Aislamiento, Selección, Caracterización e Inoculación de Microorganismos Endógenos en El Proceso de Compostaje de Residuos Sólidos Urbanos

AISLAMIENTO, SELECCIÓN, CARACTERIZACIÓNE INOCULACIÓN DE MICROORGANISMOS ENDÓGENOS EN EL PROCESO DE COMPOSTAJE DE RESIDUOS SÓLIDOS URBANOS Curso: Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente INDICE RESUMEN ......................................................................................................................................... 3 INTRODUCCIÓN .............................................................................................................................. 3 OBJETIVOS ...................................................................................................................................... 4 OBJETIVO GENERAL ................................................................................................................ 4 OBJETIVOS ESPECÍFICOS: ..................................................................................................... 4 MARCO TEÓRICO…………………………………………………………………………………4 MATERIALES Y MÉTODOS……………………………………………………………………………………………………..7 Ubicación del proyecto ................................................................................................................. 7 Caracterización microbiológica.................................................................................................. 8 Hongos .............................................................................................................................................. 8 Inoculación de las pilas .............................................................................................................. 11 Materia orgánica, Relación carbono nitrógeno y NPK ....................................................... 11 RESULTADOS ............................................................................................................................... 13 CONCLUSIONES........................................................................................................................... 16 ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO…………………………………………………………16 PROGRAMACIÓN DE ACTIVIDADES…………………………………………………….17 BIBLIOGRAFÍA .............................................................................................................................. 21 ANEXOS .......................................................................................................................................... 22 2 humedad. pH. El 31 de mayo se inoculó una de las pilas de materia orgánica con una mezcla de microorganismos endógenos. temperatura. Los resultados actualmente se encuentran en proceso. la optimización de la calidad del compost. aireación. 1980). Se observó la presencia dominante de un hongo como Aspergillus niger. Este proceso tiene una duración variable. La disposición final de los residuos orgánicos generados en el mundo representa un problema que afecta al medio ambiente. SELECCIÓN. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente AISLAMIENTO. la presencia de otros carbohidratos y la proporción relativa de lignina en los restos vegetales (Alexander.. durante el proceso. aireación. 2000). Sin embargo. gran cantidad de residuos sólidos urbanos hace necesario su tratamiento. la temperatura. 2000). humedad. relación C/N y NPK. e implica la acumulación de gran cantidad de material en las plantas de compostaje (Boulter. La aplicación de nitrógeno inorgánico aumenta la descomposición de la celulosa en el suelo y tanto las sales de amonio como las de nitrato son buenas fuentes de este elemento. dado por la calidad de los residuos. el tamaño de partícula. lo que genera. disposición de la pila. La respuesta a éste indica que el nivel de nitrógeno en el suelo es un factor limitante (Alexander. Debido a los cambios en la composición de la flora inducidos por la 3 . El período de transformación es cercano a 170 días. 2000). pH. 1980). entre las opciones de manejo está el compostaje que es un método eficiente en la eliminación de estos residuos. ya que permite además el aprovechamiento del producto final (Boulter. una dinámica poco conocida (PETERS et al. INTRODUCCIÓN En la actualidad. con su composición y la sucesión de comunidades microbiales. Se