BACTERIAS HALÓFILASSe llaman halófilos a aquellos organismos que requieren cierta concentración de NaCl para su desarrollo y crecimiento. Pueden ser clasificados en función de la cantidad de sal que requieren, siendo capaces de crecer en condiciones de extrema salinidad. a) Características morfológicas y de cultivo Características Morfología: Cocos, bacilos, formas raras. Coloreadas por la presencia de Carotenoides Características de cultivo: Halófilos extremos (crecen mejor en medios que contienen 2.5- 5.2 M de sales totales), halófilos extremos en el límite (crecen mejor en medios que contienen 1.5-4.0 M de sales totales), halófilos moderados (crecen mejor en medio que contienen 0.5-2.5 M de sales totales). Asimismo, un microorganismo halotolerante es el que no muestra un absoluto requerimiento de sal para crecer pero que se desarrolla bien en alta salinidades. b) Hábitat y fuentes de aislamiento La diversidad de los microorganismos halófilos es muy variada. Muchos de estos microorganismos han sido aislados de hábitats que presentan alta salinidad. Los ambientes extremadamente salinos son raros, la mayoría se encuentran en zonas calientes y secas, como son lagos salinos, suelos salados y alimentos salados principalmente. Se han aislado halófilos extremos en alimentos con alta concentración de sal, como salmueras, salsa de soya y pescado c) Resistencia a los agentes físicos y químicos Alta resistencia contra los antibióticos y los agentes líticos d) Contaminación y efecto sobre los alimentos Las primeras evidencias de contaminación de alimentos por bacterias halófilas, o amantes de la sal, provienen de principios del siglo XX, cuando se observaba crecimientos bacterianos de coloración rojopúrpura en algunos alimentos salados. Entonces, si la idea era preservar por largos periodos de tiempo los alimentos salados, la presencia de esas manchas color rojo-púrpura era muy mala noticia. Sucede que las bacterias halófilas secretan carotenoides, un tipo de pigmentos que les permite obtener energía y protegerse de la Esto no sucede con las células de los organismos halófilos. como cloruro (Cl-) o fosfato (PO 32-). se propicia la adaptación de todos los sistemas intracelulares a una alta concentración (hasta 373 g/L) de cloruro de potasio (KCl) en el citoplasma. lo que conduce a una pérdida de agua celular y. De este modo. La estrategia de sal-interior es utilizada por las haloarqueas y las bacterias del orden Halanaerobiales. las cuales evitan su ruptura. pues la alta concentración de Na+ en el exterior provoca un incremento en la presión ejercida sobre la célula. En este caso. Las cargas positivas acumuladas se compensan con iones negativos. Algunos microorganismos anaerobios. señal de la irremediable descomposición de los alimentos. e) Factores que influyen en su supervivencia y desarrollo Las células de los organismos no halófilos se rompen cuando son expuestas a salinidades mayores de 10-12% de NaCl. consecuentemente. los cuales también se pueden incorporar del medio. Una de ellas es utilizada por los halófilos más extremos. al mismo tiempo que incorporan iones de potasio (K+). simplemente incorporan solutos compatibles cuando éstos se agregan al medio de cultivo en el que se desarrollan. La otra estrategia se basa en la síntesis o acumulación de solutos compatibles. como polioles —alcohol polihídroxilado — y azúcares. así como Salinibacter ruber. y su presencia es característica de cada especie. los sistemas intracelulares no requieren adaptación alguna. Por ello. ya que la sal se mantiene fuera de la célula. los halófilos utilizan transportadores específicos localizados en la membrana celular que permiten la entrada de los solutos compatibles hacia el citoplasma o interior de la célula. con metabolismos de baja energía. Los solutos compatibles son compuestos orgánicos de tipo aminoácido. Esta estrategia se conoce como sal interior. Ese era el origen de las manchas coloridas.radiación UV. Para ello. azúcar o alcohol (figura 2). a su inevitable ruptura. debido a la marcada diferencia en la concentración del catión sodio (Na+) entre el interior y el exterior de las células. y consiste en liberar cationes de sodio (Na+) hacia el exterior de la célula. Los más comunes son aquellos que requieren poca energía para su producción dentro de la célula. porque ellos cuentan con alguna de las dos estrategias adaptativas conocidas. Estos mecanismos de adaptación a la salinidad permiten a los . esta estrategia se conoce como sal-exterior. 5 usando un medidor potenciométrico de pH. 1 g de nitrato de magnesio. 