CONTROL DE CALIDAD DE PRODUCTOS BIOLÓGICOS Y BIOTECNOLÓGICOS Definiciones • Medicamentos de Origen Biológico: Son productos obtenidos a partir de organismos vivos o de sus tejidos, como virus, sueros, toxinas, antitoxinas, sangre, componentes derivados de la sangre, productos alergénicos, hormonas, factores estimulantes de colonias, citoquinas, anticuerpos, entre otros. Las fuentes y métodos de producción comprenden pero no se limitan al cultivo de células, cultivos de microorganismos, extracción a partir de tejidos o fluidos biológicos, técnicas de ADN recombinante, transgénesis, técnicas de hibridoma, propagación de microorganismos de embriones o animales, entre otros. • Medicamentos de Origen biotecnológico: son productos cuyo ingrediente farmacéutico activo se ha obtenido mediante el empleo de microorganismos o células vivas por la tecnología del ADN recombinante y/o técnicas de hibridoma, entre otros. Ministerio de salud y Protección Social (Modificación parcial Decreto 677 de 1995, Versión 24-01-2012) Definiciones continuación… I • Vacunas: Preparaciones que contienen sustancias antigénicas capaces de inducir en humanos una inmunidad activa y específica contra un agente infeccioso, sus toxinas o los antígenos elaborados por éste. • Toxinas/Toxoide: Agentes utilizados para diagnosticar el estado de inmunidad o en terapéutica como inmunomodulador. • Producto Alergénico: Todo producto destinado a identificar o provocar una modificación específica adquirida de una respuesta inmunológica a un agente alergizante. Ministerio de salud y Protección Social (Modificación parcial Decreto 677 de 1995, Versión 24-01-2012) Definiciones continuación… II • Vacuna : Preparaciones que contienen antígenos como ingrediente farmacéutico activo, capaces de inducir una inmunidad activa y específica, con potencial protector frente al agente infeccioso (ó sus toxinas y/o toxoides) del cual provienen dichos antígenos. Estas preparaciones incluyen, las vacunas basadas en microorganismos atenuados, fracciones de microorganismos atenuados ó productos de microorganismos generados mediante procesos biotecnológicos. • Toxinas/Toxoide: SE SUGIERE ELIMINAR ESTE PUNTO del decreto 677 de 1995 . • Producto Alergénico: Producto basado en alergénos, destinado a identificar la reactogenicidad que frente a este ó estos, puede exhibir un individuo con respuesta de hipersensibilidad inmediata (alergia). Facultad de Ciencias, Departamento de Farmacia, Grupo de investigación en inmunotoxicología. Observaciones y sugerencias a la segunda versión fase dos de discusión decreto biotecnológicos. Mayo 30 de 2012. Definiciones continuación… III • Producto biológico: cualquier derivado de la materia viva como virus, suero, toxina o antitoxina. • Virus: cualquier agente infeccioso que pasa a través de los filtros de porcelana que varían entre 0,2 µ y 0,01 µ • Suero: producto obtenido de la sangre humana o animal al eliminar de ésta los componentes del coágulo y las células sanguíneas. • Toxina: sustancia soluble, venenosa, que administrada al hombre o a los animales, en dosis no mortal, tiene la propiedad de producir otra sustancia soluble que neutraliza específicamente la sustancia venenosa. • Antitoxina: sustancia producida como respuesta a la administración de toxinas, con las cuales reacciona específicamente, neutralizándolas. • Vacuna: Todo agente capaz de producir inmunidad activa, contra una enfermedad determinada. • Antígenos: sustancia proteica que introducida en el organismo animal provoca la formación de anticuerpos. • Toxoides: toxina cuya toxicidad ha sido destruida, pero que conserva todavía el poder antigénico. NTC 997 Según la OMS, los siguientes medicamentos son productos biológicos: Vacunas Derivados de sangre y plasma humano Alergenos Sueros inmunes Antígenos Inmunoglobulinas Hormonas Anticuerpos Citocinas Productos de fermentación Enzimas Reactivos empleados para diagnóstico in vitro • PRODUCTO BIOLÓGICO—Todo virus, suero terapéutico, toxina, antitoxina o producto análogo aplicable a la prevención, tratamiento o cura de enfermedades o lesiones en seres humanos. (El término producto análogo indica que incluye