Examen de Biología Molecular1 de septiembre de 2004 Apellidos________________________________ Nombre_____________________ Instrucciones: La duración máxima de la prueba es de 3 horas. Puntuación: pregunta acertada 10/70 puntos; pregunta no contestada 0 puntos; pregunta fallada – 0,25 x 10/70 puntos. Claves de contestación Pregunta tipo A Se realizan 5 proposiciones (a, b, c, d y e) para que se elija la más correcta entre ellas. Pregunta tipo B Se efectúan 4 proposiciones numeradas del 1 al 4, cuya solución corresponde al esquema: a. Si 1, 2, 3, y 4 son verdaderas. b. Si 1, 2, 3 son verdaderas y 4 es falsa. c. Si 1 y 3 son verdaderas y 2, 4 son falsas. d. Si 2 y 4 son verdaderas y 1 y 3 son falsas. e. Si 1, 2, 3 y 4 son falsas. 1. a. b. c. d. e. 2. a. b. c. d. e. 3. a. b. c. d. e. 4. 1. 2. 3. 4. Tipo A. La 6-amino-purina se conoce también por el nombre de: Citosina. Guanina. Adenina. Timina. Ninguno de estos. Tipo A. La desoxirribosa que participa en los ácidos nucleicos: También se encuentra en cantidades apreciables en las moléculas de RNA. Es una L-2-desoxirribosa. Es la D-3-desoxirribosa. Se une por su C-5´ a las bases púricas o pirimidínicas. Se encuentra en forma furanosa. Tipo A. Señalar la sustancia de menor masa molecular: Adenina. Inosina. Adenosina. Hipoxantina. Guanina. Tipo B. Nomenclatura de los componentes estructurales de los ácidos nucleicos: La desoxiguanosina es el desoxirribonucleósido de la guanina. La uridina es el ribonucleósido del uracilo. El desoxicitidilato es el desoxirribonucleótido de la citosina. El timidilato es el ribonucleósido de la timina. a b c d e 1 c. Todo lo anterior es correcto. la relación de estos grupos que estarían en forma no protonada respecto a los que están protonados será: a. c. Una molécula de DNA-B que contiene 10. 106pb. 800. 0. d. e.4 m. a. 11. a. Xantina. Tiene una M de 106 Da. 1.2. se convierte en: Adenina. 8. b. Hipoxantina. Ello significaría que a pH 7. Su longitud es de 6. 106 kb. Tiene un fosfato en su extremo 3´. d. Nada de lo anterior es correcto. b. a. b. Si la guanina sufre desaminación. Nada de lo anterior es cierto. Uracilo. e. En general. Tiene una longitud de 3. El porcentaje de una de las cadenas de una doble hélice de DNA es [A] = 30 y [G] = 24. 6. Tipo A. Tipo A. e. c. ¿Cuál es el tamaño de una molécula de DNA que posee una M de 1 MDa?: 1. c. a.000 pares de bases: a. 2. b.5.5 MDa. El pKa para el N-1 de la adenina es 4. Incumple las reglas de Chargaff. a b c d e 7. Tipo A. Tipo A. Citosina.1. d. 3. 20 kb. Tipo A. b. e.1. e. b. 4. c. El oligonucleótido de DNA abreviado pATCGAC: Tiene una A en su extremo 3´. En los ribosomas existen diferentes moléculas de RNA ribosómico.5 m. 10. Tiene una M de 6. 1.54 kb. En la misma cadena [T] + [C] = 54.01. 9. 0. c. e. d. En las células eucariotas existe DNA circular. 10. d. En la misma cadena [G] + [C] = 48. Tipo B.000. En la misma cadena [T] = 30. 2 . Ácidos nucleicos celulares: El DNA es exclusivamente nuclear. las moléculas de RNA constan de dos cadenas polinucleotídicas. 2 x 109 pb. Tipo A. d. Las dos respuestas correctas son a y d. Tiene 6 grupos fosfato. 950. In vivo. Tipo B. Tiene dos horquillas de replicación. El contenido en bases púricas será igual que el de pirimidínicas. 3. 15. Con respecto al genoma de Escherichia coli: 1. Su tamaño es de casi 5 megapares de bases. El contenido en adenina será del 12%. Tipo A. No posee ninguna actividad hidrolítica conocida. Tiene dos segmentos de DNA que se replican independientemente. FTIIIA. Tipo A. 10. c. El contenido en citosina será menor que el de guanina. b. En una cadena de DNA recién sintetizado. No participa la DNA ligasa. a b c d e 14. HU. 6. En la replicación del DNA de E. ello significa que: a. EF-Tu. 4. Replicación del DNA: a. 4. La DNA polimerasa: a. d. 8. 