preparó un inóculo con una concentración de 1x10-4 UFC/ml para el microorganismo y se aplicó por aspersión. humedad y población biológica activa. Se evaluaron los siguientes parámetros: aspecto físico. CARACTERIZACIÓN E INOCULACIÓN DE MICROORGANISMOS ENDÓGENOS EN EL PROCESO DE COMPOSTAJE DE RESIDUOS SÓLIDOS URBANOS RESUMEN La presente investigación tuvo como objetivo aislar y seleccionar el hongo Aspergillus Niger. Los principales factores del medio ambiente que afectan la transformación son el nivel de nitrógeno disponible. está directamente relacionada. Cada una de las variedades de organismos celulolíticos es afectada en forma diferente por la temperatura. el calor aumenta la velocidad de transformación del sustrato a causa del efecto directo de ésta sobre la acción enzimática (Alexander.. son escasos los resultados informados en la literatura científica sobre inóculos nativos. Cuando esto se corrobora con otros indicadores ecológicos (biomasa y diversidad de especies encontradas) se obtiene información acerca del estado del suelo y su productividad (Hendricks. OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL Observar el proceso del compostaje en pilas del material al inocular un hongo. Como los hongos del suelo son los microorganismos mayormente involucrados en el reciclaje del material vegetal. entre ellos la celulosa (Zhang et al. composta o abono orgánico. que en sí es un magnífico abono orgánico para la tierra. 1995).. a partir de microorganismos aislados de muestras de suelo y de residuos orgánicos en proceso de descomposición. 4 . Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente temperatura. también llamado compostaje. 1980).  Aplicar la técnica de inoculación del hongo Aspergillus niger en una de las pilas del compostaje para realizar un análisis de NPK y relación C/N. composto. es decir el Aspergillus niger. donde se determinó que la estabilidad y madurez del compost se alcanzó en menor tiempo en las pilas inoculadas que los tratamientos sin inocular (Vargas et al. es el producto que se obtiene de compuestos que forman o formaron parte de seres vivos en un conjunto de productos de origen animal y vegetal. 2011). MARCO TEÓRICO El compost. No obstante. Se denomina humus al “grado superior” de descomposición de la materia orgánica. Entre estos trabajos se reporta la evaluación de un cultivo formado por una mezcla de hongos endógenos seleccionados de pilas de compostaje. y logra reducir enormemente la basura. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:  Realizar pruebas en laboratorio para determinar la relación C/N disponibles en el compostaje. que se empleen para acelerar la transformación de residuos orgánicos fibrosos. cambios en el número de estos pueden indicar modificaciones en el contenido de materia orgánica del suelo. 2007). constituye un “grado medio” de descomposición de la materia orgánica. et al. El humus supera al compost en cuanto abono. y ambos son orgánicos. La materia orgánica se descompone por vía aeróbica o por vía anaeróbica. P. hojas. La primera se debe mantener siempre entorno 40-60%. Mg. trozos de madera. verduras y hojas frescas.5-6 debido a la descomposición de lípidos y glúcidos en ácidos pirúvicos y de proteínas en aminoácidos. y la pérdida del exceso en forma de amoníaco. K. El número de actinomicetos permanece relativamente bajo. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente El compostaje se forma de desechos orgánicos como: restos de comida. Na. etc. El color en esta etapa aun es fresco y el olor a frutas. mientras que proporciones superiores de N provocan el agotamiento rápido del oxígeno. césped. el pH disminuye desde un valor neutro hasta 5. ya que el agua distribuye los nutrientes por la masa (C. Llamamos “compostaje” al ciclo aeróbico (con alta presencia de oxígeno) de descomposición de la materia orgánica. restos de café. la ventilación formará caminos preferenciales quedando otras zonas en ausencia de oxígeno. Etapa Termofílica: 5 . cáscaras de huevo. ETAPAS: A. por ello la relación debe estar entorno 30. En esta etapa la relación C/N es de especial importancia ya que el carbono aportara la energía a los microorganismos y el nitrógeno es esencial para la síntesis de nuevas moléculas. que impide la aireación- oxigenación y crea