Anticuerpos Antinucleares

Documento descargado de http://http://www.reumatologiaclinica.org el 11/04/2013.Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. ARTICLE IN PRESS Reumatol Clin. 2010;6(4):224–230 www.reumatologiaclinica.org ´ n me ´ dica continuada Formacio Anticuerpos antinucleares$ ´ lvarez Ã ń ˜ ez-A Javier Cabiedes ~ y Carlos A. Nu ń, Me á, Departamento de Inmunologı á y Reumatologı á, Instituto Nacional de Ciencias Me ´dicas y Nutricio ń Salvador Zubira ´xico DF, Me ´xico Laboratorio de Inmunologı ´ N D E L A R T´ INFORMACIO ICULO R E S U M E N ćulo: Historia del artı Recibido el 24 de julio de 2009 Aceptado el 1 de octubre de 2009 On-line el 30 de diciembre de 2009 Palabras clave: Anticuerpos antinucleares Inmunofluorescencia indirecta Enfermedades autoinmunes ´ logos Los anticuerpos antinucleares son inmunoglobulinas que reconocen componentes celulares auto ´ ticos). Adema ´ s de los ANA autoinmunes, pueden estar en circulacio ´ n ANA (nucleares y citoplasma infecciosos y naturales. ´ n de ANA debe realizarse mediante inmunofluorescencia indirecta (IFI) en lı ńeas celulares La deteccio como prueba de tamizado inicial debido a su alta sensibilidad. Una muestra positiva para ANA, detectados ´ cnicas ma ´ s sensibles y especı ´ficas como ELISA, electromediante IFI, debe confirmarse mediante te inmunotransferencia (Western blot) u otras. ´ n y al tı ´tulo. La deteccio ´ n especı ´fica de Los ANA detectados por IFI deben ser evaluados en base al patro ´ til en el diagno ´ stico y seguimiento de pacientes diversos autoanticuerpos (anti-ENA, ADNcd, etc.) resulta u ´ n debe realizarse de manera ordenada y con enfermedades autoinmunes. Por tal motivo, su deteccio ás o estrategias enfocadas al buen uso e interpretacio ´ n de la presencia de razonable, empleando las guı ´ n es presentar una recopilacio ´ n de la literatura y nuestra autoanticuerpos. El objetivo de la revisio ´ n y estudio de los ANA. experiencia en la deteccio ˜ a, S.L. Todos los derechos reservados. & 2009 Elsevier Espan Antinuclear antibodies A B S T R A C T Keywords: Antinuclear antibodies Indirect immunofluorescence Autoimmune diseases Anti-nuclear antibodies (ANA) are immunoglobulin directed against autologous cell nuclear and cytoplasmic components. Besides the autoimmune ANA there are other ANA that can be detected in circulation, like natural and infectious ANA. Because of its high sensibility, detection of the ANA must be done by indirect immunofluorescence (IIF) as screening test and all of those positive samples are convenient to confirm its specificity by ELISA, western blot or other techniques. Positive ANA detected by IIF must be evaluated taking in to account the pattern and titer. The following recommended step is the specificity characterization (reactivity against extractable nuclear antigens [ENA], dsDNA, etc.) which is useful for the diagnosis and follow up of patients with autoimmune diseases, and by such reasoning, its detection must be performed in an orderly and reasonable way using guides or strategies focused to the good use and interpretation of the autoantibodies. The objective of this review is to present a compilation of the literature and our experience in the detection and study of the ANA. ˜ a, S.L. All rights reserved. & 2009 Elsevier Espan ń Introduccio ´ con El estudio de los anticuerpos antinucleares (ANA) se inicio ´ n en pacientes con lupus eritematoso generalizado la identificacio ´ lulas LE, descrito por Hargraves en 19481. La (LEG) de las ce ´ n de las ce ´ lulas LE fue durante mucho tiempo una prueba deteccio ´ stico de LEG. Sin embargo, an ˜ os utilizada para confirmar el diagno ´ s se demostro ´ su baja especificidad, ya que pueden estar despue ńdrome de presentes en pacientes con artritis reumatoide (25%), sı $ ´ n acreditada por el SEAFORMEC con1,7 cre ´ ditos. Consultar Nota: Seccio ćulo en: URL: http://www.reumatologiaclinica.org. preguntas de cada artı Ã Autor para correspondencia. ´ lvarez). ńico: [email protected] (C.A. Nu ń ˜ ez-A Correo electro ~ In memoriananuestromaestroyamigo ´ tica (33%), hepatitis cro ´ nica ¨ Sjogren (15–20%), cirrosis