esencialmente productos obtenidos por biotecnología y procedimientos que incluyen la terapia génica, los productos transgénicos y la terapia celular somática). USP Vacunas y Bacterias Antígenos Inmunización Activa Toxoides Clasificación productos biológicos, según su uso Antitoxinas Inmunización Pasiva Antiponzoñas Sueros Productos Biológicos Agentes de Diagnostico Toxinas Tuberculinas Antígenos diversos Ponzoñas Productos Varios Alérgenos Pirógenos Proteínas; Extractos Alergenicos NTC 997 Productos biológicos (USP) • Deben contar con una licencia según la Ley y cumplir con el Reglamento sobre Alimentos y Medicamentos. Disposiciones generales: Pruebas de potencia. Pruebas de seguridad general. Pruebas de esterilidad. Pruebas de pureza. Pruebas de agua (humedad residual). Pruebas de pirógenos. Pruebas de identidad. Pruebas de materiales constituyentes. Se deben cubrir aspectos de: Identidad Calidad Pureza Potencia Envasado Almacenamiento Etiquetado Nombre Nombre, dirección y # de licencia de fabricante Fecha de caducidad # de lote Etiquetado Dosis individual recomendada (para envases multidosis) ADICIÓN: Conservante utilizado y la cantidad. # de envases ( si hay mas de uno) Cantidad de producto contenida en el envase. Temperatura de almacenamiento recomendada. Una leyenda. virus producto análogo suero terapéutico Medicamento obtenido a partir de Microorganismos Sangre u otros Tejidos Antitoxina toxina Agentes Inmunizantes activos (Vacunas) Extractos alergénicos Modificadores de la respuesta biológica (citocinas) Sangres y derivados de la sangre Terapias celulares Productos diagnósticos • Anticuerpos y antígenos in vitro • Antígenos de prueba cutáneos diagnósticos in vivo Enzimas y venenos Agentes inmunizantes pasivos (productos con anticuerpos) Lotes aprobados: si cumplen con los requisitos de Control Específicos para dicho producto según está establecido. Licencias: • Aprobación de serie de pasos de producción •Pruebas durante el proceso, •Especificaciones sobre el producto final. • Pruebas que aseguren que el material contenido en el envase se corresponde con lo indicado en la etiqueta del Identidad: mismo. • Pruebas específicas para cada producto que indiquen si éste, al ser administrado a un individuo, estimulará una Potencia: respuesta inmune adecuada. • Pruebas que permiten detectar la ausencia de productos extraños en la preparación (sean o no peligrosos para el individuo o dañinos para el producto). Pureza Esterilidad <71> • Pruebas que demuestren la ausencia de organismos vivos en la preparación. Endotoxinas Bacterianas <85> • Las endotoxinas son un subconjunto de pirógenos que vienen de bacterias gram negativas, son tóxicas Seguridad General <88>: • esta diseñada para detectar cualquier reactividad biológica imprevista e inaceptable en un artículo. • esta diseñada para limitar a un nivel aceptable el riesgo de reacción febril en pacientes a los que se inyecta un determinado producto. La prueba mide el aumento de la temperatura corporal en conejos a los que se inyecta una Pirógenos <151> solución de prueba por vía intravenosa. Agua (Humedad Residual) <921>: • Permite cuantificar la cantidad de agua presente , en forma de hidratos o agua en forma adsorbida. Productos Biológicos Auxiliares y diversos materiales, para su producción Conservantes Diluyentes Adyuvantes Medios de Cultivo Todo material y compuesto usado debe cumplir con las normas Farmacopéicas. • Obtenida de suero o plasma sanguíneo • Potencia: ensayo de neutralización en cultivos de tejido o en ratones •Preparación en cultivo del virus en embriones vivos en huevos de gallina •Suspensión •Secado Potencia: •DL 50 en ratones •Unidades Formadoras de placas Producto Biológico Medicamento Producto Biotecnológico Medicamento Proteínas Recombinantes, Anticuerpos Virus, Suero Terapéutico, Monoclonales, Vectores para el transporte de Toxina, Antitoxina o Producto material genético, Fragmentos de Anticuerpo, Análogo Ácidos Nucléicos, Oligonucleótidos Antisentido, Vacunas, etc Obtenido a partir de Microorganismos, Sangre u otros Tejidos Tejidos aplicable a la prevención, tratamiento o cura de enfermedades o lesiones del hombre. Obtenidos