100. 13. Se puede realizar en ausencia de los desoxirribonucleósidos trifosfato. d. d. Todo lo anterior es cierto. Puede actuar con el suministro de un solo tipo de desoxirribonucleótido. e.000 pares de bases en la forma completamente relajada. c. Dna G. e. Tipo A. Cuando una molécula de DNA se replica de modo bidireccional. Tiene dos cadenas.000. c. DNA polimerasa alfa. DNA ligasa. a. 5. 4. SSB. afidicolina. d.5. DNA girasa. 17. Consiste en una única molécula circular de cadena doble. e. 7. primasa. e. b. Tipo B. se encuentra en estado sobreenrollado. b. El sentido de la síntesis es 3´-5´. 9. 19. 3 . Tipo A. El contenido de bases pirimidínicas será menor que el de púricas. Tipo A. Como en eucariotas. teniendo como molde la cadena de secuencia AATGTATTGCATT será cierto que: a. Pequeñas fracciones de RNA actúan como cebadores de la síntesis. b. 2. De entre las siguientes proteínas indicar el número que participan en la replicación del DNA en procariotas y/o en eucariotas: helicasa. el número de enlace está en torno a: a. e. Tipo A. Dna A. c. d. b. 2. b. Tiene dos orígenes. El contenido en timina será del 50%. coli participan las siguientes proteínas y/o enzimas: 1.12. 3. Para una molécula de DNAccc de 10. existen dos cromosomas homólogos por célula. 18. a b c d e 16. c. Tiene dos puntos de terminación. 2. d. e. Si además del resto de los componentes necesarios se le suministra [alfa-32P]-dATP el DNA resultante será radiactivo. coli está implicada en: a. 22. Corrección de pruebas. Sellado de mellas. No se necesita la presencia de RNA cebador. La actividad 5´-3´exonucleasa de la DNA polimerasa I de E. e. 4. 4. Contiene una actividad correctora de pruebas 5´-3´ para mejorar la fidelidad de replicación. Formación de una mella en el origen de replicación del DNA. Tipo A. Nada de lo anterior es cierto.2 nmol de DNA. Sintetiza sólo la cadena conductora. Participan las DNA polimerasas nucleares y la DNA polimerasa mitocondrial. 3. Se encuentra sólo en mamíferos. Necesita de manera imprescindible la existencia de RNA como molde.c. d. d. e. En relación con la RNA polimerasa dependiente de DNA: 1. La DNA polimerasa III procariótica: a. b. Apareamiento entre bases. La síntesis del rRNA y mRNA en eucariotas se cataliza por la misma enzima. Nada de lo anterior es cierto. 2. Una actividad 3´-5´exonucleasa. 3. 2. 25. El producto final tendrá una longitud variable. b. b. Tipo A. El rendimiento es del 60%. Sintetiza DNA en sentido 3´-5´. 23. c. Tipo A. El rendimiento es del 80%. La función de corrección de pruebas de la DNA polimerasa implica todo lo que sigue excepto: a. Tipo A. c. Detección del par de bases incorrecto. 20. c. Se libera pirofosfato en su actuación. la DNA polimerasa I sintetiza la cadena rezagada. c. Formación de los fragmentos de Okazaki. d. A la vista de estos datos: a. Tipo B. b. a b c d e 24. Si además del resto de los componentes necesarios se le suministra [gamma-32P]-dATP el DNA resultante será radiactivo. El grado de amplificación será de 1 millón de veces. Posee una subunidad beta que actúa como una horquilla que mejora la procesividad de la síntesis del DNA. En el núcleo celular tiene lugar durante la fase S del ciclo celular. obteniéndose 0. 21. Su actuación es controlada por los factores proteicos sigma y rho. Síntesis de DNA en células de mamíferos: 1. En un cromosoma existen múltiples orígenes de replicación. e. Reversión de la reacción de polimerización. 