pancrea activa (50–70%) y en otras enfermedades (1–2% miastenia gravis y ´ rpura trombocitopenia idiopa ´ tica). En 1959, Holman mostro ´ pu ´ meno de las ce ´ lulas LE se debı á a la presencia de que el feno ´ ´genos nucleares2. Lo anterior llevo anticuerpos que reconocen antı ´ ´ n (doble difusio ń al desarrollo de tecnicas como la inmunodifusio radial u Ouchterlony y contrainmunoelectroforesis), hemoagluti´ n, fijacio ´ n de complemento, etc. y de te ´ cnicas de micronacio á, empleando anticuerpos conjugados con mole ´ culas fluoscopı rescentes (inmunofluorescencia indirecta [IFI]) que aumentaron la ´ n. Actualmente, la especificidad y sensibilidad para la deteccio ´ cnica ma ´ s utilizada para la deteccio ´ n de los ANA es la IFI, la cual te fue desarrollada en 1950 por Conns et al3 y, posteriormente, modificada por Tan4 en 1966, que empleaba como sustratos cortes ´gado o rin ´ n de rato ´ n. Diez an ´ s tarde, publicaron los õ ˜ os ma de hı ˜ a, S.L. Todos los derechos reservados. 1699-258X/$ - see front matter & 2009 Elsevier Espan doi:10.1016/j.reuma.2009.10.004 los cuales ´rdida de la tolerancia inmunolo ´ gica y su origen es reflejan la pe ´ n depende de carga gene ´tica. etc. medio multifactorial. Por ello. ELISA. Si bien existe reconocen son referidos tambie ´ n a si es correcto o no llamar a los patrones controversia en relacio ´ smicos como ANA para simplificar la forma de referirse a citopla ´genos ubicuos del nu ´ cleo o los autoanticuerpos que reconocen antı ´ n. dada su ´ cnicas ma ´s relativa baja especificidad. En este sentido. Reconocen componentes ubicuos (ADN. la deteccio ńeas celulares HEp-2 y HeLa. etc. etc. ´mulo antige ´ nico que origina su sı ńtesis No se conoce el estı ´tulos relativamente altos ˜ os y adultos mayores pueden estar presentes a tı En nin Infecciosos ´mulos antige ´ nicos externos (infecciones) Producidos en respuesta a estı 1.org el 11/04/2013. No se asocian a manifestaciones clı Funciones: ńea de defensa contra pato ´ genos 1. no tRNA sintetasa o Jo-1. Isotipos IgG. Reconocen componentes ubicuos (ADN.) fosfolı ´tulos disminuyen cuando desaparece el 5.) fosfolı ´tulos fluctu ´ an a lo largo del curso de la 5. ´ n de los ANA Clasificacio ´ n pueden estar presentes tres tipos de ANA. Participan en la red de regulacio antiidiotipo. Ignacio Garcı ´ n personal. Copia para uso personal. otros) . Depuracio ´ n idiotipo3. Son de alta avidez ń 2. Son polirreactivos ńicas 6. Jornadas Me ´ dicas de Actualizacio ´ n en comunicacio ´ xico DF). el valores normales de ANA tomando en cuenta el grupo e ´ n observado y los tı ´tulos de los anticuerpos9. IgA e IgM ńicas de 3. Cabiedes. RNP-U1/ los ma Sm. pacientes con padecimientos reuma ´ n de los ANA se hace empleando como Actualmente. son antı ´ n como ANA6. El tercer tipo es el de los ANA autoinmunes. de conocidos como ENA (del ingle ´ s de 100 antı ´genos conocidos. para aumentar la sensibilidad y especificidad de los ANA para el ´ stico de las enfermedades autoinmunes.10 (tabla 1). ya que existen antı ´ n de ANA y ENA Definicio Los ANA son inmunoglobulinas que reaccionan contra dife´ logos nucleares (v. nucleares mediante te ´ surgio ´ el nombre de antı ´genos extraı ´bles del nu ´ cleo o mejor de ahı ´ s. cambios hormonales. g.6(4):224–230 ń ˜ez-A J. los ANA cuyo origen son los procesos infecciosos no ńicas de enfermedad autoinmune y se asocian a manifestaciones clı ´tulos bajan en cuanto se resuelve el proceso infeccioso que les sus tı dio origen7. Me requiere ser aceptado en consenso internacional. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin. En un trabajo nes e realizado en el 2005 mostramos la importancia de establecer los ´tnico.). Su produccio ambiente. Estos u ´genos citopla ´ smicos y los anticuerpos que los obstante. es importante establecer valores de referencia ajustados a las poblacio´tnicas que los van a usar como referencia7–9. ADNcd.) y citopla ´ smicos (v. siendo la primera por sustratos las lı ´ s utilizada. etc. ANA (patro ´ n de los antı ´genos reconocidos Por otra parte. Son de baja avidez ńea germinal 3. Son producidos por linfocitos B CD5+ 2. La deteccio ´ n de ANA su facilidad de crecimiento la ma ńeas celulares se considera la prueba inicial de mediante IFI en lı ´ stico de las enfermedades autolaboratorio que apoya al diagno inmunes debido a su alta sensibilidad. Un segundo tipo de patro ANA son los que se producen como resultado de procesos infecciosos. diagno ´ nico (ce ´ lulas HEp-2) y ambos se reportan como sustrato antige ´ n nuclear y citopla ´ smico). aminoacil proteı ´ ltimos. junio de 2009. mitocondrias. C. ´ cnicas utilizadas para la deteccio ´ n de ANA Te ´ n de los ANA es muy El sustrato utilizado para la deteccio ´genos cuya concentracio ´ n en las importante. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. los anticuerpos que reconocen antı genos en ambos compartimentos son detectados en un solo Tabla 1 ´ n de los ANA Clasificacio ANA Naturales Origen ´sticas Caracterı 1. Sm. Los tı enfermedad Autoinmunes ´mulo que origina su sı ńtesis es endo ´ geno o exo ´ geno Son de origen multifactorial El estı ´ rdida de tolerancia inmunolo ´ gica. es necesario emplear te ´ficas como: radioinmunoana ´ lisis (RIA). ´pidos. sensibles y especı electroinmunotransferencia (EIT) o Western blot. extractable nuclear antigens). Principalmente de isotipo IgM 5. Scl70 y Jo-16. Sin embargo. Nu 225 ´ n para la deteccio ´ n de los ANA en resultados de la estandarizacio ´ ticos5. ´pidos. etc. rentes componentes auto ńas del centro ´ mero.reumatologiaclinica. etc. pero Enfermedades Autoinmunes. interaccio ´ n con el medio (pe ambiente. 2010. Se asocian a manifestaciones clı autoinmunidad 4.A. Primera lı ´ n de mole ´ culas propias dan ˜ adas 2. Principalmente de isotipo G pero tambie pueden ser IgA y/o IgM ńicas de 3. la identificacio ńas por los ANA fue originalmente estudiada purificando proteı ´ cnicas de extraccio ´ n con soluciones salinas. carga gene ´ tica. No se asocian a manifestaciones clı autoinmunidad 4. Desde la ´perspectiva de laboratorio. llamen anticuerpos )anticelulares* (Dr. SSA/Ro. Sin embargo. Existe una propuesta interesante que sugiere que se á de la Torre. nos referiremos a ellos citoplasma sin importar su ubicacio como ANA. g. Uno de En circulacio ´ presente en todos los individuos a tı ´tulos relativamente ellos esta bajos y forman parte del repertorio de los ANA naturales7. Codificados por genes de lı 4.Documento descargado de http://http://www. Los tı ´mulo antige ´ nico estı 1. los cuales existen ma ´ s estudiados y mejor caracterizados son: SSA/SSB. Son de alta avidez 2. 6(4):224–230 ń ˜ez-A J. por es que tienen ma ´ lulas muy activas metabo ´ licamente. Por el contrario. modificacio Patrones de ANA detectados mediante IFI ´ n se describen las caracterı ´sticas de los patrones A continuacio ´ lulas HEp-2 en que con mayor frecuencia se detectan por IFI en ce sueros de pacientes con enfermedades autoinmunes14–19. 2010. Estos u ´topos12. B. ma ´ s de dos nucleolos y. Su nu ´ lula epitelial normal. tambie ´ ltiples usos. C. ´ neos: A) con metafase compacta y tincio ´ n de los nucleolos negativa. Patrones homoge ´ n de los nucleolos positiva. La deteccio ´ n de ANA mediante EIT permite identificar diagno ´genos. Es altamente sensible y especı ´ n del ensayo. ´ cnica utilizada para la deteccio ´ n de ANA es el ELISA. su interpreuna gran cantidad de autoantı ´ n no es sencilla. Sin embargo. ADNcd. Lo anterior implica que se debe ser muy cauto al epı ń interpretar los resultados del tamizado inicial y en la confirmacio ´ cnicas ma ´ s sensibles y especı ´ficas.reumatologiaclinica. Sin embargo. recientemente algunas compan ás ˜ı investigacio ´ n comercializando equipos para uso en laboratorios de esta ´ stico. En (principalmente nu ńima ya que si se obtiene un este caso. D. y su uso (debido a su costo. CENP-C. el patro ńas del centro ´ mero CENP-A. u ´ n conocida como Western blot. contra componentes celulares. tiempo de preparacio ´ mero de muestras que se tiempo de desarrollo del ensayo y nu ´ enfocado principalmente a pueden correr al mismo tiempo) esta ´ n. etc. Otra caracterı ´stica de estas ce ´ lulas concentracio ´ s de 46 cromosomas. B) con metafase delineada y tincio ´ n de los nucleolos negativa y C) con Figura 