Familia Rhabdoviridae Es una familia de virus con envoltura que incluye más de 100 virus diferentes: Características: 1.Poseen un amplio rango de huéspedes incluyendo vertebrados, artrópodos (mayormente insectos), amebas y plantas. 2. Tienen forma de bastón y usualmente apariencia de bala. 3. Esta familia incluye 2 géneros: los Vesiculovirus (que incluyen Vesicular Stomatitis Virus (VSV) y los Lyssavirus que incluye los virus que ocasionan la rabia. Estos últimos se limitan a infectar vertebrados. 4. El VSV puede ocasionar los siguientes síntomas en humanos: dolor de cabeza, laringitis, vómitos, diarreas y algunos pacientes desarrollan vesículas parecidas a las que se observan en herpes. 5. La mayoría de los Rhabdovirus se transmiten por artrópodos y también se duplican en estos vectores. 6. Las enfermedades ocasionadas por éstos van desde leves a letales. 7. Aquí inlcuimos la rabia que se transmite a humanos por mordeduras de animales frecuentemente domésticos. 8. El Makola Virus está relacionado a la rabia y es originario de Africa. Estructura 1. Posee una nucleocápsida helical cubierta por una envoltura rica en lípidos y espículas. 2. La envoltura contiene glicoproteínas externas (G) y proteínas internas (M). La respuesta inmunológica del organismo huésped es contra la proteína G. 3. Los viriones contiene actividad RNA dependiente de RNA capaz de transcribir y duplicar su RNA. 4. La hélice de RNAss negativa no es infecciosa ya que no posee la enzima que la puede duplicar, y no puede actuar como mRNA hasta que no se duplique o hasta que por lo menos se transcriba a una hélice +. 5. Contiene secuencias complementarias invertidas de aproximadamente 20 bases. Esta característica está compartida por varias familias de virus no relacionados. Entrada y Transcripción 1. El virión se une por medio de la proteína G a un receptor en la superficie de la célula. 2. Penetra por endocitosis con subsecuente fusión de la envoltura viral con la membrana citoplasmática del huésped. Luego el genoma penetra al citoplasma. proteína mayor (L) e. y al final de cada gen. Se cree está envuelta en duplicación viral en células infectadas. o receptores de crecimiento nervioso o de acetilcolina. liberación del ARN) La replicación de muchos rhabdovirus se produce en el citoplasma.162 n. La proteína NV es la primera proteína viral no estructural descubierta en Rhabdovirus. Actúa la replicasa y produce 5 diferentes ARNm (uno por cada gen). que codifica para una proteína no esturctural (NV) la cual se encuentra en células infectadas pero no en el virión maduro. b. tamaño y organización del genoma. fusión con lisosoma. aunque varios de los virus que infectan plantas se replican en el núcleo. Esto indica que la actividad transcriptasa está asociado a uno o todas las proteínas internas restantes. El orden de los genes en IHNV es: 3' N. proteína matrix (M) c. proteína de la nucleocápsida d. una señal de terminación y una de poliadenilación. El virus más estudiado de esta familia es VSV que posee una sola molécula de RNA (con peso de 42S) y con 11. Representación esquemática del genoma de Rhabdovirus 3'--------N--------P-------M--------G--------L 5' Se producen 5 mRNA que se les coloca el “cap” y rabo de poli A necesario para que comience la transcripción Ciclo de replicación[editar] El virus entra en la célula tras reconocer su receptor. que suelen ser restos de ácido siálico de glicoproteínas de membrana. en la cadena (-) hay una secuencia de inicio.M1-M2-G-NV-L 5' El M1 y M2 reemplazan a las proteínas NS y M de VSV 4. Antes de cada gen. glicoproteína G. Excepto por esta proteína el IHNV se asemeja al VSV y virus de la rabia en RNA. a. bajada de pH. Estudios con el Infectious Hematopoeitic Necrosis Virus (IHNV) de peces ha revelado la presencia de un sexto segmento de mRNA. En contraste con RNA libre de VSV el centro viral (core) incluyendo G y M es infeccioso. . 