4 . Tipo B. Hidrólisis de enlace fosfodiéster. Se somete 1 ng de una molécula de DNA de 1 kb a 20 ciclos de amplificación por PCR. Retirada de cebadores de RNA. e. d. Procesos de síntesis de RNA: 1. Algunos reconocen secuencias específicas en el DNA. La transcriptasa inversa de un virus animal con genoma de RNA cataliza: a. No existen señales específicas para finalizar la transcripción. a b c d e 31. La subunidad sigma se disocia del resto de la enzima tras la iniciación de la transcripción. Tipo B. La enzima actúa transcribiendo una de las hebras del DNA. de localización nucleolar. Para su actuación es suficiente con la presencia de un solo tipo de ribonucleósido trifosfato. La RNA polimerasa transcribe los exones pero no los intrones. e. Factores de transcripción eucariotas: a. Síntesis de RNA en células eucariotas: a. Transcripción en E. es responsable de la síntesis de rRNA. Señales de finalización del proceso de transcripción: 1.a b c d e 26. En la finalización de la transcripción puede existir gasto energético en forma de ATP. Tipo B. Cada RNA polimerasa interacciona con un determinado conjunto de factores de transcripción. La RNA polimerasa dependiente de DNA: 1. 3. La toxina alfa-amanitina bloquea la síntesis de mRNA. 2. 4. Hay más de una respuesta correcta. Formación de RNA en sentido 3´-5´. Las RNA polimerasas dependientes de DNA poseen función correctora. 4. 2. 3. 4. Uno de los tipos de la enzima. a b c d e 27. Tipo A. Son de naturaleza polinucleotídica. Utiliza los cuatro dNTP. d. Tipo A. d. coli: 1. Consisten en la presencia in vivo de moléculas de bromuro de etidio entre cada dos genes consecutivos. Se piensa que la gran mayoría de las secuencias del genoma humano se transcriben. Las cadenas de RNA recién sintetizadas poseen un grupo trifosfato en el extremo 5´ y un grupo hidroxilo en el extremo 3´. Tipo B. 32. 2. c. 4. b. b. La síntesis de una cadena de RNA comienza por su extremo 5´. a b c d e 28. En algunos casos una señal de finalización consiste en cierta disposición de los nucleótidos. e. 30. En la transcripción se copian las dos cadenas de DNA hasta RNA. 3. c. 5 . a b c d e 29. Cada subunidad sigma conduce a varias moléculas de RNA polimerasa. Algunos son específicos de un determinado tejido. Las RNA polimerasas dependientes de DNA necesitan molde de DNA pero no cebador para iniciar la síntesis. La RNA polimerasa I se encarga de la síntesis del tRNA. La proteína rho facilita la terminación de la transcripción. 2. Tipo B. Hay más de una respuesta correcta. 3. Tipo A. pero no síntesis de DNA. Rifamicina. b.b. Un polipéptido de M 37 kDa. 39. Síntesis de RNA. Degradación de la cadena de RNA en un híbrido DNA-RNA. Tipo B. El procesamiento de las moléculas de rRNA procariota es llevada a cabo por el espliceosoma. a b c d e 34. 6 . 35. Tanto b como c. El mRNA posee una longitud mayor que su transcrito primario. La capacidad codificante de 1 kb de DNA es: a. Hay más de una respuesta correcta. Hay más de una respuesta correcta. los precursores deben de poseer la señal de poliadenilación. 1. La poli (A) polimerasa participa en el proceso de maduración de los tRNA. Inserción del genoma del virus en un cromosoma de la célula huésped. Algunos contienen bases modificadas. c. Tipo B. La formación de la caperuza incluye la creación de un enlace fosfodiéster 5´-5´. e. 38. b. 3. c. Los genes procariotas son fragmentados. Maduración del mRNA de eucariotas. Secuencias codificantes de DNA: a. e. 2. e. Rifampicina. Tipo A. Propiedades del código genético: 1. 4. Para añadir la cola de poli(A).000 pb. e. Alfa-amanitina. 2. c. Tipo A. Al producto final de la transcripción se le denomina transcrito primario. e. b. Un polipéptido de 55 kDa. d. Procesos postranscripcionales: a. 36. 4. Inhiben la transcripción: 1. La formación de la caperuza de los mRNA es catalizada por una única enzima. c. 100 aminoácidos. Tipo B. Los mRNA de procariotas pueden ser policistrónicos. b. 33. En el mRNA una base forma parte de tres tripletes consecutivos. Las secuencias codificantes se denominan intrones. c. 3. Tipo A. Acridina. Hay más de una respuesta correcta. d. Tipo A. Productos de la transcripción: a. Los rRNA 18S y 28S proceden de un precursor común. 