Compendio de Investigación Academia Journals Morelia 2018
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Morelia, Michoacán, México 16 al 18 de mayo de 2018
EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE BACTERIAS EN INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCIÓN EN SALUD EN EL HOSPITAL GENERAL DE JEREZ, ZACATECAS César Villarreal Arámbula1, José Alfredo Laguna Nieto 2, Rubén Octavio Méndez Márquez3 Resumen —Las Infecciones Asociadas a la Atención en Salud (IAAS) son un problema en diversos centros de atención en salud. Se realizó el aislamiento, cuantificación, identificación y evaluación de la susceptibilidad farmacológica de bacterias patógenas que puedan estar contenidas o alojadas en diferentes áreas de superficies inertes del “Hospital General de Jerez, Zacatecas”. Se llevaron a cabo diversos muestreos de superficies en áreas determinadas que tienen mayor importancia en cuestión de afluencia de pacientes, contacto y posible fuente de infección. El estudio se llevó a cabo con base a lo que establece la Norma Oficial Mexicana NOM-045-SSA2-2005, con la técnica de hisopado. Las muestras fueron procesadas para su identificación con pruebas bioquímicas, basándose en el algoritmo de identificación de la plataforma electrónica ABIS online, su cuantificación y posteriores pruebas de resistencia a los antibióticos de primera elección en el control de estas bacterias. Palabras clave— Infecciones intrahospitalarias, superficies inertes, identificación bacteriana, pruebas bioquímicas, susceptibilidad farmacológica.
Introducción Las Infecciones Asociadas a la Atención Sanitaria (IAAS), también denominadas infecciones «nosocomiales» u «hospitalarias», son infecciones contraídas por un paciente durante su tratamiento en un hospital u otro centro sanitario y que dicho paciente no tenía ni estaba incubando en el momento de su ingreso (OMS, 2010). Las infecciones nosocomiales o infecciones intrahospitalarias son un problema de salud global que aumenta los costos de atención y facilita la generación selectiva de microorganismos multidrogorresistentes. Al existir un número enorme de especies patógenas, se ha propuesto estudiar un grupo específico que genera mayor resistencia y se encuentra en mayor proporción en los hospitales. Este grupo se ha denominado grupo ESKAPE por la primera letra de cada especie. Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli (Arias-Flores R. et al., 2015). Así pues, las IAAS son infecciones contraídas en el hospital por un paciente internado por una razón distinta de esa infección. Una infección que se presenta en un paciente internado en un hospital o en otro establecimiento de atención de salud en quien la infección no se había manifestado ni estaba en período de incubación en el momento del internado. Comprende las infecciones contraídas en el hospital, pero manifiestas después del alta hospitalaria y también las infecciones ocupacionales del personal del establecimiento (OMS, 2003). El medio ambiente hospitalario raramente está implicado en la transmisión de infecciones salvo en pacientes inmunodeprimidos (Ezpeleta et al., 2012), sin embargo son un grave problema. Las enfermedades infecciosas siguen siendo, a principios del siglo XXI, una de las causas más importantes de muerte en la humanidad (Alós, 2014). La prevención parte exclusivamente por el equipo médico considerando siempre que todas estas medidas giran en torno a las medidas practicadas sobre el paciente y al ambiente que rodea al mismo (Pérez et al., 2010). Descripción del Método Preparación de los medios de cultivo Los medios de cultivo fueron preparados en el Laboratorio de Microbiología de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas, preparándose de acuerdo a las instrucciones contenidas en el envase, así mismo las instrucciones de almacenamiento y manejo.
1
César Villarreal Arámbula es pasante de la Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas.
[email protected] 2 José Alfredo Laguna Nieto es pasante de la Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas. 3 M. en C. Rubén Octavio Méndez Márquez es Docente-Investigador y Responsable del Laboratorio de Microbiología de la Unidad Académica de Ciencias Químicas, Programa Académico de Químico Farmacéutico Biólogo de la Universidad Autónoma de Zacatecas. (Autor corresponsal)
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Toma de muestra Se realizaran diversos muestreos en áreas determinadas que tienen mayor importancia en cuestión de afluencia de pacientes, contacto y posible fuente de infección. El estudio se realizó con base a lo que establece la Norma Oficial Mexicana NOM-045-SSA2-2005, por medio de la técnica de hisopado en áreas delimitadas de 10 X 10 cm, las cuales fueron establecidas con plantillas estériles (Figura 1). Se muestrearon cuatro áreas del Hospital General de Jerez, Zacatecas en las cuales se tomo la muestra de 4 espacios dentro de cada área (Tabla 1).