200 g de cloruro de sodio y 1000 cm3 de agua destilada. añadir un 10 por ciento de leche descremada y a la otra. con una edad hasta 250 millones de años. fundir la porción B. 0. f) Demostración y recuento en el laboratorio El método se basa en realizar un cultivo sobre un medio sólido selectivo y observar el desarrollo de colonias rojas propias de las bacterias halófilas.halófilos tener tiempos récord de vida en fase de latencia. ajustar el pH de la solución a 7. 5 g de sulfato de magnesio.025 g de cloruro férrico. esterilizarla en autoclave a 121° C durante 15 min y luego dividirla en dos porciones iguales. se ha demostrado que microorganismos encontrados en cristales de yeso-halita (formas minerales del sulfato de calcio — CaSO4·2H2O— y el NaCl) están activos. . 5 g de peptona. calentar la porción A (que debe estar bien mezclada para asegurar una suspensión uniforme) y. porque han sido capaces de incorporar carbono y nitrógeno por periodos de hasta un año. un 3 por ciento de agar. 10 g de glicerina. REACTIVOS Medio de cultivo (Dussault y Lachance). B. que constituyen una forma mineral del NaCl. Mezclar. verter porciones de 15 cm 3 a 20 cm3 en cada caja de Petri y dejarlas solidificar a temperatura ambiente. en un recipiente adecuado. A. Calentar un poco la mezcla para disolver los ingredientes. A la una porción.1) sobre la superficie del medio de cultivo en una caja de Petri. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Mezclar íntimamente la muestra y guardarla en un frasco estéril herméticamente cerrado hasta el momento del análisis. Se reportado la presencia de haloarqueas dentro de halitas. Inmediatamente antes de usar el medio. luego de mezclarlas íntimamente. ha de de un Por otro lado. o rocas sal. PROCEDIMIENTO Espolvorear 1 g de la muestra para ensayo (ver 7. y pueden crecer si son colocadas en medio nutritivo. En los ambientes talasohalinos predomina inicialmente el NaCl. que es de. Existen dos tipos de ambientes hipersalinos: los talasohalinos — (del griego thalasa: mar y hals. También son llamados halófilos extremos. h) Géneros y especies prominentes Domini Archaea o: Filo: Euryarchaeota Clase: Halomebacteria Cavalier-Smith 1986 Halobacteria Grant et al. halós: sal) que surgen a partir de la evaporación del agua marina. por lo que su proporción inicial de sales es similar a la del agua de mar— y los atalasohalinos —que proceden de la disolución de los depósitos de sales originalmente ubicados en los continentes—. 1974 . 1989 Familia: Halobacteriaceae GIBBONS. 2002 Haloarchaea DasSarma et DasSarma 2008 Orden: Halobacteriales GRANT & LARSEN. aunque este nombre también se refiere a otros organismos que viven en medios con alta concentración salina.g) Interpretación de su hallazgo y abundancia Se encuentran en el agua saturada o casi saturada de sal. Los ambientes hipersalinos contienen una concentración de sales mayor de la que se considera promedio en los mares y océanos terrestres.5% de NaCl. pero van acumulando otras sales a medida que el agua se evapora. Las salinas son ejemplos típicos de ambientes talasohalinos. 3. aproximadamente. Estos organismos no requieren un alto valor de actividad de agua y toleran los ambientes más secos que los organismos no osmotolerantes. . Su gran importancia es debido a que causan el deterioro de productos como los zumos de frutas. Se sabe que casi todos los microorganismos osmófilos son levaduras (sin embargo también existen bacterias osmófilas) muy similares a los organismos halófilos (que se encuentran en medios salinos). El término "Saccharomyces" deriva del griego. los organismos Osmófilos se protegen contra esta alta presión osmótica por la síntesis de osmoprotectores tales como alcoholes y aminoácidos. además de tener aplicaciones industriales como la fermentación de la cerveza.BACTERIAS OSMÓFILAS Los Organismos osmofílicos son microorganismos adaptados a ambientes con altas presiones. los jarabes o la miel. sin embargo. Saccharomycesboulardii (usado en medicina). Las altas concentraciones de azúcar representan un factor de crecimiento limitante para muchos microorganismos. baja actividad de agua. Saccharomyces bayanus (elaboración de vino y sidra) y Debaryomyces. así como altas concentraciones de azúcar (10 a 20% de glucosa). Algunos ejemplos de este tipo de microorganismos osmófilos son: Saccharomyces cerevisiae (levadura de la cerveza). Estos microorganismos suelen ser microorganismos de vida libre muy cercanas a las salinas. panificación. que significa "moho del azúcar". producción de vinos entro otros. son unicelulares. beiges o un poco más oscuros.a) Características morfológicas y de cultivo Casi