SISTEMA FIBRINOLÍTICOMauricio López Sierra PhD Unidad de Hematología 2012 El conocimiento científico del proceso de coagulación y de fibrinolisis de la sangre ayudará a cohibir la hemorragia de vasos de pequeño calibre. …………. Pero aún no hay una anestesia eficaz y se opera en circunstancias difíciles para el médico y para el paciente Concepto hemostasia: Mecanismos que permitan detener el sangrado, producto de ruptura de un vaso y mantener la sangre en forma fluida. Fibrinólisis La fibrinólisis consiste en la degradación de las redes de fibrina formadas en el proceso de coagulación sanguínea, evitando la formación de trombos Activadores Hemorragias Coagulación Hipo Activadores Lísis Perturbación de la función coagulolítica Hiper Trombosis Inhibidores Inhibidores Fibrinógeno Yang Z et al. PNAS 2000.97:3907-3912 . . . The plasminogen activation system . tPA . Componentes del sistema fibrinolítico Fibrinógeno: 6 cadenas polipeptídicas (2 Aalfa-2 Bbeta-2 Gama Modificacion Postranlacional circula con MW 34kD Molécula fibrinógeno . 7-5. embarazo.Fibrinógeno 1.5 mg/ml Considerado reactante de fase aguda y puede aumentar 10 x en respuesta: trauma.0 g fibrinógeno sintetizados /día 75%: secretado al plasma 25%: nódulos linfáticos y líquido intersticial Plasma: 2. inflamación. . plaquetas. tejido Plasminógeno monocatenaria. glicosilada rol: degradación 1968 esquema de fragmentación . plasmina 2 variantes.Regulación de fibrinólisis Lisis del coágulo Sistema compuesto plasma. dímero D Dimero D + fragmento E . producto mas pequeño de degradación es doble D.Clivaje principal en región coiled coil entre fragmento E y D 1º remoción de cadenas Alfa. . . . catalizador primario de degradación de fibrina 200 mg-L t1/2 2.Plasminógeno Precursor inactivo de plasmina.2 días Cr 6 q26-q27 Reactante agudo 2 elementos de respuesta a fase aguda 76-81 553 -558 Sintetizado en hepatocitos . difieren en sitio de glicosilación . secreciones prostáticas Es una cadena simple glicoprotéica 2 variantes en iguales concentraciones.Plasminógeno Presente en amplios tejidos y fluidos. saliva. glándulas lagrimales. líquido seminal. Estructura 1ª plasminogeno es secretada 791 Aa con dominio de activacion NH2 t 5 res kringles dominio de proteínas que se pliega en grandes bucles estabilizados por tres enlaces disulfuro 1 dominio catalítico Primer sitio de plasminogeno Lys es en coagulo . 4 dom kringles (lysyl res)son responsables de regulacion de union a plasminógeno a fibrina Competir con otros res lys (aminocaproico acido tranaxémico) Utilizados como inhibidores de fibrinolisis . . Val por un activador: u-PA / t-PA 3 vías activación: Intrínseco: sustancias con carga Extrínseco tPA / uPA exógeno .Plasminógeno es zimogeno Serin proteasa clivando Arg. Activadores intrínsecos Factor XII Precalikreina HMWK High-molecular-weight kininogen Factor XI La vía intrínseca puede cooperar con 15% actividad fibrinolítica . Fibrinolytic System . bradikinina. acetilcolina. megacariocitos. mastocitos. IL.Activadores extrínsecos t PA: producto de cel endoteliales 5ug/L T1/2 2. histamina. monocitos Factores que inciden en su liberación: trombina. vasooclusion .4 min u PA t PA: producto de cel endoteliales-músculo liso de vasos. fibroblastos. neuronas. Estructura génica t PA Cr8 33 kb. reponde a Ac retinoico y enh. multihormona Serin proteasa 70 kd 527 aa NH2 terminal ser Cadena simple es un eficiente activador de plasminógeno en presencia de fibrina Clivado en Arg Ile 276 potente activador y se produce durante fibrinolisis . Factor Xa y kalicreina son catalizadores de esta conversión tPA dividida estructural y funcionalmente Porción NH2 ser-Arg 275: heavy o A chain Posee características de unión a fibrina. activacion fibrino especifica de plasminógeno y mecanismo de cleareance plasmático Dom fingerlike fibronectina asociado a la unión a tPa a fibrina 2 dominios kringles: union a tPa a fibrina: bloqueado por ac aminocaproico . 