condiciones biológicas anaeróbicas malolientes). Debido a la actividad metabólica de todos estos microorganismos la temperatura aumenta hasta 40ºC. hongos y actinomicetos). B. Etapa Mesofílica: En esta etapa abundan las bacterias mesofílicas y hongos mesofilicos. excrementos y purines (parte líquida altamente contaminante que rezuma de todo tipo de estiércoles animales). Llamamos “metanización” al ciclo anaeróbico (con nula o muy poca presencia de oxígeno) de descomposición de la materia orgánica. aserrín. aunque ciertos procesos industriales de compostaje usan la putrefacción por bacterias anaerobias. pero nunca excesiva ya que al igual que el sol puede secar demasiado la pila de materia a tratar. Si la selección inicial del residuo no fue adecuada o su área superficial es muy reducida debido a que el tamaño de las partículas es excesivamente grande o pequeño. La ventilación debe ser adecuada sobre todo en las tres primeras etapas y con residuos densos y ricos en N. tóxico para la población bacteriana o por lixiviados. N. poda de jardín (ramas. animales. raíces. lo que favorece la aparición de hongos mesofilicos más tolerantes a las variaciones del pH y humedad. La humedad y ventilación del compostador son esenciales para maximizar la actividad microbiana y por consiguiente el proceso en general. Normalmente. si superamos esta proporción la actividad biológica disminuye.). frutas y verduras. B. El compost es obtenido de manera natural por descomposición aeróbica (con oxígeno) de residuos orgánicos como restos vegetales. se trata de evitar (en lo posible) la putrefacción de los residuos orgánicos (por exceso de agua. Ca. etc). la fermentación la continúan otras especies de bacterias. pétalos. por medio de la reproducción masiva de bacterias aeróbicas termófilas que están presentes en forma natural en cualquier lugar (posteriormente. actinomicetos y hongos termofílicos encuentran su óptimo. además ya no debemos reconocer los residuos iniciales. La degradación de los ácidos obtenidos en la etapa anterior provoca el incremento del pH pasando desde 5. moler. el color del compost se pone más oscuro paulatinamente y el olor original se comienza a sustituir por olor a tierra. provocando la muerte de los anteriores y la reaparición de microorganismos mesofílicos al pasar por los 40-45ºC.. Este ayuda a mantener la concentración de oxígeno. mientras que los microrganismos tales como nematodos. generando incluso más calor que los mesófílos. las poblaciones de bacterias y hongos mesofilicos mueren o permanecen en estado de dormancia mientras que las bacterias termofílicas. 6 . temperatura y humedad uniforme en toda la pila de residuos ya que. Etapa de maduración: La temperatura y pH se estabilizan.5 hasta 7. estos dominarán el proceso hasta que toda la energía sea utilizada. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente La temperatura continua ascendiendo hasta llegar a valores de 75ºC.5 donde permanecerá casi constante hasta el final del proceso. los materiales próximos a la superficie tienden a recibir mayor aporte de oxígeno. pero alcanzan menos temperatura mientras que los materiales del interior poseen menor porosidad debido a la presión de los materiales que les rodean y alcanzan mayor temperatura y humedad. Etapa de Enfriamiento: Una vez que los nutrientes y energía comienzan a escasear. masticar y en general romper físicamente los materiales incrementando el área superficial de estos para permitir el acceso de los microorganismos. C.Coli mueren al estar sometidos durante días a temperaturas superiores a 55ºC. los actinomicetos adquieren especial importancia en la formación ácidos húmicos y son frecuentemente productores de antibióticos que inhiben el crecimiento de bacterias y patógenos. Es en esta etapa cuando comienza la esterilización del residuo debido a las altas temperaturas. D. consecuentemente la temperatura en la pila desciende desde los 75ºC hasta la temperatura ambiente. Algunos compostadores poseen sistema de volteo. porosidad. rotíferos. excavar. incrementan su actividad desempeñando la función de remover. lombrices etc. escarabajos. la actividad de los microorganismos termofílicos disminuye. si el pH es ácido nos indica que el compost no está aún maduro. la mayoría de las semillas y patógenos como E. El color del producto final debe ser negro o marrón oscuro y su olor a tierra de bosque. tapaboca METODOLOGÍA PARA EL ARMADO: 7 . Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente MATERIALES Y MÉTODOS MATERIALES • Residuos orgánicos (restos de verduras y frutas) • Aserrín • Agua • Pala • Hacha • Medidor de ph • Termómetro ambiental • Césped • Guantes. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente 8 . De cada pila se obtuvieron 2 muestras simples aleatorias del estrato medio. es así. fue necesario la utilización de claves taxonómicas. se conformó 1 pila de forma cónica y base ovalada. Hongos Para la identificación del género y posibles especies de los hongos. 25% de tierra de chacra y 65% de materia orgánica. compuestas de 10% de aserrín. como fue preciso examinar los aislamientos de cada una de las cepas. Caracterización microbiológica Para la identificación de microorganismos en las primeras tres (3) semanas del proceso de compostaje. en los tratamientos. se mezclaron para obtener una muestra compuesta representativa de las 2 pilas y se colocaron en bolsas de 2 kilogramos de capacidad y se realizaron 2 muestreos: a los 3 y 20 semanas del proceso de compostaje. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Ubicación del proyecto El proyecto se desarrolló en el techo de un domicilio en el distrito del Callao. 9 . en el Laboratorio de la Universidad Católica Sedes Sapientiae (UCSS). se realizó dos volteos por cada semana y posteriormente se dividió en dos pilas en total para su inoculación correspondiente en la semana 19 y un análisis de suelo para identificar la relación C/N y NPK. Se efectuaron diluciones hasta 10-4 UFC/ml con 200 ml de agua destilada y se sembraron por triplicado en medio agar sabouraud modificado que contenía dextrosa 1. que pertenecen a la familia Enterobacteriaceae. color. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Bacterias Microscopia Se realizó la tinción de Gram (MADIGAN et al. 10 . no fermentadores de glucosa. para bacilos Gram (-). transcurrido este tiempo se escogieron todas las colonias por sus características morfológicas microscópicas de forma. 2000)..5% y agar noble 1.5%. Se incubó a 28°C. para su conservación en placas petri con agar sabouraud. además para organismos Gram (+) (cocos y bacilus). superficie y elevación. tamaño. borde. así como los más frecuentes aislamientos de bacilos Gram (-).0%. con pH ajustado a 5.6. celulosa amorfa (Himedia) 1. Aislamiento y selección preliminar de los hongos Para el aislamiento se tomó 10 g de sustrato de la muestra colectada de la materia orgánica del compostaje y se siguió la metodología de las diluciones seriadas (Stanier e Ingraham 1996). Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente 11 . Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente 12 . El medio se modificó con una composición a base de almidón soluble 1%. extracto de levadura 0. Se incubó a 30°C por 72 horas. La degradación se reveló utilizando una solución de lugol al 0.25%. fosfato monobásico de potasio 0. Se llevaron a cabo suspensiones de cada una de las cepas en caldo celulosa al 1%(p/v) (composición igual a agar celulosa excepto agar).05%. (Moreno et al. peptona 0.. 2006). Se empleó como control positivo el hongo Aspergillus niger el cual tiene comprobada capacidad amilolítica (Rodríguez et al. Actividad amilolítica El hongo celulolítico seleccionado se inoculó en placas con agar almidón al 1% (p/v). sulfato de amonio 0.5%. Conservación de cepas Las cepas seleccionadas en las pruebas de antagonismo fueron sometidas a tinción de Gram y una vez definidas sus características microscópicas se procedió a obtener cultivos en agar CMC 1%(p/v). posteriormente fueron almacenados a 37ºC en una incubadora durante 24 horas. para lo cual se preparó una suspensión en solución salina 0. El pH se ajustó a 5. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Pruebas de antagonismo Para llevar a cabo las pruebas de antagonismo se siguió el método de Gauze.01%.85% (p/v) de 10ml de cada uno de los microorganismos seleccionados por presentar mayor actividad enzimática y llevando a incubación a 100 rpm.01% y agar 1.6. cloruro de calcio 0.25%. Por triplicado se dispusieron sobre agar CMC al 1%(p/v).5% (p/v). 35ºC durante 14h. 13 . fosfato dibásico de potasio 0.05%. 