6. Se transcribe a 5 mRNA que codifican para 5 proteínas.3. 5. proteína P (proteína estructural altamente fosforilada por enzimas de la célula huésped y que forman un complejo con la proteína L para dar lugar a una enzima funcional). Se produce un endocitosis típica (Vesícula de clatrina. Vesícula de secreción). Añade el CAP y la cola de PoliA. y se produce la salida por gemación. Se requiere lapolimerasa viral para este proceso. pero ahora hay mucha proteína N.Esta estructura es homóloga al ARNm celular y. Esto hace que la polimerasa no reconozca las secuencias de terminación. El proceso de replicación es ligeramente distinto. Comienza igual que el anterior. El virus realiza la primera Replicación. se vuelven a replicar hebras de ARN (-). lo cual puede durar 36 horas. Aqui realiza su segunda replicación. o hasta semanas. que han alcanzado la membrana siguiendo la ruta de secreción constitutiva (RER. Con una longitud de 180 a 380 nm y 60 a 80 nm de diamétro. Golgi. Después el virus viaja por los nervios periféricos. y así sale el primer RNAm(N). Proyectil o bacilos. hasta alcanzar el SNC. Lyssavirus Clasficación de virus de Rabia Rabia Urbana Rabia Silvestre Rabia Rural HOMBRE Perro Gato Zorros Coyotes Lobos. en la que el virus se disemina a todo el organismo. al llegar a una señal de terminación. De este modo. En ocasiones. El virus controla su expresión a nivel de la transcripción. Morfología y Características generales Estructura del Genoma Contiene 5 genes que codifican para 5 proteínas designadas como: G (Glicoproteína) M ( Proteína de Matriz) N ( Nucleoproteína) P o NS (Fosfoproteína) L (ARN polimerasa dependiente de ARN) Forma de Bala. Refer Transcripción de FAMILIA RHABDOVIRIDAE FAMILIA RHABDOVIRIDAE Vesiculovirus Lyssavirus Ephemerovirus Cytorhabdovirus Nucleorhabdovirus Virus de la Rabia. se sintetizan distintas cantidades de ARNm para los distintos genes.La replicasa reconoce el primer sitio de inicio y transcribe hasta un sitio de finalización. y se forme un transcrito de ARN (+) de todo el genoma. que se asocian a ellas. puede ser traducido por los ribosomas celulares para producir tanto las proteínas estructurales como las no estructurales. se une a él. Típica Bicapa Lípidica Genoma compuesto de una sola cadena de RNA PATOGENIA Periodo de Incubación En hombres se han descrito periodos de incubación de varios años y en animales (perros) el periodo de incubación puede ser de 20 a 50 días o extenderse hasta 6 meses o más. a partir del cual. Después. Animales de corral. el cual infecta mamíferos. que en cuanto se replica el extremo 3’. que a su vez se asocian a las proteínas de la envuelta. Estas hebras son reconocidas por las proteínas de la cápsida. La nucleocápsida se asocia a las proteínas de la matriz. Cambios Patológicos En la Sustancia blanca hay desmielinización con degeneración de axones y vainas de mielinas. por lo tanto. la replicasa continua leyendo y hace lo mismo con los demás genes. vuelve al principio. Las regiones mas afectadas son las astas posteriores Destrucción . Debilidad muscular que progresa con parálisis de grado variable. Síntomas paralíticos desde el inicio. Duración de 2 a 10 días. hasta dos o 6 años. Irritable o nervioso Depresión o insomnio Aumento en actividad simpática Puede ser de dos formas: Rabia furiosa Rabia paralítica muda o tranquila Rabia Furiosa: Se presenta con mayor frecuencia Puede durar de 2 a 24 días. Puede durar algunas horas o días. El virus de la rabia tiene un efecto electrofisiológico de las nueronas: Alteración del sueño Cambios en expresión de genes Cuadro Clínico en el Hombre Periodo de incubación Periodo Prodrómico Periodo Neurológico agudo rábico Periodo de coma o terminal. Deterioro del SNC es progresivo hasta llegar a un coma profundo. sofocación. Hipersalivación