2. d. a b c d e 37. El triplete AUG siempre es el primer triplete presente en el extremo 5´ del mRNA. Están ausentes en la mitocondria. Los RNA de los espliceosomas se encuentran formando partículas con proteínas. d. El código genético es degenerado. Un mRNA de 1. d. 500 aminoácidos. El triplete de iniciación de la lectura del mensaje en el mRNA es AUG. b. El código genético relaciona una secuencia de DNA con la de un polipéptido.3. La secuencia de bases en el extremo 3´ es –CCA. 4. Se lee de manera no solapada. e. Tipo A. Formación del aminoacil-tRNA: a. c. Durante el “splicing” se eliminan del RNA las secuencias correspondientes a los intrones. c. el aminoácido se une al brazo anticodón. b. Existen 64 tripletes codificantes. Las aminoacil-tRNA sintetasas poseen capacidad autocorrectora. Poseen una alta proporción de bases modificadas. Respecto a la síntesis de proteínas: a. d. 4. e. 3. La puromicina es un inhibidor tanto en procariotas como en eucariotas. Algunos tripletes codifican más de un aminoácido. Tipo A. c. 45. e. La metionina es codificada por un único triplete y es el único caso. Existen tres tripletes que no especifican ningún aminoácido. Tipo A. Consisten en una sola hebra polinucleotídica. Tipo A. a b c d e 42. La lectura del mRNA se realiza en sentido 3´. d. y se unen. Se unen al aminoácido por el extremo 3´ libre.5´. d. Síntesis de proteínas en bacterias: a. Hay más de una respuesta correcta. Hay mas de una respuesta correcta. Sólo se conocen 20 tRNA diferentes. e. 7 . c. 44. Tipo B. La cadena codificante del gen sirve como molde para la síntesis de la cadena polipeptídica. Todos los componentes forman parte de los ribosomas. 43. Las proteínas que se sintetizan en ribosomas libres suelen ser proteínas de secreción. e. a b c d e 40. d. Cada una de las veinte aminoacil-tRNA sintetasas reconoce a uno de los veinte aminoácidos proteicos. De los diferentes tipos de RNA sólo el mRNA participa en la síntesis de proteínas. Hay más de una respuesta correcta. b. El mRNA es un componente importante de los ribosomas. 2. Las proteínas sintetizadas en ribosomas ligados al retículo endoplasmático nunca son secretadas. d. a tRNA específicos. El número máximo de codones sinónimos de un aminoácido es 6. Se consumen dos enlaces ricos en energía por cada aminoacil-tRNA formado. Todas las moléculas de tRNA tienen en común que: 1. b. 41. Maquinaria de la síntesis proteica: a. Todo lo anterior es falso. c. En los tRNA. b. Los aminoácidos proteicos poseen. A la lectura del mRNA por los ribosomas se le denomina transcripción. Tipo A. En el código genético: a. e. a b c d e 50. Translocación del ribosoma: 1 GTP a GDP + Pi. Cicloheximida. Hay más de una respuesta correcta. 4. El DNA se puede fragmentar por endonucleasas de restricción. Rifamicina. Un mismo plásmido puede dar diferentes fragmentos en función de la enzima utilizada. Cloranfenicol. Tipo A. 2. Existen fundamentalmente en células de mamíferos. 3. Las de tipo II reconocen secuencias de DNA específicas. 3. c. Los fragmentos de restricción obtenidos de la degradación del DNA se pueden separar por electroforesis. 8 . No pueden ser fragmentados nuevamente por una segunda endonucleasa de restricción. Fragmentos de DNA generados por endonucleasas de restricción: 1. Obtención del DNA recombinante: 1. Estreptomicina. 2. d. 2. La enzima transferasa terminal permite crear colas monocatenarias homopoliméricas en los fragmentos de DNA. Son inhibidores de la biosíntesis de proteínas: 1. Tipo B. 51. Los extremos romos de determinados fragmentos se pueden convertir en cohesivos. Los fragmentos generados pueden tener extremos complementarios. a b c d e 48.46. Aislamiento y fragmentación del DNA: 1. En la incorporación de cada aminoácido a la cadena polipeptídica ocurre el siguiente gasto: 1. El tratamiento de un plásmido con una endonucleasa de restricción sólo origina un fragmento. Endonucleasas de restricción: a. Sólo son capaces de degradar DNA monocatenario. 