INFORME 6: DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS.Farmacognosia DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS Kenneth Chaupis Pahuachón, Miguel Cósser Carpio, Everando Huari Mejía, David Velásquez Villafuerte, Walther Vicente Mallma. (Mesa 2- Grupo Miércoles) LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y MEDICINA TRADICIONAL, FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS. RESUMEN La siguiente práctica de laboratorio tiene tuvo por objetivo la determinación de azúcares reductores, la identificación y determinación de cianuros de Prunus laurocerasus (laurel cerezo) proporcionado por la cátedra de farmacognosia. Métodos: para el análisis cualitativo se realizó tres reacciones la reacción de grignard en el cual se obsevó el cambio de color del papel picrosado; como segunda reacción se realizó la reacción de azúcares reductores y como ultima reacción de taninos en el cual se agrega el reacctivo de FeCl3. Para el análisis cuantitativo se realizo por medio de dos métodos primero la extracción de taninos para luego la valoración de cianuros por el método de Liebig. Resultados: para el análisis cuantitativo los resultados obtenidos fueron positivos con cambio de color del papel picrosado amarillo a rojo, formación de pp rojo ladrillo y finalmente formación de color verde; para el análisis cuantitativo luego de la extracción y valoración la cantidad de cianuros presente en el laurel cerezo es de 0.648 ml de HCN. Conclusiones: por medio de las reacciones de identificación y la cuantificación se logró identificar los heterósidos cianogenéticos y la presencia de ácido cianhídrico en un 0.648 mg respectivamente. Palabras clave: azúcares reductores, cianuros, Prunus laurocerasus, análisis cualitativo, grignard, azucares reductores, taninos, liebig, análisis cuantitativo , cianuros , heterósidos cianogenéticos. DRUGS WITH GLYCOSIDES CYANOGENIC ABSTRACT The following lab is aimed to the determination of reducing sugars, identification and determination of cyanides of Prunus laurocerasus (cherry laurel) provided by the professor of pharmacognosy. Methods: for qualitative analysis was performed three reactions Grignard reaction in which obsevó color change picrosado paper, as a second reaction was carried out the reaction of reducing sugars and tannins as the last reaction in which adds the reacctivo of FeCl3. For quantitative analysis was performed by two methods first extraction of tannins and then the assessment of cyanide by the Liebig method. Results for the quantitative analysis results were positive color change from yellow to red picrosado paper, pp formation of brick red and green color formation finally, for the quantitative analysis after extraction and measurement the amount of cyanide present in cherry laurel is 0,648 ml of HCN. Conclusions: reactions through identification and quantification was achieved cyanogenic glycosides and identify the presence of hydrocyanic acid in a 0648 mg respectively. Keywords: reducing sugars, cyanides, Prunus laurocerasus, qualitative analysis, Grignard, reducing sugars, tannins, Liebig, quantitative analysis, cyanides, cyanogenic glycosides. INFORME 6: DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS. Farmacognosia INTRODUCCIÓN La cianogénesis es la facultad que poseen ciertos organismos vivos- especialmente vegetales- de producir en determinadas circunstancias ácido cianhídrico. Si se exceptúan los cianolípidos de las Sapindaceae, las sustancias cianógenas son siempre heterósidos de 2-hidroxinitrilos comúnmente denominados heterósidos cianógenos (cianogenéticos). La hidrólisis de estos heterósidos por glucosidasas endógenas y posteriormente por hidroxinitril-liasas, va precedida generalmente por la ruptura tisular inducida por un proceso físico-trituración, masticación, infestación fungíca, etc.- que pone en contacto los heterósidos vacuolares y las enzimas citoplasmáticas.(1) La capacidad de cianogénesis es frecuente en el reino vegetal en helechos, Gimnoespermas y Angioespermas. Es especialmente marcada en algunas familias: Rosaceae, Fabaceae, Poaceae, Araceae, Euphorbiaceae, Passifloraceae, etc. Todos los órganos de un vegetal pueden elaborar estos compuestos. En ciertos casos, y esto se relaciona directamente con un papel de protección, la cianogénesis se asocia con un estadio vegetativo especial, por regla general con los órganos jóvenes, en fase de crecimiento activo (e. g. sorgo). (2) En esta práctica de laboratorio tuvo por objetivo identificar heterósidos cianogenéticos en la guinda mediante las reacciones de Grigñard, azúcares reductores así como también la identificación de taninos. MARCO TEÓRICO Algunas plantas desprenden ácido cianhídrico, un proceso conocido como cianogenesis. La cianogenesis se refiere a la síntesis de cianuro de hidrógeno por ciertas plantas. Los heterósidos cianogenéticos constan de un azúcar (la glucosa por lo general, pero muy rara vez un disacárido), un quiral átomo de carbono y R y R 'que pueden ser alifáticos o aromáticos.