1. C. que reconocen epı ´ n empleando otras te ´ cnicas para la deteccio ń Actualmente se esta ´ ticos y te ´ cnicas de ANA11 como microinmunoensayos enzima ´ tricas de deteccio ´ n mu ´ ltiple (tecnologı á xMAP).Documento descargado de http://http://www. ´ cnicas con sensibilidad y especificidad similares o EIT o te mayores11. se deben considerar antı ´ n los puntos mencionados anteriormente: antı ´genos especı ´tambie ficos purificados y/o recombinantes. ADNcs y/o contra antı ´ n centrome ´ rico sugiere reactividad contra las histonas). Copia para uso personal.org el 11/04/2013. Lo anterior confirma que existen anticuerpos ´topos conformacionales de los antı ´genos13. que por ser una lı ńea celular epitelial su en las ce ´ n esta ´ aumentada. Sin embargo. Un ejemplo de mediante otras te ń lo anterior es cuando el suero de un paciente da un patro ´ rico mediante IFI en ce ´ lulas HEp-2 y el ELISA que detecta centrome actividad anti-CENP-B resulta negativo. sensibilidad. entre luminome ´ ltiples otras. es importante confirmar la relativamente fa especificidad de los autoanticuerpos detectados mediante ELISA.14. se tiene la ventaja de detectar mu ´genos en un solo ensayo.A. CENP-B. metafase difusa y tincio . tienen una gran ser ce ´ cleo es ma ´ s grande que el de cantidad de mitocondrias. proteı Es importante resaltar que en os ELISA de tercera y cuarta ´ n. en Otra te el cual las placas de poliestireno son recubiertas con macerados ´ cleos) de las lı ńeas celulares HEp-2 o HeLa. E y F) y en el ELISA el componen los centro ´ nico antı ´geno que esta ´ presente es la proteı ńa CENP-B. el patro ´genos de la cromatina (nuclesomas. es una te ´ cnica La EIT. ARTICLE IN PRESS 226 ´ lvarez / Reumatol Clin. por ello la observacio ´ n de cualquier ce ´ smicos se convierte en una tarea patrones nucleares y citopla ´ cil. las placas esta ´ n sensibilizadas con antı ´genos purificados generacio ´ ltimos presentan un reducido nu ´ mero de o recombinantes. Sin embargo. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. entre ellos esta ´ la deteccio ´ n de actividad que tiene mu ´fica. Lo anterior se explica porque ´ lulas HEp-2 esta ´ n presentes todos los antı ´genos que en las ce ´ meros (CENP-A. Cabiedes. Por ejemplo. En las dos citadas. especificidad y ´ n de la conformacio ´ n nativa de las proteı ńas. Nu ´ lulas de los tejidos es muy baja en contraste con lo que sucede ce ´ lulas HEp-2. la especificidad es mı ´genos que esta ń resultado positivo no se sabe el o los autoantı dando la positividad o reactividad. los patrones ´ lulas HEp-2 permiten sospechar la especificidad obtenidos en ce ´ n homoge ´ neo sugiere reactividad de los ANA. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio tacio muestran que existen autoanticuerpos que reconocen solo la ńas del centro ´ mero en ce ´ lulas HEp-2 y forma nativa de las proteı no las formas desnaturalizadas o modificadas obtenidas con frecuencia en la EIT. tanto fino como grueso. ˜ ido con gra moteado fino lo definen como nu ´ nulos son muy gruesos o muy No hay problema cuando los gra ´ n es subjetiva. Figura 5.org el 11/04/2013. del nu ˜ e de forma delineada o compacta. 1C) y ˜ idos20. Patro ´ n centrome ´ rico. finos. el centro de este patro ´ n muestra menos tincio ´ n (fig. los nucleolos no se tincio ´ como tampoco se tin ´ lulas ˜ en ası ˜ e la placa de la cromatina en ce tin ´ n (fig. en puntos intermedios la interpretacio ´ n moteado grueso se debe Nuestra propuesta es que el patro ´ n en el nu ´ cleo con gra ´ nulos finos o gruesos. los nucleolos pueden o no estar ten ´ n perife ´rico se caracteriza por tincio ´ n regular alrededor El patro ´ cleo. Figura 2. La placa de la cromatina se tin Los patrones de ANA que se observan con mayor frecuencia ´ n de estos son los moteados. 1B) o difusa (fig.A. los definir como tincio ´ n ten ´ lulas en ˜ idos y la placa de la cromatina en ce nucleolos esta ´ n no se tin ˜ e. es decir. ´ n moteado fino. Adema ´ s. no hay reconocimiento de los divisio componentes de la cromatina (fig.reumatologiaclinica. Patro . se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato.Documento descargado de http://http://www. Cabiedes. Patro ´ n homoge ńeo se caracteriza por una tincio ´ n homoge ´ nea El patro ´ cleo. Figura 4. Nu 227 ´ n perife ´ rico. Figura 6. cuya intensidad puede variar dependiendo de la en el nu ´ n de los anticuerpos presentes en el suero. La descripcio ´ n. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin. este se caracteriza por En cuanto al patro ´ n del nu ´ cleo con gra ´ nulos finos o gruesos. 2010. 3). tiene y fino es ma ´ n moteado grueso. Patro ´ n moteado fino. Esta definicio ´ n de los patrones moteado grueso en divisio ´ s fa ´ cil de entender e interpretar. 1A).6(4):224–230 ń ˜ez-A J. en el sentido de que varios patrones ha generado confusio ´ n moteado grueso como aquel en el que el autores definen el patro ´ cleo se observa ten ´ nulos gruesos y el patro ń ˜ ido con gra nu ´ cleo ten ´ nulos finos. 2). C. Patro manera compacta (fig. Copia para uso personal. 4). delineada (fig. La placa concentracio ´ lulas en divisio ´ n puede estar ten ˜ ida de de la cromatina en ce ´ n nucleolar. Figura 3. Cuando se tin ˜ en los centriolos. G2 = Fase G2. y en metafase. La tincio ´ tico sin tincio ´ n del nucleoplasma en ce ´ lulas en del huso mito interfase se define como NuMA-2 (fig. se describen a continuacio ´ n los ma ´ s frecuentes. moteado fino. 10). Un patro ´tulo mayor a 1:160. 9). homoge ´ n en las ce ´ lulas en divisio ´ n muestra un punteado fino 5). la hacia el citoplasma (fig.A. ARTICLE IN PRESS 228 ´ lvarez / Reumatol Clin. 6). ´ n nucleolar tiene como caracterı ´stica una tincio ń El patro intensa de los nucleolos (fig. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. B) patro . A diferencia del patro ´ lulas en divisio ´ n es negativa. Figura 7. y C) patro ´ n NuMA-2.Documento descargado de http://http://www. 2010. ´mina nuclear o laminar es aquel en el que se ´ n de la la El patro ´ n concentrada alrededor del nu ´ cleo y no se extiende observa tincio ´ n perife ´ rico. La placa de la cromatina en las ´ n de la la ´ mina nuclear o laminar. ciclo celular. Las estructuras ten ˜ idas se centriolos en ce pueden identificar desde la fase G2. 8B). Copia para uso personal. La tincio localizado en la placa de la cromatina. placa de la cromatina en las ce ´ n centriolar se identifica por la tincio ´ n intensa de los El patro ´ lulas en divisio ´ n.6(4):224–230 ń ˜ez-A J. ce ´smico se define como tincio ´ n homoge ´ nea que ´ n citopla El patro ´ n mitocondrial se cubre todo el citoplasma (fig. donde se localizan en los polos de la ´ lula (fig. 8A). Nu sustento en la diferencia de reactividades que muestran los sueros que dan los patrones14.org el 11/04/2013. ´ n a los patrones citopla ´ smicos identificados en En relacio ´ lulas HEp-2.reumatologiaclinica. Cabiedes. El patro ´ n de los centriolos y nuclear mitotic apparatus) (fig. C. los filamentos del ce ´ tico y las ce ´ lulas en interfase tienen un patro ń huso acroma ´ n se define como NuMA-1(del ingle ´ s. Patrones de anticuerpos que reconocen antı ´ n NuMA-1. El patro ´ n granular en hileras punteadas que caracteriza por una tincio ´ cleo y se extienden hacia el citoplasma sin cubrirlo rodean al nu por completo. M =Metafase). 7). donde se ven dos puntos muy juntos. Patro ´ lulas en divisio ´ n se tin ˜ e de manera difusa debido a reactividad ce cruzada de los anticuerpos dirigidos contra los RNA nucleolares con el ADN de la cromatina. 8C). El reconocimiento de los componentes del citoesqueleto ´ bulos. de acuerdo a los valores de intermedios con tı ´genos del aparato mito ´ tico: A) anticuerpos anticentriolo (la fotografı á muestra ce ´ lulas HEp-2 en diferentes fases del Figura 8. microfilamentos y filamentos intermedios) da un (microtu ´ n citopla ´ smico que se conoce como patro ´ n de filamentos patro ´ sculo liso y se caracteriza por tincio ´ n en forma intermedios o de mu ´ n de filamentos de hilos en el citoplasma21 (fig. ´ n centrome ´rico tiene como caracterı ´sticas que los El patro ´ cleos se tin ˜ en con puntos finos distribuidos de manera nu ´ nea en el nucleoplasma de las ce ´ lulas en interfase (fig. Los resultados mostraron patro reactividad contra ADNcd (60–80%). Cabiedes. C. el 