2. 2. Formación de enlaces fosfodiéster. 4. a b c d e 49. 3. Tipo B. Ciclo de EF-Tu a EF-G: 1 ATP a ADP + Pi. 4. 2. Tipo B. Algunas generan extremos cohesivos. 3. Tipo B. a b c d e 52. Para aislar el DNA celular se puede emplear centrifugación en CsCl. 3. 4. Formación enzimática del aminoacil-tRNA: 1 ATP a ADP + Pi. b. Tipo B. Hidroxilación de residuos de triptófano. Glicosilación de residuos de asparagina. Proteolisis parcial. a b c d e 47. Todos los fragmentos originados por una única endonucleasa de restricción tienen la misma longitud. Estas modificaciones postraduccionales se han observado en la maduración de proteínas: 1. Tipo B. Fijación del aminoacil-tRNA al sitio A: 1 GTP a GDP + Pi. 4. Los vectores del tipo Lambda EMBL4 sirven para construir genotecas genómicas. b. Vectores de clonación derivados del fago Lambda: 1. b. 3. 2. e. 58. e. El fago M13: a. El represor tiene gran afinidad por el gen regulador. b. El represor se une a los genes estructurales. Secuencias diana de las endonucleasas de restricción: 1. Posee una estructura icosaédrica. Lambda gt10 es un vector de inserción útil en la construcción de genotecas de expresión. La proteína producto del gen II es esencial en su ciclo lisogénico. c. 57. 54. Durante la expresión génica del fago Lambda: a. c. La DNA ligasa de T4 permite añadir fragmentos conectores a los extremos romos del DNA. El represor se une generalmente a la RNA polimerasa. El represor se une al operador. Tipo A. d. Los cósmidos poseen la secuencia cos del fago Lambda. Tipo A. La proteína Q es producto de la expresión inmediatamente temprana. La proteína producto del gen VIII es mayoritaria en la vaina proteíca que rodea al DNA. Tipo B. Algunas originan extremos de cadena sencilla. 2. Tipo B. El operador y el promotor son secuencias alejadas del DNA codificante. En relación con el DNA recombinante: a. a b c d e 53. a b c d e e 9 . Tipo A. b. En la secuencia de cada cadena existe un punto específico de corte. 4. 3. 4. c. e.y Hfr. Infecta células F. inhibiéndola. Está formado por la unión de dos fragmentos de DNA que necesariamente han de ser de la misma especie. a b c d 55. e. En el operón de la lactosa: a. Hay más de una respuesta correcta. d. Lambda gt11 permite la obtención de DNA monocatenario. c. Muchas de ellas son secuencias palindrómicas. Todo lo anterior es cierto. Todo lo anterior es falso.3. Hay mas de una respuesta correcta. 4. El promotor PRE mantiene los niveles de CI en la fase lisogénica. 56. d. Tipo A. d. La mezcla de varios fragmentos diferentes de DNA origina un solo tipo de molécula de DNA recombinante. El DNA vector puede ser cualquier molécula de DNA. Determinados fagos y plásmidos pueden ser utilizados como vectores. El DNA recombinante no se puede introducir en la célula. Los genes tempranos retrasados son N y cro. Suelen tener una longitud entre 4 y 8 pares de bases. e. d. Los vectores derivados del fago Lambda permiten clonar solo fragmentos de menos de 5 kb.075 miligramos. En la primera extracción orgánica se utiliza solamente fenol. a b c d e 62. 0. Tipo A.59. e. 3. Obtención de cDNA a partir de mRNA: a. Se requiere la presencia de desoxirribonucleósidos trifosfato. c. El RNA se recupera por centrifugación a baja temperatura. Tipo A. b. acuosa. c. c. 0. 10 . La cantidad de DNA que hay en la cubeta es de: a. El método es muy distinto al utilizado con células eucariotas. 