(3) Por lo general se clasifican con respecto al ácido precursor de amino. Como tales, heterósidos cianogenéticos puede ser derivado de valina, fenilalanina, tirosina e isoleucina veces. Algunos ejemplos de heterósidos cianogenéticos ricos en plantas incluyen: Tapioca, sorgo, algunas plantas y especies gramineceous de la familia de las rosáceas. Prunus L. laurocerasus (Laurier) tiene propiedades anti-espasmódicas actividades y estimula la respiración. Prunasoside es el heterósido cianogenético activo y 1,2 a 1,8 g se produce por kilogramo de hojas. Además, este compuesto derivado de Prunus laurocerasus L., también se utiliza en el formulación de los jarabes, especialmente para el tratamiento de infecciones broncopulmonares. Por el contrario, algunas plantas son tóxicas debido a la presencia de altas concentraciones de heterósidos cianogenéticos. Tapioca, que es una comida de primera necesidad en África, Asia y Tropical América, puede producir 100 a 250 mg de cianuro de hidrógeno por 100 g de raíces.(4) (4) INFORME 6: DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS. Farmacognosia MATERIALES Y MÉTODOS Reacción de azúcares reductores Papel picrosado S.R Fehling A S.R Fehling B FeCl3 5% Agua destilada Matraz Tubos de ensayo Gradilla Pipeta Mechero Fósforos Sol. AgNO3 0,03N Sol. NaOH 10% Sol. KI 10% Hojas frescas de guinda PrunuscerasusL. Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúcido reductor se forma óxido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor.(5) METODOLOGÍA (5) ANÁLISIS CUALITATIVO Reacción de Grigñard Los Reactivos de Grignard son compuestos organometálicos de fórmula general R-MgX, donde R es un resto orgánico (alquílico o arílico) y X un haluro. Sin duda, los reactivos de Grignard son unos de los más importantes y versátiles en química orgánica debido a su rápida reacción con electrófilos, como por ejemplo el grupo carbonilo. Reacción de Taninos Reconocimiento de taninos: el ensayo con cloruro férrico permite reconocer la presencia de compuestos fenólicos y/o taninos. Si el extracto de la planta se realiza con etanol el ensayo determina tanto fenoles como taninos; a una alícuota del extracto etanólico se le adicionan 3 gotas de una solución de cloruro férrico al 5% en solución salina fisiológica. Obteniéndose como reacción positiva una coloración verde. (5) INFORME 6: DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS. Farmacognosia Una vez que la anterior reacción se ha completado el primer exceso de Ag+ produce precipitación de cianuro de plata: Ag+ + Ag (CN) 22 AgCN(s) ANÁLISIS CUANTITATIVO Técnica operatoria OBS: Cada mL de AgNO3 0,03N equivale a 1,62 mg de HCN. RESULTADOS ÁNALISIS CUALITATIVO REACCIÓN Grigñard Azúcares reductores Taninos Valoración de cianuros método de Liebig (5) por el RESULTADO + + + Valorar con AgNO3 0.03 N hasta la aparición de una ligera opalescencia. ANÁLISIS CUANTITATIVO Droga: PrunuscerasusL. Gasto: 0.4 mL AgNO3 0.03N Volumen obtenido luego de la destilación (Aprox. 20 mL) Cuando se adiciona solución deAgNO3 sobre una solución de cianuro se forma un complejo altamente estable e incoloro: Ag+ + 2 CNAg (CN)2- INFORME 6: DROGAS CON HETEROSIDOS CIANOGENÉTICOS. Farmacognosia DISCUSIÓN Para el análisis cualitativo de la hoja de “guinda”, realizamos la reacción de Grigñard para ello procedimos a cortar las hojas, este procedimiento es importante para una mayor liberación de la sustancia a analizar; esto se evidencia al poner la muestra a baño maria, para que la liberación de sustancia se produzca, dado a que la planta ante condiciones desfavorables tienden a liberar sustancias que le permitan proteger, en el análisis el tiempo estimado estaba para un tiempo de 15 minutos, el tiempo que experimental que se dio la reacción fue menor a 15 minutos, por el cambio de coloración del papel picrosado ante cualquier reacción que se produzca en el sistema. En la reacción de Fehling el catión cúprico II reacciona con glúcidos reductores pasando a oxido cuproso que le da color rojo ladrillo característico en la reacción con la muestra problema se observa la coloración rojo ladrillo por presencia de azúcares reductores. En la reacción de reconocimiento de taninos, no fue necesario adicionar 5 gotas de FeCl3, ya que a la primera gota reaccionó, esto demostraría que la guinda contiene un alto contenido de taninos en su composición. Ala concentración de acido cianhídrico hallado en la muestra problema es muy poca lo cual indica la poca toxicidad de la planta u hojas de laurel esta toxicidad se debe a la presencia del grupo CN- . heterósidos cianogenéticos fue mayor en la guinda que en el laurel cerezo. Se determinó la presencia de taninos por medio de la reacción de FeCl3 al 5% el cual dio coloración verde, el cual fue más intenso en la guinda con respecto al laurel cerezo, ya que en la guinda hay mayor concentración de taninos que en laurel cerezo. CONCLUSIONES La “guinda” posee heterósidos cianogenéticos Se determinó la presencia de heterósidos cianogenéticos por medio de la reacciones de de grignard, la concentración de REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS (1) J. MALAGON y A. GARRIDO, Relación entre el contenido en glicósidos cianogenéticos y la resistencia a Capnodis tenebrionis (L.) en frutales de jueso, Bol. San. Veg. Plagas, 16: 499-503, 1990 (2) Glucósidos cianogenéticos disponible en -[http://es.scribd.com/macvero /d/65722266/8-GLUCOSIDOSCIANOGENETICOS:].consultado 1 de junio de 2012. (3) Bruneto, Jean; Farmacognosia, Fitoquímica, Plantas medicinales, 2° edición, Zaragoza: Editorial Acribia S.A, 2001. (4) Amino Acids, Peptides, Proteins and Enzymes: disponible en (http://vcampus.uom.ac.mu/upload/ public/2003122102753.pdf ) visitado el 1 de junio del 2012. (5) Cátedra de Farmacognosia, guía de práctica. Drogas con heterósidos cianogenéticos. 2012.