todos los microorganismos osmófilos son levaduras y debido a que el género en la mayoría de los casos es Saccharomyces. sus células tienen forma y dimensiones diversas. Algunas son rosadas o rojas porque tienen carotenoides. desde las esféricas ovoides y elipsoidales. La mayoría de las colonias jóvenes son redondas. Las levaduras crecen en medios sólidos (con agar) formando colonias muy semejantes a las de las bacterias. de 2-3 mm de diámetro. a las cilíndricas que pueden ser muy alargadas y aun filamentosas. blancuosas. en base a esto se presentará su morfología: Las levaduras son muy parecidas a bacterias macroscópicamente pero son más cremosas y los colores que presentan son blancos. . Temperatura Existen levaduras que pueden crecer a muy diversas temperaturas.0 hasta los 8. por ejemplo frutas.. En general.8.b) Hábitat y fuentes de aislamiento Estos microorganismos viven en presencia de alta concentración de azúcares. Las facultativas crecen mejor en aerobiosis y bajo condiciones anaerobias lo hacen más lentamente. habitualmente.-Oxigeno Las levaduras crecen bajo condiciones aerobias.5 y 7. Para la mayoría de las bacterias el pH óptimo de crecimiento está entre 6. la mayoría de las especies . esta después se deposita sobre la superficie del cultivo agarizado en placa petri. generalmente en un rango que va de 0 a 50°C. Algunas son estrictamente aerobias y otras son facultativas. y las que pueden desarrollarse tanto en medios aerobios como anaerobios se denominan fermentativas. 3. al igual que los mohos.5 aun cuando algunas pocas especies pueden crecer en los extremos del rango de pH. c) Resistencia a los agentes físicos y químicos 1. Las levaduras aerobias estrictas se conocen como oxidativas. El aislamiento de las levaduras puede efectuarse.-pH La acidez o alcalinidad de un medio de cultivo se expresa por su pH. con el método de las placas. 2. flores. Este consiste en introducir un asa de platino esterilizada en una suspensión de microorganismos convenientemente diluida.0. y cortezas de arboles.6). Sin embargo estas pueden tolerar un rango de pH que va desde 2.5. se considera que las levaduras. se desarrollan mejor en medios ácidos (3. un grupo de levaduras que toleran cantidades de soluto aun mayores. tienen temperaturas optimas de crecimiento entre los 22 y 30°C. d) Contaminación y efecto sobre los alimentos Son importantes debido a que causan el deterioro de la industria azucarera y productos dulces. . Los organismos Osmófilos con posible patogenia son Aspergillus. 4. además. azúcares líquidos. 5. Otros microorganismos necesitan para crecer elevadas concentraciones de solutos. a éstos se les denomina osmófílicos. la miel y en algunos casos el mazapán. En la siguiente tabla se presentan como ejemplo algunos microorganismos y el valor de aw en el que se produce su crecimiento. zumos concentrados de frutas.. Enterobacter aerogenes y Micrococcus.saprófitas. ninguno de ellos es altamente patógeno. es decir. Sin embargo.99. Son más bien una causa intoxicación alimentaria en humanos. las infecciones en personas con el sistema inmunológico debilitado.Actividad de Agua El aw mínimo en que las bacterias crecen varía ampliamente pero los valores óptimos para la mayoría de las especies son mayores de 0. con productos como zumos de frutas. Existe.Concentración de soluto Las levaduras pueden generalmente desarrollarse en medios con concentraciones relativamente altas de solutos.. y sólo causan infecciones oportunistas. Saccharomyces. Existen ciertos microorganismos que pueden crecer en medios con elevadas concentraciones de solutos y se conocen como osmotolerantes. sin embargo. por lo que se denominan osmófilas. NORMA TECNICA ECUATORIANA NTE 1529-19. El procedimiento se basa en la cuantificación de la población microbiana presente en los alimentos sólidos o líquidos. Los rangos óptimos de crecimiento microbiano es a Aw=0. Se caracterizan por desarrollarse a presión osmótica interior alta. Presión osmótica es alta. a diferencia de los halófilos que se desarrollan a presión osmótica exterior alta. Parámetros que afectan la supervivencia de los microorganismos: cuando se produce agua y ácidos orgánicos en alimentos. cercanos a las salinas. sembrando en profundidad o en superficie. es decir en ambientes naturales con concentraciones altas de sales. Suelen ser microorganismos de vida libre. Ambos favorecen el crecimiento posterior de las levaduras osmófilas. las cuales se pueden relacionar con el recuento de microorganismos multiplicado por el factor que es el inverso de la dilución.e) Factores que influyen en su supervivencia y desarrollo