y convulsiones. . Hiperactividad con agitación psicomotriz. Los pacientes pueden vivir mas de 30 días sin asistencia respiratoria ni cuidados intensivos. Aerofobia. Desequilibrio hidroelectrolítico. Rabia Paralítica muda o tranquila: Solo en un 5 a 10% de pacientes. Puede evolucionar a coma o la muerte de forma brusca. Destrucción en mesencéfalo. ganglios basales y en bulbo raquídeo. Hidrofobia Fasciculaciones musculares. meses.de células de la corteza. Puede ser provocada por estimulos tactiles. con promedio de 21 a 56 dias. Puede variar desde 6 días. Malestar General Fatiga Cefalea Dolor de garganta Dolor abdominal Diarrea Fiebre Vómito Náuseas Escalofríos Tos Anorexia Sensación anormal alrededor del sitio de la herida. el único miembro del grupo de hacerlo "naturalmente"). demostrado ser de etiología viral por Pasteur en la década de 1880 (cuando Pasteur y Koch estaban .Bronconeumonía Paro respiratorio. muestra por primera vez que es de origen infeccioso en 1808. 'En forma de barra'. 1997 La rabia y la investigación: La rabia. presente y futuro. 15. Rhabdovirus MicrobiologyBytes: Últimas actualizaciones Introducción: Rabdo = griego. estos virus tienen no segmentado (-) RNA de sentido genoma recuerda paramixovirus. S20-S24 ) . Genéticamente. Periodo de excitación. 2 a 6 meses con una duración media de 21 a 60 días. que infectan al hombre (Rabia . Periodo Prodrómico. Z.000 años. Fiebre Melancolía Pérdida de apetito. Hay> 200 Rhabdovirus conocidos (probablemente todavía una subestimación del total).versátil! La familia se divide en seis géneros: Grupo V: (-) Los virus de ARN de sentido Solicitar Mononegavirales Familia Género Especies Tipo Hosts Vertebrados Vertebrados Vertebrados Vertebrados Plantas Plantas Rhabdoviridae Vesiculovirus Lyssavirus (en griego. Vacuna pasado. De 10 días. la primera descripción data del siglo 23 antes de Cristo en la Mesopotamia ( Fu. Periodo Paralítico y fase final o muerte. Cuadro Clínico en el Perro. Periodo de Incubación. peces. insectos (algunos repetidos en los artrópodos y fueron previamente clasificado como arbovirus) y plantas . 'frenesí') Virus de la estomatitis vesicular Indiana Virus de la rabia Virus de la fiebre efímera bovina Virus de la necrosis hematopoyética infecciosa Lechuga Virus del amarilleo necrótico Virus del enanismo amarillo de la patata Ephemerovirus Novirhabdovirus Cytorhabdovirus Nucleorhabdovirus La rabia es una enfermedad 'antiguo'. otros mamíferos. La rabia se conoce desde hace más de 20. MicrobiologyBytes: Bite the Bullet Genoma: ~ 11kb. pero no es muy variable en apariencia. ~ Región "líder" 50nt en el extremo 3 'y ~ 60 región no traducida en el extremo 5' de la (-) vRNA sentido. finalmente. se asocian con la nucleocápside y actuar en concierto como la polimerasa viral.haemagglutinates glóbulos rojos). Morfología: Partículas ca.muy similar a la . Similar a paramixovirus . la partícula es relativamente inestables.desarrollando la teoría microbiana de la enfermedad . L y NS . Al igual que con la mayoría de los virus con envoltura. Envuelta con picos prominentes en la superficie ( T proteína . y. Más de una década. Dos proteínas no estructurales. La mayor parte de nuestro conocimiento de Rhabdovirus proviene del virus de la estomatitis vesicular (VSV) . logró aislar una preparación atenuada que se utiliza para tratar a los pacientes mordidos por perros rabiosos (no sin riesgos). La envoltura está recubierta por la proteína de la matriz y contiene la nucleocápside (ARN + N proteína) enrollada helicoidalmente en el interior del núcleo. hay una señal de poliadenilación conservada en el extremo de cada gen y una región intergénica corta entre cada uno de los 5 genes.con anterioridad a la firma de definición moderna de " virus 'por Beijerinick (1898)). Pasteur llevó a cabo el paso en serie del virus de la rabia en los conejos. 