28 kD: región catalítica Light o B chain Ile 276-pro 527 Contiene sitio catalítico de serina proteasa A y B clivan plasminógeno Arg Val 562 para plasmina Ambas en presencia de fibrina axn . Regulación tPA Control sitio catalítico vía dependencia de fibrina Control de niveles funcionales de tPA: clearenace hepático Control niveles actividad tPA en sitio de daño por competencia de aumento de secreción de tPA vs PAI 1 de las plaquetas . tPA 70 kD NH2 Finger EGF kringle1 Kringle 2 275 catalitico 276 plasmina . Sc uPA 54 kD NH2 EGF kringle 158 159 catalitico Plasma calicreína Plasmina Catepsina L . t Pa es fibrinolítico + unión fibrina: Unión alinea t PA y Pmg en superficie de fibrina : eficiencia es mayor Por lo tanto se requiere localización de plasmina y generación en sitio de depósito de fibrina Plaquetas liberan serotonina que induce de cel endoteliales liberación de tPA . Urokinasa activador de plasminógeno Descubierto en orina 40-80 ug/L Detectado tb : cel riñón. endoteliales malignas. tumores y plasma Serin protesa Cadena simple uPA prourokinasa o single chain uPA “scuPA” t1/2 5 min metabolismo en hígado y riñón Baja actividad proteolítica .Activador extrínseco. scuPA Plasmina cliva Lys Ile 159 convirtiendo 2 cadenas de scuPA en tcuPA Mecanismo pobremente conocido Postulado: trombo t PA activa plasminógeno unido fibrina (plasmina) Unión activa scuPA generando una cascada de generación de plasmina Extravascular por tratarse de matriz metaloproteinasas . menor fibrina Excesiva cantidad en caso de lesión Aumenta susceptibilidad a infecciones .scuPA Gen 6. menor cantidad de trombos vasculares.4 kb cr 10 Pt 431 aa Ratones viven. scuPA 12 S-S Cys –Cys 279 unión catalítica NH2 EGF kringle 158 159 catalitico Tipo serin proteasa Plasmina kalicreina catepsina L Activación por hidrólisis Lys-Ile 159 NH2 unión S-S dominio catalítico . Activación Plasmina es activador (fibrinolisis) Kalicreina y Factor XIIa generan la hidrólisis 2ª forma activa: low MW scuPA Ocurre segunda proteólisis Lys Lys 136 Puede unirse a dominio catalítico por S-S en Cys Cys 279 Activador más eficiente (terapia trombótica) . Función 1 activador de plasminógeno en vasculatura scu PA convertido en tcuPA . Activador extrínseco: Factor VII proteasa Serin proteasa hialoronan binding protein Hialuroproteasa Potente activador FVII y scu PA FSAP cr 10 560 aa . FSAP activación Single chain glycoprotein 12 ug/ml Estructura: cadena amino terminal (1-52) 3 dom EGF (53-166). 1 kringle y dominio serin proteasa COOH t Activación a 2 cadenas clivando Arg Ile 291 Generando cadena pesada + cadena liviana unidas por SS Heparina. afectada :V-Va VII VIIIa fibrinógeno fibronectina . Función 2 cadenas FSAP convierten factor VII contribuyendo en sus niveles de mantención Localizacion F VIIa 2 cad FSAP Activa scu PA . . células sanguíneas.Inhibidores sistema fibrinolítico Plasma. tejido matriz extracelular Inhibir la plasmina o bloquear conversión plasminógeno a plasmina . tPA . Thrombin Activable Fybrinolisis activator: TAFI Hígado. circula complejo con plasminógeno Pt 423 aa Péptido señal-dom activación.dom catalítico 4 sitios de glicosilación (dom activación) TAFIa inhibido por quelantes de Zn Inestable a pH fisiológico y T t ½ 10 min Complejo trombina trombomodulina Plasmina . los que son sustratos para TAFIa .TAFI Zimógeno activación por clivage generando una carboxipeptidadasa Tripsina trombina complejo trombina trombomodulina lo catalizan Polímeros de fibrina y fibrinopeptidos contienen residuos de arg COOH t. Plasminogen activator Inhibitor -1 PAI-1inhibidor fisiológico primario del plasminógeno blancos: tPA uPA Cadena simple 379 aa Complejo con tPA uPA se realiza por uniones covalentes entre grupos aa que puede ser reversible . Plasminogen activator Inhibitor -1 Rxn con sct PA y tct PA T1/2 tPA -1min Solo forma complejo con tcu PA . embarazos Secretado por cel blancas.Plasminogen activator Inhibitor -2 Serpina 415 aa Descrita en placenta No es detectable. líneas epiteliales y tumorales tct PA tcu pA inhibe pero más lento PAI-1 2 formas: intracelular no glicosilada secretada glicosilada . sitio primario de síntesis hígado Existen dos variantes NH2 t Miembro de serin proteasas Sitios de unión para plasminógeno .α2 antiplasmina Inhibidor de plasmina Proteína de cadena simple 464 aa. protegiendo la degradación Fibrina es clave para activacion de plasminogeno x t PA .α2 antiplasmina 3 sitios funcionalmente importantes Sitio reactivo Sitio unión plasminógeno/plasmina rxn con kringles Sitio cross linking Estabiliza fibrina. . tPA .