendo de los sustituyentes R y R': Fig. 57 de acuerdo con: Fig. Cuando una de las cadenas alquílicas enlazadas al grupo carbonilo tiene tres o más átomos de carbono. La ruptura homolítica en alfa produce iones muy estables que originan picos con m/z = 43..: Fig.. 34 Ruptura heterolítica.. 57. 72.6.... 86. 3.. 35 Reordenamiento de McLafferty Fig. 43.. 71.. El pico base se origina por la pérdida del grupo alquílico mayor.2 Cetonas El pico del ión molecular de las cetonas es usualmente muy intenso.Fig.. 32 EM de un aldehído. 36 Espectro de masas de una dialquilcetona. 17 . Al igual que en las cetonas alifáticas. 57. pero el ión así formado tiene que sufrir rupturas posteriores para producir fragmentos. la ruptura homolítica en alfa es el paso inicial.. m/z = 45 (+O ≡ C-OH) y m/z = 43... 57. 3.En el caso de las cetonas cíclicas. La intensidad del pico decrece con el incremento de la masa molecular. La fragmentación que ocurre en la ciclohexanona (RB2B) es un ejemplo ilustrativo: Fig. 71 C ≡ O+). Ácidos carboxílicos y ésteres Tanto en los ácidos carboxílicos como en los ésteres los dos átomos de oxígeno pueden actuar como sitios de iniciación de fragmentaciones.. el pico del ion molecular es prominente . Para compuestos no ramificados en el átomo de carbono alfa (RB1B = H). 43. La pérdida de agua (M -18) por efecto orto es notable cuando está presenta un sustituyente apropiado: 18 . 3. 71. es débil pero observable. dando lugar a los mecanismos esperados de cada uno de ellos así como a nuevas reacciones aparentemente debidas a los efectos combinados. (R+). Otros picos prominentes se forman por pérdida de OH (M -17) y de COOH (M .7. Para ambos tipos de compuestos el reordenamiento de McLafferty es un mecanismo fundamental de fragmentación. pero crece con el incremento del número de enlaces múltiples conjugados con el grupo carbonilo. el pico correspondiente al ion molecular es intenso. que muchas veces conduce al pico base del espectro de masas: Fig.1. En el caso de los ácidos aromáticos. en el caso del ácido (R = H) el ión formado tiene una masa de 60 Th y para un éster metílico (R = CHB3B) la masa es 74 Th. El pico del ión molecular de un ácido o un éster.7.45). 39 Reordenamiento de McLafferty. mono-funcionales en ambos casos y de cadena recta. 38 EM de la isoforona. 37 Fragmentación en ciclohexanona Fig. Ácidos carboxílicos La ruptura de los enlaces en que participa el átomo de carbono del grupo carboxilo (COOH) puede dar lugar a picos en m/z = 29. . (P+POR) y m/z 59.. 73. Ésteres En el caso de los ésteres (COOR). 59. los picos originados por fragmentaciones que se inician mediante la ruptura de los enlaces en que participa el átomo de carbono del grupo carbonilo son: m/z 29. b) Reordenamiento de dos átomos de hidrógeno con eliminación de un radical alílico: Fig. 43 Reordenamiento de dos átomos de hidrógeno. 45. Fig. (P+PO ≡ C.Fig. 3. 41 EM del ácido butanoico. (R+).POR. 71. En el caso de los ésteres metílicos. 73. 42 Reordenamiento de McLafferty en un éster.7. (C ≡ O).. El pico base de los espectros de masas es el resultado de la eliminación de P. .OR). 19 . resultan importantes tres mecanismos de fragmentación: a) Reordenamiento de McLafferty: Fig.. m/z 31. En aquellos ésteres aromáticos donde la longitud del sustituyente alquílico es grande.2. El pico del ión molecular de los ésteres metílicos de ácidos aromáticos es intenso. 43. esos picos se encuentran en m/z M-31 y M 59 respectivamente. La pérdida de P.. 40 Pérdida de agua (M -18) por efecto orto.PCOOR conduce a otro pico prominente en el espectro. 87. 71…. 57. m/z 59. Aminas secundarias y terciarias también dan origen a picos en m/z = 30 por transposición de hidrógeno en el ión onio (R3) . Fig. mediante un mecanismo análogo al descrito para los ácidos aromáticos. Donde R2 Bes preferentemente el radical más voluminoso. Así. el pico base del espectro de masas del salicilato de metilo se encuentra en m/z 120 y los iones que lo origina pierden CO para dar un pico intenso en m/z 92. 45 EMdel butanoato de etilo. Por ejemplo. la menor electronegatividad del átomo de nitrógeno respecto al átomo de oxígeno hace que la energía de ionización de las aminas sea menor que la de los alcoholes correspondientes y además que la estabilización del fragmento iónico originado en la ionización inicial resulte más estable en las aminas que en los alcoholes. Para aminas primarias no ramificadas en el átomo de carbono alfa el pico en m/z = 30 (CH 2 NH 2 + ) es el base en el espectro de masas. 45 Fragmentación ruptura del enlace C-C. No obstante. la presencia de ramificaciones en uno de los átomos de carbono alfa conduce a: B B B 20 BBPB P .c) Retención de la carga positiva en el grupo alquílico: Fig.8. por ejemplo. Amidas Al igual que en el caso de otros grupos funcionales donde existen hetero-átomos con pares de electrones libres.C próximo al átomo de nitrógeno: Fig. En general. 3. La fragmentación más importante es la ruptura del enlace C . las fragmentaciones que ocurren en las aminas son similares a las descritas para los alcoholes. en las aminas el proceso de ionización inicial ocurre mediante la pérdida de un electrón por parte del átomo de nitrógeno. 44 Retención de la carga positiva en el grupo alquílico Los benzoatos orto-sustuidos apropiadamente eliminan ROH a través del efecto orto. pero no un criterio definitivo en ese sentido. La ruptura inicial puede ocurrir en ambos enlaces C -C próximos al átomo de nitrógeno: Fig.69 y 4. En las Figuras 4.Fig. 50 Ruptura inicial. 21 .47 EM de la 3metil-butilamina. Fig. Por esta causa la presencia de un pico de elevada intensidad en m/z = 30 en el espectro de masas de unsa sustancia es una fuerte evidencia en favor de que se trata de una amina primaria.48 EM de la isobutil-metilamina. El pico correspondiente al ion molecular de las aminas cíclicas es usualmente intenso.70 se muestran los espectros de masas de aminas primaria y secundaria. 49 pérdida de un átomo de hidrógeno. Fig. Cuando R'= CH3 . 46 Presencia de ramificaciones en uno de los átomos de carbono alfa. En los espectros de masas de muchas aminas aromáticas de baja masa molecular se puede observar un pico de moderada intensidad en M -1 debido a la pérdida de un átomo de hidrógeno: Fig. en el espectro de masas aparece un pico más intenso en m/z = 44 y si R' = H aparece un pico menos intenso en m/z 30. Fig. 51 Amida aromática.Algo similar ocurre en el caso de las aminas aromáticas. Fig. 22 . 52 espectro de masas de una amina aromática terciaria. en las cuales el pico del ion molecular resulta muy intenso como es de esperar.