180 x 70 nm con aspecto único en forma de bala (todos bastante similares). Replicación: La transmisión varía dependiendo de virus / huésped. .rabia. Los picos de proteína G se unen a receptores en la superficie de las células huésped y los virus entra en la célula por endocitosis y la fusión con la membrana de la vesícula (como paramixovirus). sino de todo el genoma rabia ahora se ha clonado. la rabia mordeduras de animales o insectos vectores. Hay un largo período de incubación in vivo. secuenciado y expresado (véase más adelante). mediado por la proteína G. pero esto no se refleja en la cinética de replicación del virus en cultivo. pero la mayoría se transmiten por contacto directo .por ejemplo. pero también se requieren factores de la célula huésped adicionales (no conocida). Tendencias en Microbiol.ni la función solo. ARNv progenie se hace a partir un sentido intermedio. La replicación se produce en el citoplasma . produciendo de este modo transcripciones separadas. Estos ARNm se hacen por la transcripción secuencial de los ORFs en el genoma del virus y se ha demostrado que la secuencia intergénica es responsable de la terminación y de re-iniciación de la transcripción por la polimerasa entre cada gen.Hogenhout SA. et al. vegetales y animales gama de huéspedes rhabdovirus: vista de un insecto . pero se cree que son los fosfolípidos en lugar de proteínas específicas. Es . Las moléculas receptoras para rabdovirus no se conocen. 2003 11: 264-271 . El genoma se replica por la L + P complejo de la polimerasa (como en la transcripción).tanto la L y las proteínas no estructurales son necesarios para la transcripción . pero este paso no se entiende bien (+). un tope en el extremo 5 'y polyadenylated en el extremo 3' y cada una contiene la secuencia líder del "fin de la vRNA a los 5 'el 3 final del mensaje. Cinco mRNAs monocistrónicos se producen. perinuclear cuerpos de Negri (Negri. Cada partícula vírica es de casi 100nm de diámetro y 400 nm de largo. Esta es la glicoproteína que forma una espina en la . y la yema tanto de las membranas citoplásmicas y de la membrana externa de la célula (la adquisición de la proteínas G M + como lo hacen). 1909). la rabia .por ejemplo. pero esto puede variar.característico de rabdovirus que todos estos eventos ocurren en una parte del citoplasma que actúa como "fábrica" un virus y aparece como un cuerpo de inclusión citoplasmática característica . Tienen un lado que termina en una forma redondeada y por ello se dice que tiene forma de bala. El virus sólo tiene cinco proteínas. Los viriones se ensamblan alrededor del núcleo de enrollado firmemente nucleoproteína. el virus debe de portar su propia ARN polimerasa dependiente de ARN. Como lo sugiere su nombre estos virus tienen forma bacilar. ESTRUCTURA DE LOS RABDOVIRUS (figura 1) Los Rabdovirus son virus de ARN de cadena negativa. esto es que tienen una única hebra de ARN que está en sentido contrario al del ARNm necesario para codificar proteínas virales. Proteína G (de superficie). Como resultado. Tienen una envoltura derivada de la membrana plasmática de la célula huésped. Esto significa que el ARN no puede codificar directamente la síntesis proteica y ha de ser copiado a una cadena de ARNm de sentido positivo. ocurre la fusión. Transcripción Primero. la nucleocápside tiene una apariencia estriada.1 que lo hace más estable y probablemente permite que una región hidrofóbica de la molécula sea expuesta y se embeba en la membrana de la célula a ser infectada. REPLICACIÓN (figura 2) Fijación Los receptores para los rabdovirus todavía no han sido identificados definitivamente pero algunos experimentos sugieren fosfolípidos. En micrografías de electrones con tinción negativa. de la 3 – El genoma del vesicular endocítica con la membrana. sintetiza cinco ARNm