5% contra reacciono SSB/La y el 32% contra CENP-B14. en poblacio ´ n. relevancia clı ´tulos relativamente Los ANA tienen una alta prevalencia. lisosomal. la reactividad es principalmente contra RNP/Sm en el 65% de las muestras. es importante resaltar que ´ s del 90% de los ANA detectados en ce ´ lulas HEp-2 se presentan ma combinados con al menos 2 patrones diferentes nucleares y/o ´ smicos. los diferentes patrones de ANA y su intensidad (expresada ´ n) debera ´ n ser cuidadosamente evaluados para pasar al en dilucio ´ n mediante pruebas ma ´ s sensibles segundo nivel de caracterizacio ´ficas como ELISA. antimu Se han reportado otros patrones de ANA (v. patro ´ n citopla ´ smico. 3). sugerimos que el uso y/o especı ´ n de autoanticuerpos se haga de manera ordenada. pero a tı ´tulos altos. Figura 9.Documento descargado de http://http://www. en estudios realizados en nuestro laboratorio. 2). radioinmunoana ´ lisis.org el 11/04/2013. como se mencionara ´ n de guı ás para la deteccio ´ n de ANA Uso y aplicacio ´ n homoge ´ neo en ce ´ lulas HEp-2 sugiere la presencia de El patro autoanticuerpos contra componentes de la cromatina. ´ n entre patrones Si bien no se ha observado una clara asociacio ´tulos de ANA con manifestaciones clı ńicas de las diferentes y tı ás autoinmunes. Patro ´ n de filamentos intermedios o del citoesqueleto. sugerimos apoyados en reportes de otros grupos de investigacio ´ squeda de las especificidades de los autoanticuerpos se que la bu debe realizar de forma ordenada y racional. Na. es frecuente tener muestras de pacientes con LEG en preparacio ´tulos altos de anticuerpos contra un solo componente de la con tı ´ n homoge ´ neo cromatina. esclerosis siste ńica au ´ n no ha sido bien establecida7. es importante confirmar el o los epı reconocidos por los autoanticuerpos presentes en el suero de los ´ posteriormente. g. peroxisomas. etc. Sin embargo. H3. En la presente revisio ´ de manera general. la ´genos. ADNcs. Por otro lado. Si la reactivienfermedad. Los ANA detectados mediante IFI se abordara se encuentran con una alta frecuencia en enfermedades autońdrome de Sjogren.reumatologiaclinica.22. Nu 229 ńica muestran un mayor Los patrones cuya relevancia clı ´ stico son el patro ´ n homoge ´ neo y el centrome ´significado diagno ´topes rico. a tı ´ n mexicana sana9. ´ lulas PCNA. teniendo en cuenta la ´ n del paciente y la actividad. evolucio dad contra los componentes de la cromatina es negativa. EIT. nucleosomas y ADN de cadena simple (ADNcs). se detectan tambie ´ n y bu ´ squeda de especificidad Interpretacio ńicas de Cuando un paciente presenta manifestaciones clı enfermedad autoinmune. H2b. pacientes. pero son poco frecuentes y su valor diagno estudio. 2010. por lo que sugerimos confirmar el patro ´ n de la reactividad contra: 1). el 36% ´ contra SSA/Ro recombinante de 52 kDa. tomando como base el ´ n y el tı ´tulo de ANA observado en ce ´ lulas HEp-2. La croma´ formada por ADN de cadena doble (ADNcd). ¨ inmunes como: LEG. ´ smicos descritos anteriormenLos patrones nucleares y citopla te son patrones puros. es clara la asociacio ´ n entre patrones de patologı ´genos especı ´ficos. H2a. Los ANA no caracterizan a una enfermedad autoinmune en particular. En base a nuestros resultados y ´ n. histonas ´ n nuestra experiencia (trabajos (20–40%) y ADNcs (60–80%). Apoyados en lo anterior. el muestra puede presentar actividad contra otros antı mejor estudiado es Scl-70. ARTICLE IN PRESS ´ lvarez / Reumatol Clin. histonas y 4). Copia para uso personal. H4). Sin embargo. pero grupos de autoanticuerpos se encuentran presentes con mayor frecuencia en enfermedades autoinmunes ´ficas. En nin ˜ os y adultos mayores bajos.) que pueden ser identificados en ce ´ stico esta ´ en HEp-2. para y especı ´geno reconocido por los ANA presentes en la confirmar el antı muestra del paciente. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. sı enfermedad mixta del ´ mica y otras. En cuanto al moteado grueso. Posteriorsustrato ce mente. muestran reactividad contra dan patro SSA/Ro nativa y SSA/Ro de 52 kDa en el 55% de las muestras y SSB/ ´ cula RNP/ La en el 5%.6(4):224–230 ń ˜ez-A J. Un ejemplo de ANA y el reconocimiento de antı ´ n del patro ´ n homoge ´ neo o perife ´ rico a tı ´tulos esto es la asociacio altos ( 4 1:5120) y el reconocimiento de ADNcd y/o nucleosomas. Segu ´ n). nucleosomas (95%). debido a su alta sensibilidad. Patro referencia previamente reportados en mestizos mexicanos9. la primera prueba que se debe solicitar ´ n de ANA por la te ´ cnica de IFI utilizando como es la deteccio ´ lulas HEp-2. seguida del reconocimiento contra la mole Sm en el 10%. Sin embargo. la ´ n inmunoquı ´mica mediante EIT de los sueros que caracterizacio ´ n moteado fino en la IFI. se debe interpretar como un resultado positivo para anticuerpos ´ sculo liso. mediante la deteccio nucleosomas.A. ADNcd. histonas tina esta (H1. etc. deteccio ás propuestas por el colegio americano de siguiendo las guı . En un trabajo reciente evaluamos la especificidad de dichos componentes en muestras de pacientes con LEG que dieron ´ n homoge ´ neo mediante IFI23. su tejido conectivo. citopla ńica Anticuerpos antinucleares y su relevancia clı ńica de los ANA en las enfermedades autoLa relevancia clı ń inmunes ha sido ampliamente estudiada. Figura 10. Cohen Tervaert JW. The Binding Site. Arch Pathol Lab Med. 2006. Tomar R. Surmacz MJ. 3. Mimori T.4:55. Reveille J.2:21. Evidence-based guidelines for the use of immunologic test: antinuclear antibody testing. J Immunol.Documento descargado de http://http://www. Di Serio F. 8. 16.E. Huerta MT. En este sentido.20:72. Proc Mayo Clin.5:55. Pansini N. From ANA to ENA: How to proceed? Autoimmunty Rev. Cardiel MH. 26. et al. Marin GG. Autoantigens.117:316–24.20:1419–20. Garcı á Herna ´ ndez JL. Shoenfeld Y. SchoBler W. No obstante. 1950. existen ma ´ n de guı ás grupos han mostrado la importancia de la aplicacio ˜ adas para el buen uso de los ANA detectados mediante IFI disen ´ lulas HEp-2 como sustrato. Pagola Santander L.. ńez Bezies V. 22. Reumatol Clin. debido a que existen antı ´genos que interfase y ce solo son expresados en ciertas fases del ciclo celular. Tesina de Especialidad en Bioquı INCMNSZ. Best Practice & and Research Clinical Rheumatology. Keren DF. Herna ´ ndez˜ ez A 14. Atlas of antinuclear antibodies.2:3–6. Tozzoli R. PABST. Autoantibodies. el cual revelo ´ n de guı ás para el diagno ´ stico utilizando la que la aplicacio ´ n de ANA previamente validadas26 reduce de manera deteccio ´ mero de inmunoensayos o pruebas de )segundo importante el nu nivel* realizadas. Atlas of autoantibody patterns on Tissues. Nu ´rez DF. autoimmunity. Tonutti E. Homburger HA. los puntos de llados tomando en cuenta: 1. Arthritis Rheu. los puntos de corte establecidos en el grupo e ´ n. Arthritis Rheu. Clin Lab Med. 6. 32–34. e ´ n de guı ás o algoritmos que ayudan a la La aplicacio ´ n del epı ´tope o de los epı ´topes que reconocen los identificacio ńico. Solomon DH. Shoenfeld Y. Karim AR. Nu ´ n del ELISA caotro ´ pico. Deicher HR. Deteccio Navarro F.18:249–69. lo cual proporcionara ´ corte ajustados o establecidos por patro ´ s al clı ńico para el diagno ´ stico y el resultados que ayudan ma seguimiento de los pacientes. p. RhiGene Inc. in: advances in immunology. la presencia de ANA puede no ser necesariamente de origen autoinmune. ¨ 7. 10. Los ANA se deben interpretar en base a valores de referencia o ´ n de tincio ´ n y en el grupo puntos de corte establecidos por patro ´ tnico con el que se van a comparar. Torrico R. 1959. Gabilondo 23. 2007 UNAMautoinmunes. Third Ed. Pub Academic Press Inc. 1997. 21. 2005. Elsevier.5:10–7.6(4):224–230 ń ˜ez-A J. ń Es importante resaltar que cuando se tiene una determinacio de ANA detectados mediante IFI negativa y el paciente tiene ńicas de enfermedad autoinmune. 2000. Los autores declaran no tener ningu . 2007. Tan EM. se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. ń Ramı Caracterizacio ´mica de los patrones de inmunofluorescencia (IFI) moteado fino y inmunoquı moteado grueso en pacientes con enfermedades autoinmunes. Prevalencia de ANA en tres ´ n mestizo-mexicana sana: donadores de sangre. 