Figura 1. Plantilla estéril que delimita el área de toma de muestra.
Tabla 1. Zonas de muestreo dentro del Hospital General de Jerez, Zacatecas. Espacio Área de la muestra hospitalario Consultorio de Charola estomatología Escupidera Repisa de almacén de material medico Escritorio Comedor Mesa central Charola de comida Carrito de transporte de alimento Tarja Área de pediatría Escritorio Mesa pie de cama Estantero de almacén de medicamento Manija de puerta Consultorio Teclado de computadora general Manija de puerta Cama de exploración Escritorio
Procesamiento de las muestras Se utilizó caldo tioglicolato para el trasporte de las muestras, posteriormente fueron cultivadas en medios selectivos, las colonias obtenidas fueron teñidas por medio de la técnica de Gram (Figura 2) y aisladas en medios de proliferación, para después someterlas a diversas pruebas bioquímicas para su identificación y posterior antibiograma.
Figura 2. Tinciones Gram. Tinción Gram positiva (izquierda), tinción Gram negativa (derecha). Métodos de sembrado Los cultivos en cajas Petri se realizaron por medio de la técnica de estría cruzada, y en los tubos con agar en pico de flauta se realizó por estría simple, por picadura, o por agitación en caldo según fuera el caso de cada medio utilizado.
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Identificación Una vez obtenidos todos los resultado de las pruebas bioquímicas se procedió a introducir los datos en el algoritmo de la plataforma electrónica ABIS online, los cuales arrojaron porcentajes de identificación por encima del 79% hasta un 93%. Resultados Se obtuvo buena proliferación de microorganismos, estos con la tinción de Gram (Figura 2) dieron la pauta para las posteriores pruebas bioquímicas que se utilizaron en cada muestra. Pruebas de sensibilidad Las pruebas de sensibilidad se realizaron ajustando la concentración de bacterias con el estándar de 0.5 de McFarland, que corresponde aproximadamente a 1.5x108 UFC/ml, con estriado homogéneo sobre toda la superficie del agar, utilizando posteriormente multidiscos para bacterias Gram positivas y negativas según el caso de cada bacteria aislada. El antibiograma tiene como objetivo evaluar en el laboratorio la respuesta de un microorganismo a uno o a varios antimicrobianos, y traducir, en una primera aproximación, su resultado como factor predictivo de la eficacia clínica (Cantón, 2010). Tabla 2. Pruebas de sensibilidad para bacterias Gram negativas. Bacteria Sensibilidad Farmaco/mm de inhibición Proteus mirabilis Nitrofurantoína/Resistente Amikacina/ 13mm Levofloxacino/ 30mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 13mm Ceftriaxona/ 5mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 14mm Cefalotina/ Resistente Gentamicina / 13mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim/Sulfametoxazol/ 30mm Dickerya Nitrofurantoína/ 26mm Amikacina/ 13mm chysanthemi Levofloxacino/ 26mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 14mm Ceftriaxona/ 18mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 32mm Cefalotina / Resistente Gentamicina / 10mm Cefotaximo / Resistente Trimetroprim/Sulfametoxazol/ 18mm Desconocido
Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 32mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 17mm Ceftriaxona/ 8mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 15mm Cefalotina/ Resistente Gentamicina / 15mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 20mm
Shinwella pseudoproteus
Nitrofurantoína/ 28mm Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 28mm Ampicilina/ 24mm Netilmicina/ 15mm Ceftriaxona/ 30mm Cefepima/ 20mm Cloranfenicol/ 15mm Cefalotina /20mm Gentamicina / 14mm Cefotaximo/ 14mm Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 16mm
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Imagen de la prueba de sensibilidad
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Klebsiella pneumoniae
Cronobacter (Enterobacter) sakasakii
Enterobacter nimipressuralis
Yersinia ruckeri
Cadace davisae
Xenorhabdus beddingii
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Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/ 13mm Levofloxacino/ 35mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 13mm Ceftriaxona/ 18mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 9mm Cefalotina / Resistente Gentamicina / 12mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 28mm Nitrofurantoína/ 7mm Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 20mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 15mm Ceftriaxona/ 26mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 15mm Cefalotina / Resistente Gentamicina / 15mm Cefotaximo/ 5mm Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 24mm Nitrofurantoína/ 7mm Amikacina/ 13mm Levofloxacino/ 8mm Ampicilina/Resistente Netilmicina/ 11mm Ceftriaxona/ 14mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 9mm Cefalotina Resistente Gentamicina / 12mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 22mm Nitrofurantoína/ 22mm Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 20mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 14mm Ceftriaxona/ 22mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 14mm Cefalotina / 20mm Gentamicina / 13mm Cefotaximo/Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 20mm Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/13mm Levofloxacino/ 27mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 13mm Ceftriaxona/ 8mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 14mm Cefalotina/ Resistente Gentamicina / 22mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 22mm Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/ 14mm Levofloxacino/24mm Ampicilina/Resistente Netilmicina/ 12mm Ceftriaxona/ Resistente Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 13mm Cefalotina / Resistente Gentamicina / 13mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 8mm
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Desconocido
Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 22mm Ampicilina/ Resistente Netilmicina/ 14mm Ceftriaxona/ Resistente Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 25mm Cefalotina / Resistente Gentamicina / 14mm Cefotaximo / Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 24mm
Serratia plynuthica
Nitrofurantoína/ Resistente Amikacina/ 15mm Levofloxacino/ 20mm Ampicilina/ resistente Netilmicina/ 15mm Ceftriaxona/ 28mm Cefepima/ Resistente Cloranfenicol/ 15mm Cefalotina /Resistente Gentamicina/ 15mm Cefotaximo/ Resistente Trimetroprim-Sulfametoxazol/ 27mm
Tabla 3. Pruebas de sensibilidad para bacterias Gram positivas. Bacteria Sensibilidad Fármaco/ mm de inhibición Staphylococcus Tetraciclina/ 14mm Cefuroxima/9mm vitulinus Ampicilina/ Resistente Gentamicina/17mm Eritromicina/ Resistente Cefotaximo/5mm Ceftazidima/ Resistente TrimetroprimCefalotina/ 20mm Sulfametoxazol/ 25mm Penicilina/ Resistente Dicloxacilina/Resistente Plefloxacima/12mm Staphylococcus vitulinus
Tetraciclina/ 14mm Cefuroxima/5mm Ampicilina/Resistente Gentamicina/18mm Eritromicina/18mm Cefotaximo/Resistente Ceftazidima/Resistente TrimetroprimCefalotina/ 9mm Sulfametoxazol/30mm Penicilina/ 6mm Dicloxacilina/8mm Plefloxacima/16mm
Staphylococcus haemolyticus
Tetraciclina/Resistente Cefuroxima/Resistente Ampicilina/ Resistente Gentamicina/18mm Eritromicina/20mm Cefotaximo/Resistente Ceftazidima/Resistente TrimetroprimCefalotina/ 7mm Sulfametoxazol/ Resistente Penicilina/Resistente Dicloxacilina/Resistente Plefloxacima/22mm
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Imagen de la prueba de sensibilidad
Conclusión La información presentada es el resultado del primer muestreo realizado, del que se han obtenido datos
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relevantes de las bacterias presentes en las diferentes zonas de muestreó del Hospital General de Jerez, Zacatecas. Con estos resultados se tiene una aproximación de las posibles bacterias que se pueden encontrar en los tres muestreos restantes. El ambiente hospitalario es un lugar propicio para que microorganismos de esta naturaleza puedan adquirir diversas resistencias a una amplitud de antibióticos, motivo por el cual es de suma importancia el realizar el muestreo constante de superficies en estos y más espacios así como en superficies vivas de a cuerdo a lo que establece la Red Hospitalaria de Vigilancia Epidemiológica (RHoVE). Referencias Alós I. J., (2014). Resistencia bacteriana a los antibióticos: una crisis global. ELSEVIER, 33(10), 692-699. doi: 10.1016/j.eimc.2014.10.004. Arias R., Rosado U., Vargas A., Grajales C. (2015) Los microorganismos causantes de infecciones nosocomiales en el instituto mexicano del seguro social. PP. 1. México. Cantón, R., (2010). Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clínica. ELSEVIER. 28(6). 375–385. doi:10.1016/j.eimc.2010.01.001. Ezpeleta, B. C., Barrios, A. doi:10.1016/j.eimc.2012.03.005.
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Notas Biográficas César Villarreal Arámbula es pasante de la Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas. José Alfredo Laguna Nieto es pasante de la Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas. El M. en C. Rubén Octavio Méndez Márquez es Químico Farmacéutico Biólogo por la Universidad Autónoma de Zacatecas (mención honorifica, 2003), Maestro en Ciencias por la Universidad de Guanajuato (2005), actualmente Responsable del Laboratorio de Microbiología del Programa Académico de Químico Farmacéutico Biólogo y Docente Investigador de la Unidad Académica de Ciencias Químicas de la Universidad Autónoma de Zacatecas.
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