individuales. también conocida como P (fosfo)) Juntas forman la ARN polimerasa ARN dependiente o transcriptasa. uno para cada proteína viral. particularmente la fosfatidil serina. Note que. Hay tres cadenas sacarosas unidas por enlaces N-glicosídicos. Esto es porque el trímero de proteína G sufre un cambio de conformación a un pH de 6. Es una proteína transmembrana con una secuencia de señal N-terminal. Hay cerca de 1200 proteínas G (400 trímeros) por particular viral. tal como se ve en la figura 1. La proteína G se fija a los receptores celulares y es el blanco de anticuerpos neutralizantes. Protege al genoma de las nucleasas y mantiene su conformación de forma tal que permite la transcripción. Proteína L (Larga) y NS (no estructural. Nucleocápside. Esta es una proteína periférica de membrana (originalmente la M era por membrana) que parece bordear la superficie interna de la membrana viral. aunque esto sigue en controversia. Tiene una estructura helicoidal que descansa sobre la membrana. Proteína M (matriz). La penetración del virus al citoplasma toma lugar por una vía endocítica y no por la membrana plasmática. como el receptor de superficie celular. La proteína L tiene un peso molecular de240 kiloDaltons y su gen ocupa casi el 60% del genoma (figura 3). el ARN debe de sintetizar antes de la síntesis de cualquier proteína viral y por tanto el virus infectante debe de suplir la enzima . Proteína N (Nucleoproteína). la polimerasa. Penetración Figura Luego de la endocitosis. Esta es la principal proteína estructural y cubre el genoma de ARN. Todas las etapas subsiguientes toman lugar aquí sin ninguna implicación del núcleo celular. Esta es el núcleo de ribonucleoproteína infeccioso. La nucleocápside entra al Rabdovirus CDC citoplasma.superficie saliendo de la misma como trímeros. la cual es portada por el virus infectante. Puede actuar como un puente entre la membrana o la proteína G y la nucleocápside. que es pH-dependiente. forma parches con la proteína M. L y NS (P) formando las nucleocápsides. G y L y en cada unión de los genes la síntesis de los ARNm es atenuada (figura 3). Aquí. El miembro más estudiado es el virus de la estomatitis vesicular. RABDOVIRUS Ejemplo: Virus de la rabia. Ensamblaje El ARNm de la proteína G se traduce en conjunto con el retículo endoplásmico y es transportado mediante el cuerpo de Golgi a la superficie celular. En la fase replicativa. Esta fase replicativa requiere de síntesis proteica implicando la misma polimerasa. metilados y poliadenilados. La secuencia de transcripción es N. NS (P). Los ARNm son chapados. Esto significa que se sintetiza menos de ARNm de L que de cualquiera de los otros. M. este proceso de transcripción primaria se da en la presencia de inhibidores de la síntesis proteica).polimerasa. El virus fijado es engullido por endocitosis. (Como es de esperar. El cambio de transcripción de ARNm a replicación de los ARN genómicos parece estar controlado por el nivel de proteína N. El ARN de sentido negativo y de longitud genómica se asocia con proteínas N. Estas. La nucleocápside entonces yema a través de la membrana. La proteína G (Glicoproteína) es la proteína de fijación (figura 7) la cual se une a un receptor de la superficie de la célula huésped. se asocian con la proteína M en la superficie interna de la membrana plasmática o quizás en el citoplasma. la polimerasa transcribe el genoma de ARN de sentido negativo a una hebra de sentido positivo. . a su vez. El ARN es: de cadena sencilla de sentido negativo codifica 5 proteínas FIJACIÓN. PENETRACIÓN Y PÉRDIDA DE LAS ENVOLTURAS El virus se fija a la superficie celular. Replicación Además. La interacción entre la nucleocápside y la proteína M causa en la primera un cambio de conformación para que parezca más condensada. Esto sirve como plantilla para que la transcriptasa transcriba nuevas