ANÁLISE ORGÂNICA - CROMATOGRAFIA – EXERCÍCIOS − 6a LISTA 1) Que tipo de amostra deve ser analisada por HPLC em vez de porCG? 2) Por que é preferível usar uma coluna de HPLC empacotada com partículas de diâmetro menor? Como isso se relaciona com a equação de van Deemter? 3) Por que é importante ter poros uniformes no empacotamento de uma coluna de HPLC? 4) Por que a fases móveis com pH ≥ 8 não devem ser usadas em colunas baseadas em sílica? 5) O que é uma coluna de proteção? Qual é a sua finalidade? 6) Existem disponíveis no mercado solventes “grau HPLC”. Por que isso é necessário? 7) O que é uma eluição isocrática em HPLC? 8) Considere uma análise cromatográfica por HPLC usando uma coluna empacotada com uma fase estacionária apolar. Prediga a ordem de eluição dos componentes de uma mistura composta por benzeno, etanol e isopropanol. Justifique a sua resposta. 9) Arrange os compostos representados abaixo de acordo com a sua ordem crescente de tempos de retenção numa análise isocrática de HPLC em fase normal usando como fase móvel uma mistura de hexano:isopropanol (80:20 em volume). OH OH OH HO (1) (2) (3) OH (4) CH3 OH OH 10) Uma separação cromatográfica de uma mistura de compostos foi realizada em uma coluna de fase reversa usando como fase móve uma mistura de metanol:água na proporção de 80:20 (em volume). Se, em uma segunda análise, a composição da fase móvel mudar para metanol:água 70:30, como os tempos de retenção dos solutos serão afetados? Justifique. 1 pseudoefedrina tempo (min) tempo (min) a) um dos cromatogramas foi obtido por cromatografia a gás com coluna capilar. int. cafeína 10.).0 cm.53 µm dimensões: 150 ×dodecano 2. O comprimento da coluna é 15. 12) Considere os dois cromatogramas abaixo: coluna: DB-5ms componentes: coluna: AllureTM Basix 1. acetamonofeno 4.11) Cite os dois tipos de detectores mais comuns em HPLC. 1. Estime os valores das variáveis necessárias para o cálculo a partir da leitura do cromatograma. por HPLC.6 mm 3. hexacosano 2. Explique o seu raciocínio. 2 . hexadecano 5. tetracosano 1. tetradecano (diâm. solvente 9. 60 Å tamanho de poro:octadecano 6. docosano 8. Identifique qual cromatograma foi obtido por cada técnica. eicosano lista de picos: 7. e o outro.5 µm tamanho de partícula: 5 µm 4. 4. b) assinale a técnica correta: técnica que normalmente tem a menor altura de prato: CG capilar HPLC HPLC técnica que normalmente tem o maior número de pratos teóricos: CG capilar c) calcule a altura de prato e o número de pratos para o pico 4 do primeiro cromatograma (pseudoefedrina). decano dimensões: 30 m × 0. octacosano 3. Respostas: 8) etanol > isopropanol > benzeno 9) 4 < 1 < 2 < 3 10) mais longos 12) b) HPLC. isso ocorreu porque a fase móvel foi mudada entre as separações. mas a separação é muito diferente.4-dimetoxiacetofenona 4. o-metoxibifenilo cromatograma A tempo (min) tempo (min) Os cromatogramas foram obtidos usando análise por HPLC em fase reversa. CG capilar cromatograma B 3 . benzoato de etila 6. álcool benzílico 2. Seja específico. a) dê um exemplo de fase móvel que pode ser usada nesse tipo de separação b) dê dois exemplos de detectores que podem ser usados para esses compostos c) dê um exemplo de fase estacionária que pode ser usada para essas separações d) o cromatograma B foi registrado na mesma coluna e com a mesma amostra do cromatograma A. fenol 3. 2. benzoina 5. tolueno 7.6-dimetoxitolueno 8.13) Considere os dois cromatogramas abaixo: picos: 1. 3. Explique como a fase móvel foi alterada de modo a afetar a separação tão dramaticamente.