AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS DE INTERES INDUSTRIAL

INSTITUTO POLITÉCNICONACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO MICROBIOLOGÍA Laboratorio De Microbiología Industrial PRACTICA 1. AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS DE INTERES INDUSTRIAL Integrantes: Grupo: Profesores: o Sección: 2 Equipo: 7 Objetivos específicos    Aislamiento de levaduras Aislamiento de hongos productores de ácidos orgánicos Asilamiento de microrganismos halofílicos amilo líticos y proteolíticos Diagrama de proceso   Aislamiento de levaduras  Aislamiento de ácidos orgánicos Aislamiento de Halófilicos (amiloliticos y proteolíticos) .Objetivo Aislar microrganismos específicos de una fuente orgánica o inorgánica con el fin de seleccionar aquellos que cumplan con la presión de selección y criterios de selección para cada tipo de microrganismo.       teolíticos ) Resultados . Resultados de aislamiento de microrganismos en diversas fuentes Microrganis mo Fuente de asilamiento Manzana Levadura Papaya Levadura productora ácidos orgánicos Manzana Halófilicos Papaya Jamón y Salchicha Halófilicos amilolitico Jamón y Salchicha Halófilicos proteolítico Salchicha Y Jamón Presión de selección 37 °C Tiempo incubación (24 hrs) 28°C Carbonato calcio al 1.5 g/L Criterio de selección Morfología colonial Morfología microscópica Halos de solubilización del carbonato 37°C Concentración de sal 20% Tiempo incubación Adición de almidón 1% al medio sólido para halófilicos Medio leche descremada (caseína) y medio sólido para halófilicos pH 7.3 Morfología microscópica Crecimiento Observaciones Morfología microscópica Halo hidrolisis Si hubo crecimiento en ambas muestras Si se presentaron Halos de hidrolisis Se observaron cocos. en donde se evaluó la fuente de aislamiento. Siguiente se muestran los resultados finales obtenidos de los aislamientos de los microrganismos (levaduras.En la tabla1. halofilicos moderados proteolíticos y amiloliticos). la presión de selección. el criterio de selección y algunas observaciones. streptococcos y cocos en tétradas No fueron productores de amilasas Morfología microscópica Halo de hidrolisis No fueron productores de proteasas . Tabla 1. levaduras formadoras de ácidos orgánicos. Constituyen una importante alternativa a los tratamientos microbiológicos convencionales en aquellos casos en los que éstos sean ineficaces. en el cual los microorganismos pueden ambientarse y reactivarse. Para la metodología empleada en esta investigación de manera análoga a la experimentada en clase seleccionado los puntos de muestro del lago y procediendo a su recolección de manera aséptica para su posterior inoculación medio líquido heterotrófico (HM) o quimiorganotrófico (QM) esterilizado a 121º c y 15 lb durante 15 minutos. Una variedad de microorganismos habitan ambientes extremos. El aislamiento del halofílicos moderados y extremos es importante ya que estos son capaces de producir hidrolasas que proporcionarán la posibilidad de tener actividades óptimas a diferentes concentraciones de sal que podrían ser útiles en algunos procesos industriales. estos microorganismos llamados extremófilos producen enzimas (extremoszimas) que son de gran importancia biotecnológica. en la producción de diversas sustancias químicas como los pesticidas.AISLAMIENTO. se encuentra en la fracción montañosa más alta de los Andes. utilizando el . por ejemplo. El presente trabajo tuvo como objetivo contribuir a realizar un aislamiento y caracterización de bacterias de una laguna salada y alcalina y al mismo tiempo se obtuvo un perfil enzimático para una posterior aplicación en las distintas áreas investigadas del lugar. El matráz fue incubado durante 24 horas en un incubador rotatorio (shaker) a 30ºc y 200 rpm. CARACTERIZACIÓN PARCIAL Y PERFIL DE PRODUCCIÓN ENZIMÁTICA DE BACTERIAS HALÓFILAS Y HALOTOLERANTES DE LA LAGUNA CHAIRKOTA. dentro de un matráz de 250 ml con 80 ml de medio de cultivo. es un área de intensa evaporación y acumulación de sal. Las bacterias halófilas moderadas han alcanzado recientemente un gran interés en el campo de la degradación de los residuos tóxicos. como son los procesos industriales que generan aguas residuales hipersalinos. determinados productos farmacéuticos y herbicidas. Este primer inóculo se denomina pre inóculo. Esta área es inusual en varios aspectos: se encuentra en un lugar árido a semiárido. POTOSÍ – BOLIVIA La laguna Chairkota. Esto sucede. A continuación se realizó un segundo inóculo igual al primero. y los procesos de extracción de petróleo y gas. tiene alta densidad de depósitos metálicos y metaloideos y por último es volcánicamente activo. conteniendo numerosos manantiales de aguas termales y/o salinas. el agua se caracteriza por un pH relativamente alto. esto puede deberse a que a diferencia de las trabajadas en la investigación. proteasas y celulasas. A diferencia de nosotros que no empleamos un la pre incubadora lo cual hubiese facilitado la generación de estas cepas. 15. borde. Se anotaron las bacterias que crecieron y las que no para determinar si son halófilas o halotolerantes en cada concentración. 10.pre inóculo como muestra y se dejó incubar en el shaker a 30º c y 200 rpm. se sembraron todas las bacterias en cajas petri con medio de cultivo HM o QM con la misma concentración de NaCl. a diferencia de nosotros que únicamente sembramos las colonias en medios de cultivo con una concentración de 20% para después proceder a la determinación de la existencia de proteasas o amilasas. forma. 5. Esto seguramente por la gran cantidad de biomasa encontrada en pruebas piloto. 21 cepas son halófilas. brillo. Para la caracterización de la colonia se tomaron en cuenta parámetros de color. y 50 son halotolerantes. Después se realizó la caracterización morfológica para determinar el aislamiento de las cepas para obtener cultivos anxénicos. Dendro de las colonias caracterizadas como halofílicas se comprobó que estas cepas tienen más xilanasas. Por último se encontró 10 cepas psicrotolerantes y 61 cepas mesófilas. . En los resultados registrados. y se repitió la operación para cada una de las concentraciones de NaCl que fueron 0. 5 cepas alcalófilas. la morfología de la colonia bacteriana se refiere a la apariencia de las colonias aisladas. En nuestro caso encontramos que ninguna de nuestras colonias tenía alguna de estas enzimas. de los 71 microorganismos. elevación y consistencia. Se dejaron incubando a 30° C durante 7 días y se controló el crecimiento cada 24 horas. Finalmente para determinar si las bacterias son halófilas o halotolerantes se realizó una variación de NaCl para todas las bacterias. Estas características físicas son comúnmente específicas para cada tipo de bacteria y puede ser usada para reconocerla. o tal vez a que el tratamiento para el acondicionamiento de las muestras no fue suficiente para generar las condiciones adecuadas para la generación de estas bacterias. 4 cepas neutrófilas y 62 cepas alcalotolerantes. A continuación Luego se realizaron diluciones en serie 1:10 y se sembraron por superficie las diluciones 106 y 107 en cajas petri con medio sólido QM o HM y se dejó incubar durante 24 a 48 horas. nuestra muestra se trató de un producto de grado alimenticio en descomposición. 20%. Además se anotó en bitácora todo cambio u observación que no se incluyera en la lista anterior. al igual que nosotros mediante una tinción gram.