2000). 2%(p/v) y 3%(p/v) (con siembra masiva del microorganismo a enfrentar). porque estos 14 . fósforo (P) y sólo comparables a las de potasio (K) consumidas según la materia orgánica que contiene el compostaje. Rechcigl.. Se determinó la relación carbono nitrógeno y NPK (análisis del suelo) para conocer si el compostaje almacena demasiada cantidad de elementos con contenido en carbono donde se produciría una evacuación en forma de dióxido de carbono a la atmósfera. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Inoculación de las pilas El inóculo conteniendo del microorganismo seleccionado (Aspergillus niger) cada uno en una concentración de 1x10-4 UFC/ml.2001). Materia orgánica. La aplicación se efectuó por una única vez en la mitad del proceso de acuerdo al total de las pilas (2 pilas) (De Carlo et al. como para la determinación de los parámetros indicadores de estabilidad y madurez del proceso. emisión de olores desfavorables y temperaturas altas. tanto para el aislamiento de los microorganismos en las primeras semanas. Se aisló un total de 1 hongo del muestreo que se realizó en la tercera semana del proceso del compostaje. lo cual puede estar dado. Las plantas requieren de los macronutrientes en muy altas cantidades nitrógeno (N). RESULTADOS Microorganismo seleccionado Aislamiento de microorganismos a identificación de las cepas seleccionadas permitió confirmar su potencialidad en el inóculo debido a sus capacidades metabólicas y agronómicas ya probadas y publicadas por diversos autores (e. En paralelo con cada lote de pilas inoculadas se procesó una pila testigo sin inóculo. la fermentación en este caso será lenta y de temperatura baja y tardaremos más tiempo en obtener el compost final. Relación carbono nitrógeno y NPK Durante las 14 semanas que duró el proceso de compostaje. se tomaron muestras de las pilas en la superficie y en el interior. Se observa que el mayor número de hongos celulolíticos aislados corresponden al área convencional. 1995).g. se producirá una evacuación de amoniaco a la atmósfera. se aplicó asperjando sobre la superficie de las dos pilas de materia orgánica. En el caso de exceso de contenido en nitrógeno. 9 8 35. con capacidad celulolítica y menor exigencia a factores de tipo nutricional. Al contrario.7 31.8 70 6. pero.4 96 6 7. CUADRO DE RESULTADOS DE TEMPERATURA.1 27.3 7. Es importante determinar que el hongo tenga una gran habilidad de descomponer residuos orgánicos como la lignina.5 60 7. pueden adaptarse mejor en ambientes más degradados y de baja fertilidad natural (Alcarraz et al.5 8 7 36. en menor cuantía en comparación con los hongos.4 79 6.6 7.4 7.7 74 6.3 68 7.3 7. las bacterias también mantienen una habilidad celulolítica.1 15 .4 8.9 70 6.2 37 70 6.5 9 29.2 8.8 37. HUMEDAD Y PH TEMPERATURA HUMEDAD Ph sin pH SEMANAS (°C) (%) inocular inoculado 3 29 58 5.1 8.1 46.9 63 7. 2010). Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente microorganismos.2 27.5 7.2 12 27.9 71 6 7.3 11 28.1 65 6. la hemicelulosa y la celulosa.8 5.4 7 28.4 7.3 29.9 63 7.2 46.1 7.1 62 7.7 61 7.1 6 42.4 27.3 7. Cuantificación de hongos en el compostaje Se observó el tipo de hongo que actuó en todas las fases del proceso de compostaje.3 63 7.4 31 65 5.8 7.2 4 45 76 5.2 64.4 64 7.8 80 6.5 7.6 7 10 28.9 7. la que predomina Aspergillus niger.8 65 7.4 87 6..5 5 54.4 5. siendo activos en la última fase del proceso de compostaje.5 7.6 65 7.3 6.9 37. 5 6.4ºC como se puede observar en la gráfica.1 6.1 59 6.1 56 6. FIGURA 1: Grafica de evolución de la humedad en el proceso de compostaje de residuos solidos urbanos.1 60 7. La humedad menor fue de 56% en la semana 15 en el proceso del compostaje como se puede observar en la gráfica.8 25.. 16 . esto evidencia una mayor actividad metabólica resultando beneficioso para la eliminación de potenciales patógenos.8 15 22.8 6. En las pilas el pico de temperatura se alcanzó en la quinta semana y logró un valor mayor de 64.6 6.9 56 6.8 22. en la séptima semana entre 70% y 74%.9 58 6.9 6. Temperatura La temperatura en las pilas evidencia los cambios en la calidad y densidad de la población microbiana (De Carlo et al. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente 27.1 7 13 25.5 58 6. (2001).3 58 7.9 21.9 Humedad El producto final obtenido de los ensayos posee una humedad de 58%.6 6. en el inicio del proceso la humedad fue del 58%.9 14 23. 