Requieren para crecer un medio con alta presión osmótica. Recuento en placa por siembra profunda. por tanto necesitan poca agua para vivir. Se realizan diluciones logarítmicas en base 10 para su cuantificación. Los microorganismos Osmófilos necesitan una elevada presión osmótica para poder desarrollarse.85. se aumenta la Aw y reducen el pH. Crecen en diluciones de elevada osmolaridad.60-0. f) Demostración y recuento en el laboratorio Control microbiológico de los alimentos. Microorganismos osmófilos. mientras que el pH disminuido acarrea la hidrólisis de la sacarosa para producir más azúcar invertido. Entre los factores ambientales y crecimiento microbiano: los microorganismos osmófilos viven en presencia de altos valores de azúcares. . entre los microorganismos altamente resistentes a baja Aw se encuentran los osmófilos. sin olvidar que se guarde una relación 1+ 9 o sea parte del alimento y 9 partes de diluyente. . se selecciona las cajas entre 20 y 100 colonias y multiplicar por el inverso de la dilución. Para la determinación de Levaduras: se preparan diluciones de igual forma que para recuento en placa. Se informa el número de UFC/g o ml de alimento. Recuento de levaduras. El agar a necesitar es extracto de maltaoxitetraciclina (OGY) fundido a 45ºC en cada caja petri.La cantidad de muestra va a depender del tipo de alimento y de los parámetros que existan. Las levaduras se pueden encontrar como carga normal de los alimentos con bajo pH y Aw. alto contenido de sólidos como sal o azúcar y temperaturas bajas de almacenamiento. Se incuba a 22ºC por 5 a 7 días. Este tipo de microorganismos está presente y alteran alimentos como caramelos.g) Interpretación de su hallazgo y abundancia Las levaduras encontradas en el azúcar son principalmente osmófilas. Los Xerófilos son organismos que se definen como aquellos que crecen más rápidamente bajo condiciones de relativa sequedad o capaces de multiplicarse a aw inferiores a 0. Las cuales son consideradas difíciles de deteriorar por microorganismos. de igual forma las bacterias osmófilas crecen en concentraciones elevadas de azúcar. miel de abeja y confituras. Por debajo de un valor de aw 0. Asimismo estas se alteran en consecuencia del crecimiento de estas en la película de la melaza con metabolismo preferencial del componente de fructuosa de los azucares invertidos. etc.60 ya no tienen lugar la multiplicación microbiana. frutos Secos y copos de cereales. Todos los microorganismos xerófilos conocidos son mohos o levaduras. este término se aplica habitualmente a las levaduras tolerantes al azúcar y es sinónimo de xerófilo. confituras.85. tales como mermelada. frutas deshidratadas. así mismo los microorganismos osmófilos son aquellos que crecen en hábitats con altas presiones osmóticas. . Hay especies de levaduras osmófilas que deterioran alimentos con un porcentaje elevado de azúcar. ácido acético y alcoholes. Tolera elevadas concentraciones de sal. Bibliografía Revista ciencia y desarrollo – vida microscópica en mundos salados – Marzoabril del 2013 http://www. Con potencial probiótico. pan y cerveza. favoreciendo el crecimiento posterior de las levaduras osmófilas. Levadura de la cerveza. tanto en los alimentos como en nutracéuticos. Saccharomyces boulardii. siendo capases de crecer en la superficie de las salmueras de los quesos con altas concentraciones de sal de orden 24 por cien. Se emplea fundamentalmente en la elaboración del vino así como de la sidra.conacyt. que aumentan la (Aw) y reducen el pH. Debaryomyces.Muchas de las veces al producir agua y ácidos orgánicos. Saccharomyces bayanus.mx/264/articulos/vidas-microscopicas-mundossalados. Este género se usa en la producción de vino. Halófilos que se aplica a los organismos que viven en medios con presencia de gran cantidad de sales.html . Además los microorganismos Osmofilos pueden ser: Las especies sacarolíticas las cuales utilizan azúcares para formar ácido butírico.cyd. h) Géneros y especies prominentes Saccharomyces cerevisiae. en concreto de los procesos de fermentación alcohólica.gob. mientras que el pH disminuido acarrea la hidrólisis de la sacarosa para producir más azúcar invertido. pdf http://www.org/wiki/Halobacteria SAL COMÚN.net/laboratorio_001/03-ecologiadelasbacterias Wikipedia enciclopedia libre – Staphylococcus https://es.scielo.com/microbiologia_2.com/index.mybiolumix.com/rapid-microbiological-testing-of-osmophilic-yeast-withthe-biolumix-vial/ http://www.nlm.normalizacion.nih.diversidadmicrobiana.php?script=sci_arttext&pid=S131525562004000100004 http://www.redalyc. 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