a partir de técnicas de biotecnología Comparten la característica de ser productos medicinales Terapia celular: ingredientes activos células vivas de mamíferos génica: incluye fragmentos de acido nucleídos (ADN) Vectores virales Ácidos nucleícos en formulación simple Ácidos nucleídos formulados liposomas. Halogenicos Autologos Xenogenicos Aptitud Identificación Caracterización Materias Primas Identificación. • Toxicidad • Disponibilidad • Uniformidad • Uniformidad • Rastreabilidad Aptitud: : su fin es estimar riesgo para la seguridad , potencia y pureza. • Biocompatibilidad con materiales poliméricos. • Toxicidad Caracterización: • • • • Identidad Pureza Funcionalidad Ausencia de contaminante adventicios. Metodologías analíticas Pruebas de identidad Pruebas de seguridad Pruebas de pureza Celular Citometria de flujo. Génica Viral Mapeo de enzimas de restricción Isoenzimas Inmunoensayos Morfología y tiempo de duplicación. • Prevenir el uso inadvertido de células las, tejidos o agentes de terapia génica contaminados y con riesgo de transmitir enfermedades infecciosas. • Evitar el uso de productos mal manejados o procesados y en consecuencia contaminados. • Garantizar la seguridad cuando se adaptan terapias celulares y génicas par un uso diferente del de sus funciones o contextos normales. • VIH tipo 1, VIH tipo 2, hepatitis B, hepatitis C y sífilis Pruebas especificas: • detección sistémica, indicación de alto riesgo de infección antecedentes médicos • PCR y el análisis de hibridación del ADN o ARN por dot blot Terapia celular Terapia viral. Citometria de flujo Electroforesis PAGE no desnaturalizante. Seguido de westerm blot Hibridación de ADN dot blod ELISA cuantitativo HPLC analítica Secuenciación de péptidos Espectroscopia de masas. Análisis General DESCRIPCIÓN IDENTIFICACIÓN VALORACIÓN - Titulaciones IMPUREZAS - Metales pesados - Titulación - Electroforesis - Perdida por secado - Espectrometría de masas - RMN - Determinación de agua - Espectrofotometría - Cromatografía - Color - Electroforesis - Espectrometría de masas - RMN - Cromatografía - Electroforesis - Espectrometría de masas - RMN - Cristalinidad - pH - Rotación óptica Ensayos Fisicoquímicos • RMN, cromatografía, electroforesis, Masas, distribución de partículas, pH, índice de refracción, espectrofotometría Caracterización Funcionalidad Seguridad • Cromatografía, electroforesis, masas, RMN, Valoraciones de contenido proteico, secuenciación de proteínas • Reactividad biológica in vivo, in vitro. Análisis biológico, Adecuación biológica de Proteínas • Test limite microbiano, Pruebas de esterilidad, Prueba de endotoxinas, Prueba de pirógenos, Seguridad viral. Análisis de construcción expresable en células usadas para la producción de productos proteicos obtenidos con ADN recombinante DEFINICIONES – Construcción Expresable Vector de expresión que contiene la secuencia codificadora de la proteína recombinante y los elementos necesarios para su expresión – Banco de Células Madre BCM Es una alícuota de una combinación única de células que se ha preparado por lo general a partir de un clon celular seleccionado en condiciones definidas, dispensada en múltiples recipientes y almacenada en condiciones definidas – Banco de Células de Trabajo BCT Alícuotas de una suspensión homogénea de células obtenidas del cultivo del material del BCM en condiciones de cultivo definidas Evaluación general de calidad Análisis de ácidos nucleícos Evaluación de la proteína final purificada Análisis de segmentos de la construcción expresable Análisis de segmentos Asegura calidad y uniformidad del producto final Evalúa la secuencia codificadora de un gen recombinante IMPORTANTE • Incorporación de la secuencia codificadora correcta • La secuencia se mantiene sin cambios desde el comienzo del cultivo hasta el final de la producción Técnicas empleadas Análisis de ácidos nucleícos • Asegura que la proteína expresada tendrá la secuencia de aa correcta • Estado físico de la construcción expresable Análisis de la proteína • Evalúa secuencia de aa y características recombinante estructurales purificada. • Análisis del producto de la transcripción • Determina