Escuela:...................................... Asignatura: T. P Química Orgánica II Apellido y Nombre:............................................Curso:........................Div:.................. Profesora: Vega Claudia Alejandra Fecha: ............................ TRABAJO PRÁCTICO N°10 INVESTIGACION DE VITAMINAS FUNDAMENTO Las vitaminas son sustancias orgánicas, de naturaleza y composición variada imprescindibles en los procesos metabólicos que tienen lugar en la nutrición de los seres vivos. No aportan energía, ya que no se utilizan como combustible, pero sin ellas el organismo no es capaz de aprovechar los elementos constructivos y energéticos suministrados por la alimentación. Normalmente se utilizan en el interior de las células como antecesoras coenzimas, a partir de las cuales se elaboran miles de enzimas que regulan las reacciones químicas de las que viven las células Las vitaminas deben ser aportadas a través de la alimentación, puesto que el cuerpo humano no puede sintetizarlas. Una excepción es la vitamina D, que se puede formar en la piel con la exposición al sol, y las vitaminas K, B1, B12 y ácido fólico, que se forman en pequeñas cantidades en la flora intestinal. De acuerdo a su solubilidad la podemos clasificar en: Hidrosolubles: Complejo B:- Liberadoras de Energía: Tiamina (B1), Riboflavina (B2), Niacina (B3), Biotina y Ácido Pantoténico. - Hematopoieticas: Acido Fólico y Vitamina B12 - Otras: Piridoxina (B6), Piridoxal y Piridoxamina. No Complejo B: Vitamina C (Acido Ascórbico) Liposolubles: Vitamina A (Retinol, β-Carotenos), Vitamina D (Colecalciferol), Vitamina K (Filoquinonas, Menaquinonas) y Vitamina E (Tocoferoles). VITAMINA C La Vitamina C o Acido Ascórbico (objetivo de nuestra práctica) la podemos encontrar en carnes, cereales, frutas (cítricos, sandía, melón, papaya, mango, kiwi) hortalizas, leche de vaca, verduras, entre otros. Entre sus principales funciones tenemos: - Antioxidante y captador de radicales libres - Formación y reparación de colágeno - Síntesis de Proteoglucanos La ausencia de ésta vitamina da como resultado la enfermedad conocida como Escorbuto la cual se caracteriza por un defecto de la síntesis de colágeno, que queda de manifiesto por la falta de cicatrización de heridas, defectos de la formación de los dientes, rotura de capilares que conducen a la aparición de abundantes petequias, debilidad muscular, perdida del cabello, entre otros. El ácido Ascórbico actúa como un fuerte agente reductor y en su oxidación cede dos átomos de hidrógeno para transformarse en ácido dihidroscórbico, que también tiene actividad de Vitamina C. En este experimento se aprovechara la capacidad reductora de la vitamina C, que puede actuar sobre el yodo de acuerdo con la siguiente reacción: Vitamina C + I2 → 2Iˉ + Vitamina C oxidada El yodo al reaccionar con la vitamina C la destruye, la oxida, al igual que el aire. El yodo, en presencia del almidón, toma una coloración azul. Si se agrega una pequeña cantidad de almidón al jugo que se quiere analizar y enseguida se le agrega yodo, el yodo reaccionara con la vitamina C del jugo. Cuando toda la vitamina C haya reaccionado con el yodo, al agregar mas yodo, este quedara libre para combinarse con el almidón presente y tomar el color azul, como se indica a continuación: I2 + almidón → color azul 1 La deficiencia en vitamina A produce piel seca... membranas mucosas secas.... a la primera gota con el almidón. que pueden ser iguales o desiguales...... El exceso reacciona inmediatamente..... estas son estructuras constituidas por dos pequeños filamentos o brazos. c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas... ya que las unidades de ADN.. cuando el yodo reaccione transformando la vitamina C. citocina (C) y timina (T).....Escuela:. b) Es el que lleva la información genética de la célula... varían en forma y tamaño. y este se colorea de azul..... Según los descubridores del ADN.Div:. 2 .. están unidos por un punto común llamado Centrómero. indicándonos el consumo de la vitamina C...... guanina (G)............. son las responsables de las características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular........ Pigmento esencial para la visión......... Profesora: Vega Claudia Alejandra Fecha: ..... cada una de las cuales tiene tres sustancias: el ácido fosfórico....... La pentosa es una 2-desoxirribosa... pigmentos que absorben la luz y pueden convertirse enzimaticamente en vitamina a por ruptura del beta caroteno por la mayoría de los animales. P Química Orgánica II Apellido y Nombre:....Curso:..... la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A).... para lo cual necesita que en el núcleo existan nucleótidos. Funciones y Propiedades del ADN a) El ADN controla la actividad de la célula. Los cromosomas químicamente están formados por proteínas y por el Ácido Desoxiribonucleico o ADN.. a los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azúcar y en los peldaños dos bases nitrogenadas.. Asignatura: T............ energía y enzimas............. un azúcar de cinco carbonos llamado pentosa y una base nitrogenada. Estructura del ADN El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos. Ácidos Nucleídos El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas...... llamadas genes... el ADN está formado por una doble cadena de nucleótidos que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral. pueden verse fácilmente al momento de la división celular por medio de un microscopio.... VITAMINA A Vitamina A (Retinol).............. pero muchas plantas contienen carotenoides........ James Watson y Francis Crick.. ¿Cuál es el papel del almidón? El papel del almidón es hacer de indicador. Los genes se localizan a lo largo del cromosoma.. No se presenta en los vegetales. El ácido fosfórico forma el grupo fosfato..... desarrollo y crecimiento retardado y ceguera nocturna..... . de zumo de limón o de naranja y solución de pastillas de vitamina C....... se les añade unas gotas de azul de metileno..... Asignatura: T...........Curso:.......... Observar lo ocurrido.. Tubo 3: un pedazo de pastilla de vitamina C disuelta en el agua..Disolver la pastilla de vitamina A en cloroformo........ Anotar los colores intermedios de este tubo...... Reconocimiento de vitamina C (ácido ascórbico) mediante azul de metileno. En varios tubos de ensayo numerados se vierten 3 ml... P Química Orgánica II Apellido y Nombre:... Tubo 4: además de contener una disolución análoga a la del tercero. Profesora: Vega Claudia Alejandra Fecha: ... Tubo 2: se pone agua destilada caliente y un poco de almidón. formándose una mezcla azul.... Debido a esta facilidad de cambiar de color (azul = oxidado.... Al tubo 4 agregar gota a gota hasta o obtener el color azul....... A los quince minutos de iniciada la experiencia se añade una gota de azul de metileno a los tubos 1 y 3... se les añade unas gotas de disolución de sulfato de cobre al 1 % y se deja reposar para una observación posterior.. INVESTIGACION DE VITAMINAS PROCEDIMIENTO Determinación de vitamina C Primer paso: Prepara cuatro tubos de ensayo. hierro... Se observarán y se interpretarán los resultados obtenidos.. El azul de metileno es un colorante que se reduce fácilmente formando un compuesto incoloro..... de zumo de limón o naranja... Segundo paso: Añadirle una gota de lugol a los cuatro tubos de ensayo. Agitar las mezclas y dar una interpretación de lo ocurrido en cada tubo de ensayo............. Si sometemos el zumo de limón a ebullición se destruirá el ácido ascórbico.. En un tubo de ensayo (número 1) se vierten 4 ml.. se deja enfriar y se le añade una gota de azul de metileno......Escuela:..... RECONOCIMIENTO DE LAS VITAMINAS A Preparación de la pastilla de vitamina A .. la acción será más eficaz si a la vez añadimos cobre.. etc...Div:.. Acción del calor y el cobre sobre la vitamina C.. del zumo u otra bebida..... unas gotas de la disolución de sulfato de cobre y se hierve durante diez minutos..... utilizar esta solución para reconocerla. 