2. Gershwin ME. Prevalencia de autoanticuerpos en pacientes con diagno ´mica Clı ńica. 2007. Por ello. ´ ndez A. Elsevier. Cachafeiro Vilar A. Anti-tissue antibodies in rheumatic disease. Holman HR. Zucano A. Gershwin ME. Fontana A. Autoantibodies to nuclear antigens (ANA): Their Immunobiology and Medicine. C.96:464–71. Guidelines for clinical use of the antionuclear antibody test and test for specific autoantibodies to nuclear antigens.24–27. ´ mez EI. Fritzler MJ. The Binding Site 2008. debido a que se esta ´ n de autoanticuerpos. el patro ´ tnico de intere ´ s y 3. dirigidos contra componentes del nu ´ n de ANA mediante IFI es la principal prueba La determinacio de tamizado inicial cuando se sospecha de enfermedades autoinmunes. Range of antinuclear antibodies in ‘‘healthy’’ individuals. Autoantibodies in systemic autoimmune disease. Meroni PL. Hugues RG. Laboratory testing in autoimmune rheumatic diseases. 15. Fontana A. Bradwell AR. Cabral AR. Autoantibodies. Holman H. 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Dawkins R. estudios cuyo costo tiene un impacto importante en á de los pacientes. Maggiolini P. 5.) cell factor with deoxyribonucleoprotein of the cell nucleus. Hiepe F. Am J Clin Pathol. 1982. Reichlin M.org el 11/04/2013. et al. Kaplan MH. 19. Martı actividad de los anticuerpos anticromatina en pacientes con enfermedades ´mica Clı ńica. Con relacio ´ n a co ´ mo proceder para la solicitud pato ´ s preguntas que respuestas. Rev. Feltkamp TEW. Kunkel HG.131:112–6. enfatizamos la importancia la economı ´ n adecuada de las guı ás y/o algoritmos desarrode la aplicacio ´ n de ANA. A diagnostic Reference. J Clin Invest. Cabiedes J. Damoiseaux JGMC. The reaction of the lupus erythematosus (L. Tan EM. ´ stico de 13. et al. Coons AH. 2002. Homma M. 2010.47: 434–44. econo Conflicto de intereses ´ n conflicto de intereses.124:71–81. 25. Viveros ME. personal grupos de poblacio ´ dico-sanitario y familiares de pacientes con enfermedad autoinmune. Bizarro N. Conclusiones Los ANA son inmunoglobulinas que reconocen componentes ´ logos tanto del nu ´ cleo como del citoplasma. 17. Smolen JS. 1966. sino tambie ń ANA tienen impacto no solo a nivel clı ´ mico. 2008. Solomon DH. adema importante en la cantidad de estudios de segundo nivel solicitados. Copia para uso personal.E cell. Presentation of two bone marrow elements.22:447–74. Mex Instituto Nacional de Ciencias Me Reumatol. ARTICLE IN PRESS 230 ´ lvarez / Reumatol Clin. 2002. Hargraves MM. Application of a diagnostic algorithm in autoantibody testing: assessment of clinical effectiveness and economic efficiency. Antinuclear antibody testing.19. una disminucio ń El trabajo de Tampoia muestra. 12. Fritzler M.38:2059–72. Meroni PL. Go Prevalencia de anticuerpos antinucleares (ANA) en donadores sanos del ´ dicas y Nutricio ´ n Salvador Zubira ´ n.91:1–13. 2007. Nu ´ logos11. Conrad K. á Bibliografı 1. Rosas I. pueden ser naturales o infecciosos. 2002. Tampoia M. Asociacio ´ n ente las caracterı ´sticas de las metafases con la 20. Schur PH.2:37–46. en auto ´ n original se llamaba ası ´ solo a los que estaban su descripcio ´ cleo. 2009. Nu ń ˜ ez A 9. me Reumatol Clin. Arch Pathol Lab Med. Si bien algunos de los ANA. Sin embargo. Pansini N. LTD. Localization of antigen in tissue cells II: Improvements in a method for the detection of antigen by means of fluorescent antibody. Tan EM. 1977. Characteristics of a soluble nuclear antigen precipitating with sera of patients with systemic lupus erythematosus. Standardization and nomenclature. Validacio 24. Alvarado Herna ń ´ n de anti-DNA de ˜ ez Alvarez CA. Alvarado A. Third Ed. 27. J Exp Med. Tan EM. 1999. ´ lvarez CA. Cabral AR. Morrone LF. Butcher B. Brescia V. Enviado. se puede manifestaciones clı ´ n de autoanticuerpos por ELISA pasar al segundo nivel de deteccio ´ aumentando la sensibilidad y o EIT. especificidad para la deteccio ´ s. cadena doble por cuatro. Atlas of HEp-2 patterns. Edi. 4. Tampoia et al en 2007 ´ publicaron un estudio realizado en 685 pacientes27. Christian C. 18. Kavanaugh A. Kunkel HG. ‘‘tart’’ cell and L. Tesina de Especialidad en Bioquı INCMNSZ. Medical & Biological Laboratories CO. 2.

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