que copia integrada de la construcción expresable es activa Análisis de ARNm. Caracterización del sistema de expresión Id y fuente de la célula originaria Método empleado para la preparación de ADN Detallar secuencia completa del plásmido Pasos empleados para ensamblar la construcción expresable Cuantas proteínas expresables son codificadas por el plásmido Determinar secuencia nucleotidica de la región codificadora del gen de interés y de las regiones adyacentes Evaluación de seguridad viral en productos biotecnológicos obtenidos de líneas celulares de origen humano o animal La seguridad de estos productos respecto a la contaminación viral se garantiza mediante: • Aplicación de un programa de pruebas de detección viral • Evaluación de procesos de eliminación e inactivación viral efectuados durante la fabricación Enfoques en el potencial de contaminación viral 1. • Determinación de ausencia de virus indeseables, infecciosos y/o patógenos para los seres humanos, en líneas celulares y otras materias primas 2. • Evaluación de la capacidad de los procesos de producción para eliminar los virus infecciosos 3. • Realización de pruebas de producto en fases apropiadas de la producción para verificar la ausencia de virus infecciosos contaminantes Limitaciones Capacidad de detectar concentraciones virales bajas • Depende por razones estadísticas del tamaño de la muestra Aplicar un solo enfoque no establecer la seguridad de un producto La certeza de ausencia de virus no se establece únicamente con pruebas directas • Demostrar la capacidad de eliminar o inactivar los virus Alcance • Depende de Caracterización del banco de células Naturaleza de virus detectados Componentes del medio de cultivo Métodos de cultivo Diseño de instalaciones Equipos Capacidad del proceso para eliminar virus Tipo de producto Uso clínico del producto Fuentes de potenciales de contaminación viral Fuente original de las líneas celulares • Derivación de líneas celulares de animales infectados • Empleo de virus para establecer la línea celular • Empleo de reactivos biológicos contaminados • Contaminación durante la manipulación de las células Introducción accidental de virus durante los procesos de producción • Empleo de reactivos biológicos contaminados • Empleo de virus para inducir la expresión de genes específicos que codifican la proteína deseada • Reactivo contaminado • Excipiente contaminado durante la formulación • Contaminación durante la manipulación de las células y del medio Pruebas para la detección del virus Sugeridas para BCM, BCT y células en el limite de edad celular in vitro empleadas para producción Procedimientos de Depuración Viral Objetivo • Evaluar el paso o los pasos del proceso que pueden considerarse eficaces para la inactivación o eliminación de los virus • Hacer el cálculo cuantitativo del nivel general de reducción viral obtenido por el proceso Procedimiento Introducción deliberada de cantidades significativas de un virus al material crudo y/o diferentes fracciones obtenidas durante los diversos pasos del proceso Comprobar la eliminación o inactivación durante los pasos posteriores Infectividad viral Inactividad Eliminación Selección de Virus Virus relevantes • son virus id o de la misma especie que los virus conocidos que contaminan las células sustrato o en el proceso Virus modelo específicos Virus modelo no específicos • Virus relacionado estrechamente con el virus conocido o presunto (mismo genero o familia), con propiedades FQ similares a las del virus observado • Cualquier virus que demuestre la capacidad del proceso de fabricación para eliminar y/o inactivar los virus en general (robustez del proceso de depuración) Bibliografía • USP 30, Farmacopea de Estados Unidos de América, 2007, Volumen 1. • NTC997 1975 Productos biológicos, definición y clasificación. • Facultad de Ciencias, Departamento de Farmacia, Grupo de investigación en inmunotoxicología. Observaciones y sugerencias a la segunda versión fase dos de discusión decreto biotecnológicos. Mayo 30 de 2012. • Modificación parcial Decreto 677 de 1995, Versión 24-01-2012
Report "Conctrol de calidad de Productos Biologicos y Biotecnologicos"