FUNDAMENTOS DEBIOTECNOLOGÍA SIA 3007815 FUNDAMENTOS DE MICROBIOLOGÍA MICROBIOLOGÍA • Es la ciencia que estudia los microorganismos ya sea como células individuales o como asociaciones celulares. • Se centra en el estudio de la célula como tal (biología celular) MICROBIOLOGÍA Una célula microbiana aislada es, en general, capaz de llevar a cabo sus procesos vitales: – Asimilar nutrientes y metabolizarlos para tener energía y crecer. – y reproducción independientemente de otras células, de la misma o de diferente clase. – Excretar productos de desecho. – Reaccionar ante cambios en el ambiente. Máquinas que químicas. realizan transformaciones TAXONOMÍA Jerarquía taxonómica – clasificación completa hasta alcanzar el nivel taxonómico más alto, el dominio. Los órdenes en divisiones, etc. Las familias en órdenes Género: Es una colección (grupo) de especies distintas que comparten unas propiedades pero difieren en otras, generalmente las menos importantes. Los géneros se agrupan en familias Especie: Constituida por un grupo de microorganismos relacionados que tienen en común un amplio número de características. ordenes y familias Fuente: http://wolfman.net/Essays/xphil2.TAXONOMÍA Jerarquía taxonómica Dominio: Es el nivel de clasificación más alto.rucus.jpg . agrupa a las divisiones. y se reporta usualmente: El genero: En mayúscula o la inicial La especie: En minúscula y completa Bacillus turigiensis B. subtilis Se escriben en letra cursiva .TAXONOMÍA Nomenclatura Se utiliza como mayor nivel la familia. fluorescens. putida Bacillus stearothermophilus Bacillus acidocaldarius. P.TAXONOMÍA Nomenclatura – ejemplos Pseudomona fluorescens. P. Fuente: http://cjhsbio.com/Pictures .wikispaces. TAXONOMÍA The International Code of Nomenclature of Bacteria Colecciones de cultivos a nivel mundial Ejemplo – ATCC (American Type Culture Collection) Los nuevos microorganismos aislados se reportan – Cepa Tipo . . . . . proveniente de la página mencionada.atcc. .org • Investigue el microorganismo apto para la realización de su proyecto. • En la próxima clase debe presentar de forma impresa la caracterización del microorganismo.• Consulte la página web: www. MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Fuente:http:http://fmvz.uvigo.uat.php Fuente:http://webs.edu.es/mmegias/6-tecnicas/6optico.es/mmegias/6-tecnicas/6optico.php .mx/aves/ Fuente:http://webs.uvigo. Realizar una identificación completa de los microorganismos. .Aislar y cultivar microorganismos. . forma y estructura de células individuales.Determinar tamaño. .MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Son un conjunto de técnicas que permiten: . .Conocer la diversidad metabólica. MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Microscopía óptica y electrónica Microscopía Óptica: campo claro (lentes – dispersión) contrastes de fases – medio y la célula (índice de refracción) campo oscuro .olympusmicro.jpg (clorofila o colorante) .com/primer/techniques/nearfield/i mages/nearfieldintrofigure1.fluorescencia Fuente:http://www. htm .es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni _02/56/cap304.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Microscopía Óptica: Alrededor de 1000x de ampliación Fuente:http://aulavirtual.usal. me.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Microscopía Óptica – Ejemplo Fuentes: http://www.jpg http://nanolab.jpg – Electrónica .emsdiasum.cmu.edu/projects/swimming/Fig1-final-version.com/microscopy/products/sem/wet/images/examples. o.com/2008/09/portaobjetos. fijados y teñidos Fuente: http://tplaboratorioquimico.html Montaje húmedo y gota pendiente Se toma una pequeña cantidad de suspensión de células y se soporta sobre una laminilla de vidrio (porta objetos) y se cubre con una laminilla mucho más pequeña y delgada (cubre objetos) .blogspot.: Montaje húmedo y gota pendiente Películas o frotis.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Técnicas en Microscopía óptica Suspensión de m. pp 157 .MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Técnicas en Microscopía óptica Suspensión de m. Fundamentos de biotecnología.o. 2004. Victoria I. Montaje húmedo y gota pendiente Fuente: Medina. MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Técnicas en Microscopía óptica Películas o frotis. fijados y teñidos Se toma la suspensión de células. se dispone sobre el porta objetos y se seca. luego se fija con calor y se tiñe apropiadamente Fuente: http://www.iesberlanga.org/WEBBIOLOGIA/recurprac/TECNICAS/microsc opia.html . organelos entre otros) Tinción simple: Un solo colorante Tinción diferencial: Varios colorantes .MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Técnicas en Microscopía óptica Técnicas de tinción Colorantes catiónicos ( ácidos nucleicos y polisacáridos ácidos) ej: Azul de metileno. membrana. cápsulas. para identificar estructuras (esporas. cristal violeta y safranina Se utilizan para mejorar contraste. Bacterias Gram positivas (tiñen de color morado) Tarea: Investigar sobre protocolo y función de tinción de Gram .MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Técnicas en Microscopía óptica Técnicas de tinción – Tinción de Gram Es la tinción más importante.Bacterias Gram negativas (tiñen rosado o no tiñen) . las bacterias se clasifican en dos grupos importantes: . Melitensis.com/2009/05/microorganismos. Fuente: http://velardehernandez.html .MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Ejemplos de tinción B.com/2009/05/microorganismos.html Staphyloccocus aureus Fuente: http://velardehernandez.blogspot.blogspot. MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Mantenimiento y conservación cultivos puros . MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Mantenimiento y conservación de cultivos puros Los cultivos puros son aquellos que poseen un solo tipo de microorganismos. Si crecen conjuntamente otro tipo de microorganismos a estos se les llama “contaminantes” y se dice que el cultivo está “contaminado” . htm .com/Page499.galeon.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Mantenimiento y conservación de cultivos puros Cultivos puros Cultivo contaminado Fuente: http://apuntesdeinfecciosas. Se utilizan cajas de petri o tubos para realizar los cultivos.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Mantenimiento y conservación de cultivos puros Los cultivos se crecen en soluciones acuosas llamadas medios de cultivo.wordpress. Medios de cultivo. También los medios pueden ser sólidos o semisólidos (agar).com/2007/10/05/mis-primeras-vivencias-como-alumno-interno/ . Fuente: http://permian. jpg .org/coolimages/images/csi/bacteria_new.MÉTODOS EN MICROBIOLOGÍA Mantenimiento y conservación de cultivos puros Fuente http://whyfiles. microbiologyprocedure.htm .com/microbiological-methods/pure-culture-methods.Información en internet http://www. . • Investigue en la página anteriormente mostrada.ACTIVIDADES • Mencione la aplicación de la microscopía en la realización de su proyecto. ¿cuál es el medio de cultivo del microorganismo que anteriormente eligió para la realización de su proyecto. es un cultivo de laboratorio que contiene una sola especie de microorganismos. Cada colonia particular será luego utilizada para establecer nuevos cultivos con la seguridad de que sólo un tipo de microorganismo estará presente. Mediante una serie de métodos que separan las células individuales de tal manera que cuando ellas se multiplican cada una formará una colonia distinta.Cultivos puros Según la microbiología. . Un cultivo puro usualmente se obtiene de un cultivo mixto (que contiene varias especies). Cultivos puros Los cultivos puros pueden ser más fácilmente separados si el medio de crecimiento (o medio de cultivo/reacción) favorece el crecimiento de un microorganismo particular y al mismo tiempo excluye el crecimiento de otros. Fuente: http://www.php .com/placapetri.microclar. agar) Inóculo: Es un volumen de una suspensión inicial de células que se desean cultivar. Al evento de adicionar el inóculo a un caldo de cultivo se le llama inocular y el momento en que se lleva a cabo este evento es el tiempo de inoculación. también se le puede adicionar un agente solidificante (gelatina. .Técnicas de Cultivo Medio de cultivo: Es una solución acuosa de nutrientes y sales que permiten el crecimiento de las células. Técnicas de Cultivo Incubación: El tiempo de incubación es el periodo que transcurre entre la inoculación y el fin de la reacción (crecimiento celular. son fácilmente identificables en cajas de petri . También se conoce como tiempo de fermentación Si la siembra se realiza sobre agar apropiadamente se da lugar a la formación de colonias (masas individuales de células de un mismo tipo). etc). producción de un metabolito. es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02/56/cap309.usal.htm .Técnicas de Siembra • Cultivo en placa por estrías Fuente: http://aulavirtual. es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02/56/cap309.htm .usal.• Método de vertido en placa Fuente: http://aulavirtual. pp 161 .• Cultivo de enriquecimiento Cultivo de enriquecimiento. Victoria I. 2004. Fuente: Medina. • Cultivo por extensión en placa . Técnicas de Siembra .