moléculas de ARN de sentido negativo. esta enzima debe ignorar señales que definen la especia original de ARNm y sintetiza una única molécula de ARN. las enzimas para la síntesis y modificación de ARNm están empacadas con el virión. estas denominaciones sólo se enfocan en los diferentes aspectos de la actividad de la polimerasa. Como resultado de la fusión de la envoltura viral con la membrana del endosoma. metilados. y poliadenilados. REPLICACIÓN DE ARN La replicación del ARN es el proceso mediante el cual nuevas copias de ARN son sintetizadas (figura 8). se le conoce también como transcriptasa o replicasa. Hay un ARNm monocistrónico para cada una de las cinco proteínas codificadas por el virus (figura 8). Como esto ocurre en el citoplasma. La replicación de ARN se da en el citoplasma y es llevada a cabo por las ARN polimerasa víricas. ya que son virus ARN con cadena en sentido negativo. TRADUCCIÓN Los ARN mensajeros son traducidos en los ribosomas de la célula huésped y las cinco proteínas virales son sintetizadas a un tiempo. porque esto interrumpiría con la maquinaria de traducción de la célula huésped).) Las cadenas negativas recién sintetizadas pueden: i. TRANSCRIPCIÓN El término 'transcripción' es utilizado en este contexto para referirse a la síntesis de ARNm. No hay distinción de funciones en tempranas o tardías.La membrana del virus se funde con la membrana del endosoma (el pH ácido del endosoma es importante puesto que la proteína G necesita ser expuesta a un pH ácido para facilitar la fusión). La cadena positiva en su totalidad es envuelta por una proteína de nucleocápside mientras se va sintetizando (el ARNm no es envuelto con esta proteína. la nucleocápside es liberada dentro del citoplasma. la misma también es envuelta con proteína de nucleocápside mientras es sintetizada. La pérdida completa de la nucleocápside no es necesaria para la transcripción – la ARN polimerasa del virión pueden copiar el ARN del mismo aún cuando este esté en la nucleocápside. Esto es una ventaja por el hecho de que entonces el ARN genómico está protegida de las ribonucleasas. Los ARNm son chapados. Ser usadas como plantillas para la síntesis de más cadenas enteras de sentido positivo 8 . (Nota: como la ARN polimerasa viral sintetiza ARNm (transcripción) y también ARN completo (replicación). Las recién sintetizadas cadenas de sentido positivo son copiadas en su Figura totalidad en cadenas de sentido negativo. hacia la membrana celular apropiada. Mientras son sintetizadas son insertadas en retículo endoplásmico en donde son Figura glicosiladas y luego transportadas al aparato de Golgi en donde se dan modificaciones sustanciales de las cadenas de carbohidratos. en el caso del virus de la estomatitis vesicular. La proteína M (matriz) está involucrada en el ensamblaje – interactúa con parches de G en la membrana y con nucleocápsides.ii. Las nucleocápsides yeman a través de áreas modificadas de la membrana. en vesículas. El complejo de ARN polimerasa vira se asocia con las nucleocápsides cuando se están sintetizando. ésta es la membrana plasmática (figura 9).com/doc/109887007/TEMA-23-Rhabdovirus . son transportadas. Figura NOTA: 10 TODO EL CICLO DE VIDA OCURRE EN EL CITOPLASMA LA ARN POLIMERASA Y LAS ENZIMAS DE MODIFICACIÓN D ARN CON CODIFICADAS POR EL VIRUS MISMO Y ESTÁN PRESENTES EN EL VIRIÓN NO HAY DIVISIÓN EN FASES TEMPRANA/TARDÍA http://es. Ser usadas como plantillas para la síntesis de más ARNm iii. 9 Nucleocápside La síntesis de la nucleocápside fue descrita anteriormente. las cuales contienen proteínas G y M (figura 10).scribd. Posteriormente. Ser empacadas en los viriones ENSAMBLAJE El virus consiste en dos “módulos” – la envoltura y la nucleocápside: Envoltura Las proteínas transmembranales son sintetizadas en los ribosomas que se encuentran adyacentes al retículo endoplásmico.