1999). donde el suelo sin inocular presento un pH cercano al neutro. 2005). El pH es también un factor fundamental para el desarrollo de los hongos. el pH en la pila inocular se mantuvo por debajo de la pila inoculada como se puede observar en la gráfica. evolucionando a partir de ese momento con valores ligeramente ácidos. mientras que en la pila inoculada el pH aumentó en forma constante. 1989).. El pH óptimo para hongos se encuentra entre 4 y 6 (Kavanagh. que se atribuye a los ácidos orgánicos simples. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente FIGURA 2: Evolución de la temperatura en el proceso de compostaje de residuos solidos urbanos. el ingreso de vitaminas esenciales y ácidos orgánicos y la toma de minerales (Cochrane. productos iniciales de la descomposición. en coincidencia con lo publicado por otros autores (Boulter et al. a un pH alto se ve afectada la solubilidad de los metales y a pH bajo se afectan los sistemas enzimáticos. 17 . 1963). presentaron pH ligeramente ácidos al comienzo del proceso. Las diferencias entre la pila inoculada y sin inocular aumentaron a partir de la cuarta y quinta semana. pH Tanto la pila inoculada como el suelo sin inocular. Durante las 4 primeras semanas del proceso. Esta evolución indicó una adecuada aireación para la degradación aeróbica de la materia orgánica (Jiménez y García. Cronograma de Actividades por el número de semanas 18 . siendo mayor en las tres primeras semanas. CONCLUSIONES El objetivo este proyecto fue aislar y seleccionar cepas de microorganismos nativos para analizar la relación de C/N y NPK del compostaje de residuos sólidos urbanos. Esta proporción se mantuvo con algunas oscilaciones hasta el final del proceso a la semana 14. ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO PROGRAMACIÓN DE ACTIVIDADES Cuadro 1. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente FIGURA 3: Variacion de Ph en suelo sin inocular e inoculado Materia orgánica El porcentaje de materia orgánica disminuyó a medida que avanza el proceso de compostaje. de 65% y a la séptima semana se obtuvo un valor de 21. en comparación de la pila inoculada que tiene presencia de la cepa del hongo Aspergillus niger.6% en las dos pilas. El microorganismo seleccionado fue de la cepa del hongo Aspergillus niger. El producto final presentó características positivas en cuanto que su proceso fue constante y progresivo para los análisis respectivos. De acuerdo a los análisis del laboratorio de las dos pilas del compostaje resultó que la pila sin inocular presenta ciertas características. Al tratarse de residuos sólidos urbanos se partió de un valor alto. 21 y 23 de X Abril 26. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente Actividades/ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Semanas Entrega de perfil X Inicio de X actividades VOLTEO Jueves 24 de X Marzo 29 y 31 de Marzo X Sábado 2 de Abril X 5. la presentación final que tiene información específica del proceso que se realizó en el compostaje. 28 y 30 de X Abril 4 y 7 de Mayo X 11 y 14 de Mayo X 18 y 21 de Mayo X 25 y 28 de Mayo X Martes 31 de Mayo. 19 . 14 y 16 de X Abril 19. 7 y 9 de Abril X 12. Lunes X 13 de Junio 15 y 18 de Junio X Presentación del X primer avance Presentación del X segundo avance Presentación de papers X relacionados al proyecto Presentación X Final Se realizó un cronograma de actividades para identificar los días en que se hicieron los volteos respectivos según la fecha y los avances que se expusieron en clase para su evaluación y por último. inoculación X de la pila 1 y 4 de Junio X 8 y 11 de Junio X Inicio de los análisis. . G. E. 125-126.2001 Actividad Metabólica de la Población Microbiana en las primeras etapas del Compostaje. N. Ed. Benintende. Facultad de Ingeniería Agraria Biotecnologías Aplicadas para la conservación del Ambiente BIBLIOGRAFÍA  Boulter. S. International Biodeterioration & Biodegradatio... F.. M.. Introducción a la microbiología del suelo.  Zhang. 1963.  Vargas.... Z. R. Grasso. Q.. México. V. John Wiley & Sons. C. L. Ltd. Benintende. J and Hugley.. 2000.  Moreno. AGT Editor. S. 61: 2016-2019. Ninth edition. Menes.. Bolaand. 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