3 ...... En un segundo tubo se vierten otros 4 ml.. En el tercer tubo de ensayo se vierte sólo 4 ml... blanco = reducido) será utilizado para el reconocimiento de la vitamina C..... Se retira. Repetir los tubos 3 y 4 con jugo de limón o naranja.. Tubo 1: se coloca agua destilada. se le añade un poco de la disolución de almidón.... El calor y los cationes metálicos (cobre.... de zumo de limón o naranja................) destruyen la vitamina C... .Div:... Extraer la hebra y colocarla en un porta objeto agregarle una gota de safrina o fucsina.. P Química Orgánica II Apellido y Nombre:.. ARN .. para ello nos ayudamos de una pipeta Pasteur. Al triturar las verduras lo que hacemos es romper las membranas de muchas células con lo que liberamos su contenido (orgánulos. Añadir al triturado........... 9... ADN y ARN (que quedan en el líquido sobrenadante).......... Reconocimiento de la Vitamina A. una superior (contiene el etanol) y otra inferior... agregar media cucharada de arena y 10ml de cloroformo.... como células enteras....... y en presencia de metales de transición (Sb).... 7. Añadir al filtrado un volumen igual de solución Tampón.... Profesora: Vega Claudia Alejandra Fecha: ... El tampón contiene una concentración muy alta de iones que permite romper las membranas de las células y del núcleo 1.. Tras la centrifugación se recoge el sobrenadante (con cuidado de no coger el precipitado) de cada uno de los tubos de ensayo.. Filtrar sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.. 3.. membranas... 1º) Limpiar el vidrio de reloj con etanol...... 8..... Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.... Medir el volumen del filtrado con una probeta... ADN.. 5. y una cebolla 4 .... Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas... 50 centímetros cúbicos de agua destilada..... Tras añadir el etanol en nuestra muestra han quedado dos fases.. Esto es debido a que la vit a posee enlaces dobles conjugados... pastilla de Vitamina A y C.... mientras que el resto de materiales se quedan en el “puré”.. Se añaden en el vaso de precipitados sobre nuestra muestra con mucho cuidado: para ello se va dejando caer 10ml de etanol sobre las paredes del vaso de precipitados........ proteínas. 4... grandes orgánulos (se quedan en el fondo del tubo) de los materiales más pequeños como proteínas. la coloración se vuelve fuerte..... Se forma un color azulado... Mezclar vigorosamente durante 2mit..... Este sobrenadante lo pondremos en el vaso de precipitados pequeño... 2º) Una gota de aceite de hígado de bacalao en el centro (vit A)... que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN...) 2... Se centrífuga durante 5mit. 6.. 3º) 3-4 gotas de Cl3Sb.. El etanol hace que el ADN precipite en la interfase etanol-agua... Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección en forma muy lenta. Utilizar la solución del filtrado para el reconocimiento de vitamina A....... pequeños orgánulos. Asignatura: T....... triturar todo y filtrar..... Picar y triturar una cebolla en un mortero. Repetir el procedimiento con la solución extraída de la zanahoria y con la pastilla de vitamina A Extracción de ADN PROCEDIMIENTO Solución Tampón: 240 ml agua destilada + 3g de sal ClNa+ 10 g de bicarbonato + 10 ml de detergente. tapar con el cubre objeto y observar al microscopio... Además el detergente que lleva el tampón ayuda a terminar de romper las membranas de los núcleos celulares en los que se encuentra el ADN y además elimina proteínas que se encuentran protegiendo el ADN... Enfriar a 0º C..Curso:. Extracción de Vitamina A de la zanahoria Colocar una cucharada de zanahoria rallada y deshidratada en un mortero. Al mezclar el “puré” con el tampón conseguimos que se rompan las membranas de las células y de los núcleos sin que se estropee el ADN que queremos obtener y quede libres las fibras de cromatina.... Con la centrifugación se separan los materiales más grandes. núcleos.. Añadir arena y agua destilada para que al triturar se puedan romper las membranas de las células y queden los núcleos sueltos..... visibles a simple vista..Escuela:.. Traer para la práctica limón o naranja..... ...Div:....... Profesora: Vega Claudia Alejandra Fecha: .............Curso:....................................................Escuela:............ Asignatura: T. P Química Orgánica II Apellido y Nombre:........................................... 5 .......................