2. Cuando el cociente DO260/DO280 es 2 la muestra contiene el doble de DNA que de proteínas. Se introduce 1 mL de una disolución de DNA bicatenario en una cubeta de cuarzo y se obtienen las siguientes medidas: DO280 = 0. Tipo B. 60. La fase superior. Se resta la DO280 de la DO260 para eliminar la contaminación debida a las proteínas. 64. 63. Se utiliza bromuro de hexadeciltrimetil amonio. c. Los ácidos nucleicos se recuperan por precipitación con etanol. Tipo A. Se utiliza la enzima transcriptasa inversa. b. Hay más de una respuesta correcta. Tipo B. d. Tipo A. 75 microgramos. coli y los genes de resistencia a antibióticos: 1. 4. b. Tipo A. d. Un cósmido es un vector derivado enteramente de genes víricos. e. d. e. Vectores de clonación: a. b. 65. Un plásmido permite clonar cualquier fragmento de DNA. En la estimación de la concentración de ácidos nucleicos en disolución: 1. 7. El DNA plasmídico puede ser transferido de una célula a otra por conjugación. El DNA absorbe luz de 260 nm a causa de las bases nitrogenadas y de los enlaces fosfodiéster. d. Se obtiene el DNA genómico y el DNA mitocondrial. Los polisacáridos de la pared bacteriana se eliminan por extracción con fenol. 61. En el aislamiento de ácidos nucleicos a partir de células bacterianas: a. 3.075 y DO260/DO280 = 2. En un procedimiento de aislamiento de ácidos nucleicos: a.15 microgramos por mililitro. b. Se puede obtener DNA monocatenario pero no bicatenario.5 microgramos. e. contiene los contaminantes proteicos y lipídicos. El fenol se utiliza para desnaturalizar las proteínas. En los años 70 se demostró que las cepas K-12 pueden colonizar el aparato digestivo humano. Todo lo anterior es cierto. 750 nanogramos por microlitro. La conjugación es un método utilizado in vitro. Acerca del trabajo con E. La movilidad in vivo de un plásmido requiere del gen mob y del sitio nic. c. Hay más de una respuesta correcta. Algunos poseen genes que confieren resistencia a antibióticos. Se puede utilizar oligo(dT) como cebador. 2. e.4. Se utiliza el reactivo de los furfurales. b. e. 2. c. 4. d. La desnaturalización supone rotura de enlaces entre bases apareadas pero no entre bases apiladas. Se utilizó un campo eléctrico constante en voltaje y dirección.000. 3. 1 microgramo de DNA bicatenario en disolución da una DO260 de 0.000.6-anhidro-L-galactosa. Preparación de DNA plasmídico a partir de bacterias transformadas: a. El orcinol provoca la formación de furfurales. En la determinación colorimétrica de RNA: a. 70.000. 4. Las moléculas de plásmido permanecen sin alterar ante la subida del valor de pH. e. d. Tipo A. 67. a b c d e 66. Se obtuvieron bandas correspondientes a DNA y a RNA. 3. Tipo A. 3. Tipo B. El pH alcalino rompe los enlaces fosfodiéster existentes entre los nucleótidos. a b c d e 11 . Los grupos fosfato del DNA oxidan al orcinol y lo convierten en un furfural. 2. Tras sembrar 100 microlitros del cultivo e incubar a 37ºC durante 36 horas se cuentan 300 colonias resistentes a ampicilina. 69. b.000. Hay más de una respuesta correcta. El detergente SDS desnaturaliza el DNA cromosómico. El número de transformantes por microgramo habrá sido de: a. Las bacterias se tratan inicialmente con acetato potásico y sosa. Tipo A. Electroforesis de preparaciones de DNA plasmídico: 1. El calor o el pH alcalino rompen los puentes de hidrógeno entre las bases. A temperaturas superiores a 90ºC su viscosidad disminuye. El orcinol se transforma en furfurales por calentamiento en presencia de ácido concentrado. d.000. En una disolución de DNA bicatenario: 1. Tipo B. b. En el tampón de electroforesis se utilizó el ión borato como portador de carga. La matriz utilizada consistió en un polímero de D-galactosa y 3. Se trata de un procedimiento denominado de “lisis alcalina”.000. 18.2. 900. c. Nada de lo anterior es cierto. Se transforma 1 mL de cultivo bacteriano con 10 microlitros de pUC18 a una concentración de 5 ng/microlitro. c. a b c d e 68. 60. 30.